三七总皂苷对SAM-P/8小鼠海马中衰老相关基因表达的影响

目的探讨三七总皂苷对SAM-P/8小鼠海马中10个衰老相关基因表达的影响。方法采用RT-PCR技术检测10个衰老相关基因在各组小鼠海马中的表达及变化情况。结果各基因在海马中均有表达,成年三七组与成年对照组比较,SCN2B表达显著增加;老年三七组与老年对照组比较,MAP2、Sortilin-1、Rab6A、Calcineurin-B和MAPKK4的表达减少;MAP1B、Calmodulin-1、Regucalcin和RAP2A基因的表达在各组之间比较均没有变化。结论三七总皂苷可能通过调节部分衰老相关基因的表达来发挥其抗衰老的作用,但早期的预防比晚期治疗更加重要。

快速老化小鼠SAM-P/8出现类帕金森病现象初探

目的探讨快速老化小鼠SAM-P/8的同向旋转现象与帕金森病动物模型的相关性。方法取发作旋转行为的7月龄雄性SAM-P/8和同源对照SAM-R/1小鼠各6只,分为旋转组和正常对照组两组,首先采用老化度评价标准对其老化度进行评定,其次根据帕金森病动物模型造模标准对其旋转行为进行评定。结果同月龄SAM-P/8的老化度高于SAM-R/1;SAM-P/8出现可重复的同向右侧旋转,频率为60 r/min,符合帕金森病动物模型造模成功的标准,SAM-R/1无旋转现象出现。结论初步认定SAM-P/8的同向旋转现象为类帕金森病现象,对帕金森病研究有重要意义。

中药Q0409筛选方改善SAM-P/8小鼠的学习记忆能力

目的:研究中药Q0409筛选方是否能够改善SAM-P/8小鼠的学习记忆能力及其初步机制。方法:4月龄SAM-P/8小鼠、SAM-R/1小鼠和昆明小鼠共91只,分别标记雌雄,根据动物在Morris水迷宫实验找到平台潜伏期的长短,按随机区组法分成5组,即正常对照组、SAM-R/1对照组、疾病模型组、中药Q0409筛选方治疗组和阳性药物(石杉碱甲)组,采用不同的药物或蒸馏水连续灌胃60 d(即从4月龄到6月龄)。第61~65天,先灌胃相应剂量药物或双蒸水,1 h后进行Morris水迷宫实验,观测行为学指标。在第65天,进行水迷宫测试结束后立即处死小鼠,取出脑海马组织,将其一半置玻璃匀浆器中加入预冷生理盐水制成10%(g/m L)匀浆,用于测定脑海马组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(ACh E)的活性;将另一半海马组织用4%多聚甲醛固定,然后进行石蜡包埋及切片,进行免疫组化染色以观察β-淀粉样蛋白(Aβ)的表达情况。结果:与疾病模型组相比,中药Q0409治疗组小鼠Morris水迷宫实验中定位航行和空间探索实验的结果显著改善(P<0.05),海马组织匀浆ACh E活性显著降低(P<0.05);但上述指标与正常对照组和阳性药物组相比差异无统计学显著性。免疫组化观察结果显示,中药Q0409筛选方治疗组雄鼠未见典型的"老年斑",雌鼠可见"老年斑"颜色变浅,两者的海马CA1区Aβ蛋白沉积的阳性面积减少;这些结果与阳性药物组相似。结论:中药Q0409筛选方可有效改善SAM-P/8小鼠的学习和记忆能力,其机制可能与其抑制海马区ACh E活性并减少Aβ蛋白的沉积等有关,其效果与石杉碱甲相似。

抗氧化剂TA9901对加速老化鼠(SAM-P/8)行为学的影响

目的 观察抗氧化剂TA990 1对实验动物学习记忆功能的影响 ,为其临床应用提供实验依据。方法 用加速老化鼠 (SAM) P/ 8小鼠 2 0只随机分为对照组、TA1组 (0 0 5 %TA990 1)、TA2组 (0 5 %TA990 1)、和VE组 (5 0 0mgVE/kg饲料 ) ,分别进行Morris水迷宫行为学测试 ,观察TA990 1对SAM P/ 8小鼠的作用。结果 对照组平均逃避潜伏期是 (6 2 78± 8 75 )sec ,TA1组、TA2组和VE组的逃避潜伏期分别为 (5 3 94± 5 79)、(36 38± 4 77)和 (40 2 2± 5 5 1)sec。与对照组相比 ,TA2组和VE组逃避潜伏期减少均具有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,TA1组和TA2组比较也有显著性差异 (P <0 0 5 )。空间探索试验结果以平台象限的游泳距离占总的游泳距离的百分比判断动物的空间学习记忆能力 ,对照组、TA1组、TA2组和VE组小鼠的平台象限游泳距离所占的百分比分别为 (11 33± 2 5 1)、(15 0 9± 4 0 2 )、(2 4 35± 7 89)和 (2 0 93± 5 0 2 ) % ,对照组与TA2组和VE组相比 ,差异均具有显著性 (P <0 0 5 ) ,TA1组与TA2组之间差异也有显著性 (P <0 0 5 )。结论 TA990 1能显著改善SAM P/ 8的学习记忆能力 ,初步显示TA990 1有改善学习记忆功能及抗痴呆的药理作用。

针刺对快速老化痴呆模型小白鼠SAM-P/8脑组织儿茶酚胺类神经递质影响的实验研究

目的 观察“醒脑开窍”针法对 10月龄SAM P/8老化鼠脑组织儿茶酚胺类神经递质的影响 ,从神经递质变化的角度揭示该针法治疗痴呆的作用机理。方法 以高效液相色谱 电化学检测法测定脑组织神经递质。结果 ① 10月龄SAM P/8较同月龄SAM R/1组比较去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素 (E)、多巴胺 (DA)均有下降趋势。②“醒脑开窍”针刺法可提高SAM P/8老化鼠脑组织内降低的NE、E、DA含量 ,且该针刺法之穴位较其他穴位在抗衰老方面有一定特异性。结论 通过观察“醒脑开窍”针刺法对脑组织内儿茶酚胺类神经递质的影响 ,揭示了该针法改善老化鼠学习记忆障碍的中枢作用机理。

快速老化痴呆模型小鼠(SAMP/8)行为学老化特征的增龄性变化观察

应用快速老化痴呆模型小鼠SAM -P/8和正常老化对照小鼠SAM -R/1 ,从十字高架迷路实验、活动度实验、穿梭箱实验及老化度评分等方面观察其行为学的增龄性变化。研究结果表明 :与SAM -R/1小鼠相比 ,SAM -P/8小鼠随增龄老化度评分、活动度等明显增高 ;在高架迷路实验中 ,随增龄SAM -P/8小鼠进入危险区域的次数、时间及距离明显增加 (P <0 .0 1 ) ;在穿梭箱实验中 ,SAM -P/8非条件反射次数、潜伏时间、延迟时间均明显延长 (P <0 .0 1 )。本研究提示 :SAM -P/8具有成熟期过后( 4～ 6月 )迅速老化的生物学特征 ,在老化度、学习记忆能力及认知功能等方面出现规律性的、一致而明显的增龄性变化 ;学习记忆力障碍、低恐怖不安状态为SAM

抗氧化剂TA9902对快速老化小鼠-P/8抗氧化及DNA氧化损伤影响的实验研究

目的观察抗氧化剂TA9902对快速老化小鼠P/8(SAM-P/8)抗氧化能力及淋巴细胞DNA氧化损伤的影响,为其临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供科学依据。方法选用3月龄雄性SAM-P/8小鼠52只,采用随机数表将其分为老年组(12只)、TA9901组(12只)、EGb761组(14只)、TA9902组(14只)。TA9901组和EGb761组饮水中分别加入0.5%TA9901和0.08%EGb761,TA9902组加入1.0%的TA9002,老年组给予正常饮水饮食。清洁级环境饲养。动物喂养期为6个月。分别检测各组血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量以及淋巴细胞DNA自发性损伤和10μmol/LH2O2诱导的氧化损伤。结果TA9902组能明显提高血浆SOD、血浆及膜GSH-Px活性,降低血浆MDA水平,与其它3组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);TA9901组、EGb761组血浆SOD、血浆及膜GSH-Px活性显著高于老年组,血浆MDA水平显著低于老年组,差异也有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。各组的淋巴细胞DNA自发性氧化损伤均较低,各组间差异没有统计学意义(P>0.05),而当加入10μmol/LH2O2时,诱发氧化损伤明显加重,TA9902组的DNA氧化损伤较其它3组显著降低(P<0.05,P<0.01),TA9901组、EGb761组的DNA氧化损伤也较老年组明显降低(P<0.05)。与老年组比较,TA9901组、EGb761组鼠尿O6-氧-甲基鸟嘌呤(mG)含量下降(P<0.05),TA9902组下降较为明显(P<0.01)。而TA9901组、EGb761组、TA9902组间差异没有统计学意义(P>0.05)。结论TA9902能显著降低机体的脂质过氧化水平并能提高抗氧化酶活性,同时,DNA诱发氧化损伤及烷化损伤则明显下降。TA9902的抗氧化作用优于TA9901和EGb761。

中药材玫瑰花抗氧化及作用机制的研究

采用测定红细胞溶血抑制率、肝组织匀浆脂质过氧化产物,超氧化物歧化酶(SOD)活性测定方法和现代分子生物学技术RT-PCR基因扩增法检测中药材玫瑰花(F21)对小鼠(SAM-P／8)体内抗氧化作用,并探讨抗氧化作用机制.经过体内实验,F21对不同月龄小鼠的抗氧化效果不同,对8月龄以上的小鼠抗氧化作用效果显著,同时明显提高了SOD基因的表达量.结果表明F21对衰老的鼠不仅在组织水平上和细胞水平上有显著的抗氧化作用,而且在分子水平上能提高基因表达量.F21含有高效抗氧化成分,是一种良好的天然抗氧化剂,具有进一步研究价值.

黄芪抗脑衰老作用的研究

目的研究黄芪对快速衰老鼠脑中12个衰老相关基因表达的影响。方法雄性SAM-P/8老年鼠,随机分为对照组和黄芪组,黄芪组每日腹腔注射黄芪注射液,14d后取材,RT-PCR检测。结果黄芪组与对照组比较。Gabarb3、MAPKK4和Sortilin在鼠脑额叶和海马中表达下调,CalcineurinB、MAP2和P35仅在鼠脑海马中表达下调,RAB6A在鼠脑额叶中表达下调,Calmodulin、MAP1B、RAP2A、SCN2B和Synapsin的表达在黄芪组和对照组之间比较没有统计学差异。结论黄芪可下调上述7种基因在衰老鼠脑中的表达发挥抗衰老作用,通过抑制这些基因产物对脑的消极作用抗衰老。

抗氧化剂TA9901抑制加速老化鼠脑淀粉样颗粒的沉积

目的 观察抗氧化剂TA990 1对加速老化鼠P 8(SAM P 8)脑中淀粉样颗粒 (MSG)沉积的影响 ,为临床治疗阿尔采默病 (AD)提供科学依据。 方法 2 5月龄雄性SAM P 8小鼠随机分为对照组、TA1组、TA2组和VE组 ,分别给予正常饮食、0 0 5 %TA990 1、0 5 %TA990 1和特制VitaminE(VE)饲料 (5 0 0mgVE kg)喂养 3 5个月。用Go mori六胺银法显示淀粉样颗粒 ,对海马CA1区的银染颗粒 (MSG)的体视学参数和分布进行图像分析。 结果 MSG为圆形和卵圆形 ,主要分布于海马、皮质深层和小脑 ;海马内MSG主要成群分布于各层。各组海马CA1区MSG颗粒数比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ,但TA1组、TA2组和VE组的MSG颗粒直径和面积均较对照组明显减小 (P <0 0 5 ) ,以TA2和VE组更为显著 (P <0 0 1) ;各实验组MSG的平均灰度均较对照组降低 (P <0 0 1) ;对照、TA1、TA2和VE组的低密度颗粒区分别占 12 0 5 %、36 5 2 %、4 7 91%和 4 4 6 5 % ,实验组在低密度区的颗粒数明显增多。 结论 TA990 1减少了SAM P 8脑中淀粉样颗粒的大小和密度 ,显示TA990

快速老化系小鼠与昆明系小鼠AD相关指标的比较

目的:观察6月龄的快速老化系SAM-P/8、SAM-R/1小鼠与昆明系小鼠的AD相关指标的变化。方法:取健康(20±5)g6月龄SAM-P/8小鼠、SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠各14只,雌雄各半,随机分成:SAM-P/8小鼠(AD疾病模型小鼠)、SAM-R/1小鼠对照组和昆明系小鼠对照组,观察上述3组小鼠行为学、神经生化、超微结构、基因表达情况。结果:6月龄SAM-P/8小鼠1-4d学习成绩、第5d记忆成绩低于6月龄SMA-R小鼠和昆明系小鼠(P<0.05),真性胆碱酯酶活性则高于6月龄SMA-R/1小鼠和昆明系小鼠(P<0.05);SAM-P/8小鼠海马神经元超微结构显示明显纤维化,而SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠无明显纤维化;SAM-P/8小鼠脑神经细胞的凋亡相关基因表达有明显上调达2倍以上,而SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠则未见这些基因有明显上调。SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠比较,除基因表达略有差异之外,其它指标无明显差异。结论:6月龄SAM-P/8小鼠在很多方面已经具备了AD自然发病模型典型特征。而用于正常对照的6月龄SAM-R/1与昆明系小鼠的行为学、TchE活性、超微结构则无显著差异;凋亡相关基因表达差异不明显,而部分基因表达则有一定差异。

快速老化小鼠海马脑片CA1区神经元放电特征模式研究

目的研究快速老化对记忆脑区海马CA1神经元电活动兴奋性的影响。方法应用脑片和细胞外记录技术，记录快速老化（sAM．P／8）组和正常对照组小鼠在海马脑片CA1区的锥体神经元自发放电序列，通过计算2组神经元自发放电频率和神经元放电间隔（ISI）研究快速老化对海马CA1区神经元兴奋性的影响。结果快速老化组小鼠海马CA1区神经元自发放电频率为（1．052±0．364）Hz（样本数n1=14），正常对照组为4．416＋1．306Hz（样本数n1=22），前者比后者显著降低（P〈0．05）；快速老化组ISI≥1s，占80．5％，正常对照组ISI均≤1S，其中95．6％≤0．5S，前者比后者显著延长。结论快速老化组小鼠海马脑片CA1区神经元的发放频率降低，ISI延长。提示快速老化对小鼠海马区神经元兴奋性电活动起到了明显的抑制作用。