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夜来香SAMT基因的分离与原核表达 被引量:3
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作者 杨华丽 吕恃衡 +4 位作者 蔡韡韡 郑鸿昌 潘东明 李子真 陈桂信 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第10期1831-1838,共8页
为探究夜来香(Cestrum nocturnum)花香基因SAMT在花香代谢中的调控作用,以花瓣为材料,采用RTPCR和RACE技术相结合,克隆夜来香SAMT基因的全长c DNA。结果表明:该c DNA的序列长度为1 493 bp,编码365个氨基酸,其中包含1 098 bp ORF、130 b... 为探究夜来香(Cestrum nocturnum)花香基因SAMT在花香代谢中的调控作用,以花瓣为材料,采用RTPCR和RACE技术相结合,克隆夜来香SAMT基因的全长c DNA。结果表明:该c DNA的序列长度为1 493 bp,编码365个氨基酸,其中包含1 098 bp ORF、130 bp 5′UTR和265 bp 3′UTR,将其命名为Cn SAMT;生物信息学分析结果表明:该基因所编码的氨基酸序列与烟草、番茄的同源性分别为98%和98%,属于甲基转移酶-7家族;原核表达结果表明:Cn SAMT的蛋白表达产物约为42 ku,与软件预测的结果大致相同。采用染色体步移技术,克隆夜来香Cn SAMT的5′端调控序列,结果表明:该序列长度为993 bp,且该序列除了含有TATA-box、CAAT-box等启动子核心元件外,还含有光、生长素、脱落酸、热胁迫、缺氧胁迫等外界环境条件响应的顺式作用元件。 展开更多
关键词 夜来香 samt基因 原核表达 5′端调控序列
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SAMT公司的Color Master CM6型多用途染色装置
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作者 谢晓英 《纺织导报》 CAS 1991年第11期12-12,共1页
Color Master CM6是一种新型的纺织实验室染色装置,它能控制、校正和修改染色工艺处方,对于染料和助剂的质量控制来说,是必不可少的设备。 采用实验机方面的最新技术,Color Master CM6有6个独立的染色单元,每个染色单元都有各自的驱动... Color Master CM6是一种新型的纺织实验室染色装置,它能控制、校正和修改染色工艺处方,对于染料和助剂的质量控制来说,是必不可少的设备。 采用实验机方面的最新技术,Color Master CM6有6个独立的染色单元,每个染色单元都有各自的驱动装置。 该装置的染色温度在20~140℃之间,最小浴比为1∶5,染色容量为5~40公斤。染液通过6个活塞泵以每分钟35冲程的速度,从内向外。 展开更多
关键词 染色工艺 浴比 染色温度 活塞泵 实验机 samt 质量控制 主架 反僵 交替地
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蜡梅花香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量:3
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作者 马蕾 李慧芬 +2 位作者 彭忱晨 陈子柱 龙章富 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第1期82-87,共6页
[目的]研究蜡梅香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达。[方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT-PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收RT-PCR产物,将其与PMD18-T载体进行T-A克隆连接并导入大肠杆菌DH5,经菌落PCR和双酶切鉴定,... [目的]研究蜡梅香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达。[方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT-PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收RT-PCR产物,将其与PMD18-T载体进行T-A克隆连接并导入大肠杆菌DH5,经菌落PCR和双酶切鉴定,筛选带有目的基因的重组质粒并进行测序。[结果]测序证实成功克隆得到蜡梅花香基因SAMTcDNA的ORF片段,其长度为1196bp,编码380个氨基酸残基,与已报导的蜡梅SAMT(ABU88887)的同源性为99.2%将SAMT基因亚克隆到原核表达载体PGEX4T-1中,转化大肠杆菌DH5α获得其原核表达菌株pGSAMT;采用0.01mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,SAMT的融合表达蛋白分子量约为66kDa,与预期的26KDa的GST带和42.3KDa的蜡梅SAMT基因编码蛋白构成的融合蛋白大小接近。[结论]该研究成功克隆并表达了蜡梅花香基因SAMT。 展开更多
关键词 蜡梅 花香基因 CDNA 克隆 原核表达
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蜡梅花香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:2
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作者 马蕾 李慧芬 +2 位作者 彭忱晨 陈子柱 龙章富 《安徽农业科学》 CAS 2012年第3期1324-1328,1331,共6页
[目的]研究蜡梅花香基因SAMT cDNA的克隆及表达。[方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT-PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收RT-PCR产物,将其与PMD18-T载体进行T-A克隆连接并导入大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和双酶切鉴定,筛选带有目... [目的]研究蜡梅花香基因SAMT cDNA的克隆及表达。[方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT-PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收RT-PCR产物,将其与PMD18-T载体进行T-A克隆连接并导入大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和双酶切鉴定,筛选带有目的基因的重组质粒并进行测序。[结果]测序证实成功克隆得到蜡梅花香基因SAMT cDNA的ORF片段,其长度为1 196 bp,编码380个氨基酸残基,与已报导的蜡梅SAMT(ABU88887)的同源性为99.2%。将SAMT基因亚克隆到原核表达载体PGEX4T-1中获得重组菌种命名为PGSAMT,用0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,SAMT的融合表达蛋白分子量约为66 kDa,与预期的26 kDa的GST带和42.3 kDa的蜡梅SAMT基因编码蛋白构成的融合蛋白大小接近。[结论]该研究成功克隆并表达蜡梅花香基因SAMT。 展开更多
关键词 蜡梅 花香基因 CDNA 克隆 原核表达
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柑橘黄龙病相关水杨酸羧基甲基转移酶基因CsSAMT-1的克隆与表达分析 被引量:6
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作者 白晓晶 许兰珍 +9 位作者 贾瑞瑞 周鹏飞 陈敏 何永睿 彭爱红 雷天刚 李强 姚利晓 陈善春 邹修平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2265-2274,共10页
为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT^(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病... 为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT^(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病锦橙中CsSAMT^(-1)在感染HLB后上调表达,且在叶脉中的表达量显著高于叶肉;而耐病酸柚中CsSAMT^(-1)呈组成型表达。外源水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理锦橙和酸柚,均可诱导CsSAMT^(-1)上调表达。HLB侵染前,耐病酸柚叶脉中SA和水杨酸甲酯(MeSA)含量分别为11.85和18.18 ng·g^(-1),显著高于锦橙(0.82和0.01 ng·g^(-1));HLB侵染后,锦橙中SA和MeSA含量明显上升,酸柚中SA含量明显下降,MeSA含量基本保持原有水平。研究表明,Cs SAMT^(-1)可能通过调节SA和Me SA信号分子转换来增强对柑橘黄龙病的抗性。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 samt MESA 基因表达
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杨树SAMT基因的克隆及生物信息学分析
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作者 董慧霞 孟繁丽 +1 位作者 陈军 理永霞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期4936-4942,共7页
为了揭示水杨酸甲酯转移酶SAMT (Salicylic acid carboxyl methyltransferase)基因在杨树抗溃疡病中的功能。本研究采用RT-PCR技术和pGM-T克隆的方法,获得了‘84K杨’的SAMT基因序列,并对该基因编码的蛋白的理化性质、疏水性、结构域、... 为了揭示水杨酸甲酯转移酶SAMT (Salicylic acid carboxyl methyltransferase)基因在杨树抗溃疡病中的功能。本研究采用RT-PCR技术和pGM-T克隆的方法,获得了‘84K杨’的SAMT基因序列,并对该基因编码的蛋白的理化性质、疏水性、结构域、功能、二级结构及亚细胞定位等进行了生物信息学分析。结果显示:该基因位于细胞质中,属于甲基转移酶7家族,为亲水性蛋白。预测结果为下一步研究该基因在杨树抗溃疡病中的功能提供了帮助,也为其在其他多年生木本植物中的功能研究提供了参考。 展开更多
关键词 ‘84K杨’ samt基因 生物信息学分析
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薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析 被引量:5
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作者 王文天 彭少麟 +5 位作者 李冬梅 王冬梅 王瑞龙 田彩娟 赵厚本 户桂敏 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期445-450,共6页
为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用RACE法从薇甘菊(Mikania micrantha)cDNA文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因SAMT全长cDNA,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析。结果表明,该基因cDNA全长1299 bp,其... 为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用RACE法从薇甘菊(Mikania micrantha)cDNA文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因SAMT全长cDNA,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析。结果表明,该基因cDNA全长1299 bp,其中编码区长1089 bp,编码362个氨基酸,Blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(Clarkia breweri)的相似性为74%,证实其主要功能是将水杨酸(salicylic acid,SA)甲基化成水杨酸甲酯(methyl salicylate,MeSA),由此将该基因命名为MmSAMT,GenBank登录号为FJ869889。将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致。Western blot显示在20℃、0.05 mmol/L IPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质。对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水平达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级。 展开更多
关键词 薇甘菊 samt RACE 原核表达 WESTERN BLOT RT-PCR
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铈离子/4-甲氧基丁二酰-对-甲苯胺或4-甲氧基马来酰-对-甲苯胺体系引发烯类聚合 被引量:1
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作者 王伟 丘坤元 冯新德 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第2期219-224,共6页
研究了铈离子与四种不同结构的酰苯胺类化合物,如4-甲氧基丁二酰苯胺(MSA)-4-甲氧基丁二酰-对-甲苯胺(MST)、丁二酸单酰-对-甲苯胺(SAMT)和4-甲氧基马来酰-对-甲苯胺(MMT),组成的引发体系对丙烯酰胺聚合的影响,测定了聚合表现活化能和... 研究了铈离子与四种不同结构的酰苯胺类化合物,如4-甲氧基丁二酰苯胺(MSA)-4-甲氧基丁二酰-对-甲苯胺(MST)、丁二酸单酰-对-甲苯胺(SAMT)和4-甲氧基马来酰-对-甲苯胺(MMT),组成的引发体系对丙烯酰胺聚合的影响,测定了聚合表现活化能和聚合反应动力学方程。由聚丙烯腈的红外光谱端基分析证实了MST组分与铈离子反应产生的自由基能引发烯类聚合。 展开更多
关键词 引发体系 烯类 聚合 MSA MST samt
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NaCl胁迫对油莎豆块茎萌发与幼苗生长的影响 被引量:7
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作者 杨鹭生 李国平 《资源开发与市场》 CAS CSSCI 2014年第7期771-774,共4页
采用沙培法,研究不同浓度的NaCl胁迫对三种油莎豆品系块茎萌发和幼苗生长的影响,以探讨油莎豆的抗盐性。结果表明:油莎豆块茎发芽率随着NaCl胁迫浓度升高呈逐渐降低趋势,500mmol/L时发芽率为0;油莎豆幼苗叶片中叶绿素含量随着NaCl胁迫... 采用沙培法,研究不同浓度的NaCl胁迫对三种油莎豆品系块茎萌发和幼苗生长的影响,以探讨油莎豆的抗盐性。结果表明:油莎豆块茎发芽率随着NaCl胁迫浓度升高呈逐渐降低趋势,500mmol/L时发芽率为0;油莎豆幼苗叶片中叶绿素含量随着NaCl胁迫浓度的升高而降低,而蛋白质和脯氨酸含量随着NaCl胁迫浓度的增加而升高,说明NaCl胁迫对油莎豆块茎萌发和幼苗生长具有严重的抑制作用。该研究结果为油莎豆在盐碱地的种植、栽培提供了重要的参考资料。 展开更多
关键词 盐胁迫 块茎 萌发 幼苗生长 油莎豆
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中国水仙水杨酸甲酯合成酶基因克隆与表达分析 被引量:2
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作者 林江波 王伟英 +1 位作者 邹晖 戴艺民 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期141-146,共6页
为了解中国水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)花香气形成的分子机理,以花发育形成相关基因的SSH文库获得的cDNA片段为基础,利用RACE技术从中国水仙花朵中克隆了水杨酸甲酯合成酶基因,命名为NtSAMT1(GenBank No.JX273470),其cDNA全... 为了解中国水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)花香气形成的分子机理,以花发育形成相关基因的SSH文库获得的cDNA片段为基础,利用RACE技术从中国水仙花朵中克隆了水杨酸甲酯合成酶基因,命名为NtSAMT1(GenBank No.JX273470),其cDNA全长1323 bp,包含1个1131 bp完整阅读框架,编码376个氨基酸,具有Methyltransf_7 superfamily蛋白保守区,与仙女扇(Clarkia breweri)SAMT蛋白(1m6eX)的三维结构相似。系统进化树分析表明,中国水仙与粳稻的SAMT蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明NtSAMT1在大肠杆菌中能高效表达。半定量RT-PCR分析表明,NtSAMT1在花蕾期就有表达,第1天完全开放时各部位均有表达,以雄蕊与雌蕊的表达量最高,第8天已检测不到表达。 展开更多
关键词 中国水仙 水杨酸甲酯合成酶 基因表达
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农产品中类似神经鞘脂类真菌毒素的污染与控制 被引量:1
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作者 赵彦婷 王建升 汪俏梅 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期746-753,共8页
类似神经鞘脂类真菌毒素(SAMT)腐马素和AAL-Toxin因其结构与二氢神经鞘氨醇类似,它们竞争性抑制二氢神经鞘氨醇N-酰基转移酶的活性,打破生物体内神经鞘脂类物质的平衡,从而对人畜健康产生威胁。本文介绍了SAMT的结构、生物合成和毒理机... 类似神经鞘脂类真菌毒素(SAMT)腐马素和AAL-Toxin因其结构与二氢神经鞘氨醇类似,它们竞争性抑制二氢神经鞘氨醇N-酰基转移酶的活性,打破生物体内神经鞘脂类物质的平衡,从而对人畜健康产生威胁。本文介绍了SAMT的结构、生物合成和毒理机制,综述了SAMT及其产毒菌株的各种检测方法及在农产品中的污染状况和相应的防控手段,为农产品的安全生产和SAMT的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 类似神经鞘脂类真菌毒素 毒素检测 毒素污染 安全防控
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A computational fluid dynamics model for wind simulation:model implementation and experimental validation 被引量:1
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作者 Zhuo-dong ZHANG Ralf WIELAND +4 位作者 Matthias REICHE Roger FUNK Carsten HOFFMANN Yong LI Michael SOMMER 《Journal of Zhejiang University-Science A(Applied Physics & Engineering)》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第4期274-283,共10页
To provide physically based wind modelling for wind erosion research at regional scale, a 3D computational fluid dynamics (CFD) wind model was developed. The model was programmed in C language based on the Navier-Stok... To provide physically based wind modelling for wind erosion research at regional scale, a 3D computational fluid dynamics (CFD) wind model was developed. The model was programmed in C language based on the Navier-Stokes equations, and it is freely available as open source. Integrated with the spatial analysis and modelling tool (SAMT), the wind model has convenient input preparation and powerful output visualization. To validate the wind model, a series of experiments was con- ducted in a wind tunnel. A blocking inflow experiment was designed to test the performance of the model on simulation of basic fluid processes. A round obstacle experiment was designed to check if the model could simulate the influences of the obstacle on wind field. Results show that measured and simulated wind fields have high correlations, and the wind model can simulate both the basic processes of the wind and the influences of the obstacle on the wind field. These results show the high reliability of the wind model. A digital elevation model (DEM) of an area (3800 m long and 1700 m wide) in the Xilingele grassland in Inner Mongolia (autonomous region, China) was applied to the model, and a 3D wind field has been successfully generated. The clear imple- mentation of the model and the adequate validation by wind tunnel experiments laid a solid foundation for the prediction and assessment of wind erosion at regional scale. 展开更多
关键词 风模型 计算液体动力学(CFD ) 风侵蚀 风隧道实验 空间分析和建模工具(samt ) 开放源代码
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