广州儿童秋冬腹泻中人类杯状病毒感染的分子流行病学研究

目的了解广州某医院秋冬季儿童腹泻中人类杯状病毒(HuCV)感染的分子流行病学特点。方法连续2个秋冬季腹泻流行季节收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本。采用ELISA检测轮状病毒,RT-PCR检测HuCV。部分阳性标本PCR产物进行纯化、测序,结合参考株相应核苷酸序列进行进化分析。结果诺瓦克样病毒(Norwalk-likevirus,NLVs)阳性率为12.35%(80/648),扎幌样病毒(Sapporo-likevirus,SLVs)阳性率为0.31%(2/648)。NLVs各月阳性率无显著性差异,主要感染2岁以下患儿。2003年流行株为GⅡ-3群和GⅡ-4群,2004年为GⅡ-4群。2株SLVs均为GⅠ-1群。结论NLVs是广州地区秋冬季节儿童腹泻的重要病原体,其流行株为GⅡ-3群、GⅡ-4群病毒株,但在不同的时间段可能存在不同的流行优势株;广州地区存在SLVs所致感染,与我国报告的SLV基因型不同。

广州地区扎幌样病毒的检出及基因型分析

目的了解广州腹泻儿童是否存在扎幌样病毒(Sapporo-like virus,SLV)感染。方法在2003年秋冬季腹泻流行期间在南方医院儿科收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本,并采用半套式反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测。纯化阳性标本PCR产物并测序,然后将其同GenBank中的参比毒株序列比较。结果收集的169份标本中有1份SLV(CH03354)PCR扩增阳性,检出率为0.59%,同源性分析表明该毒株属于SLV GⅠ-1群。结论广州地区存在SLV所致感染,本次实验检出毒株基因型与安徽毒株不同,说明我国不同地区可能存在不同的SLV基因型。

南京市发现感染札幌病毒致老年人腹泻

目的探讨应用分子生物学检测老年人腹泻病因的临床评价。方法随机收集2011年1~6月在南京某医院腹泻门诊就诊并临床诊断病毒性腹泻的60岁以上老年人的粪便20份,对诺如病毒、札幌病毒、轮状病毒、肠腺病毒和星状病毒进行分子生物学检测,并将检测结果与临床诊断进行比对,用于指导用药和治疗。结果 20份随机样中共检测到13份阳性,其中有5份诺如病毒,4份轮状病毒,2份肠腺病毒,1份星状病毒,1份札幌病毒,病毒感染阳性率高达65%,加上由于技术原因不能检测到的病毒,该结果说明临床判断的准确性很高。结论确定病原后采取支持疗法,病人康复,避免了抗生素的使用。另外,札幌病毒感染老年人致腹泻在南京是首次报道。

三种检测扎幌样病毒方法的比较分析

目的 比较三种常用检测扎幌样病毒的方法,以选取适合我国标本的较优检测方法。 方法 对收集到的169份粪便分别采用三种逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行检测,扩增产物进行测序分析。 结果 方法A、B、C检测阳性标本数分别为3份(排出诺瓦克病毒阳性标本后)、4份、1份。4份PCR产物测序分析只有1份为扎幌样病毒,其余为轮状病毒。 结论 方法C特异性最好,即半套式RT-PCR优于其它二种RT-PCR方法。

《星座》中的三重地理空间

《星座》是有岛武郎的最后一部小说，在这部未竟的长篇中有岛探讨了朝气蓬勃的年轻人面对人生的困境如何进行抉择，而白官舍、北海道、东京作为小说中的主要地理空间，构成了他们活动的舞台，三者就像同心圆一样并列存在，分别象征人物的内向心理空间、外向生活空间以及理想的符号空间，借此有岛探讨了世纪之交的知识分子们的困惑与彷徨，对知识分子进行了彻底的自省和自我批判，并最终指向了有岛作为清醒者、觉醒者的孤独。

珠海市冬春季节儿童病毒性腹泻的流行病学特征

目的探讨珠海市冬春季节儿童诺如病毒（NV）、扎如病毒（sV）和星状病毒（AstV）等3种重要病毒性腹泻的流行病学特征。方法采集2009年11月21日至2010年4月3日在珠海市妇幼保健院就诊的腹泻儿童粪便样本，选取轮状病毒和腺病毒筛查阴性的样本，采用逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）技术检测NV、SV和AstV的特异基因片段，并对诺如病毒检测阳性的样本进行分子分型。结果3种病毒季节总检出率为21．49％，其中2009年12月的检出率最高，为29．05％，而2010年2月检出率最低，为12．20％，87．96％的阳性样本来自0—30月龄患儿。NV、SV及AstV的季节检出率分别为14．70％、2．75％和4．04％，3种病毒中以NV和SV各月份阳性检出率差别较大，而AstV较为一致，12—18月龄患儿NV检出率最高（34．09％），60～120月龄患儿sV检出率最高（12．5％），24～30月龄患儿AstV检出率最高（16．67％）。诺如病毒经分子分型后均为GII型。结论NV是引起2009年冬春季节珠海市儿童病毒性腹泻的主要病原之一，SV与AstV也是重要的病原，应加强对婴幼儿NV、SV和AstV等3种重要病毒性腹泻的监测和防控工作。

猪源札幌病毒衣壳蛋白的原核表达及免疫原性检测

为获得猪源札幌病毒(SaV)衣壳蛋白(VP1),以SaV CH430株的RNA为模板,采用RT-PCR扩增VP1基因;将其克隆到原核表达载体pET-30a中,并将成功构建的原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。结果显示,获得的VP1基因全长为1 635bp,编码545个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,目的条带大小为63ku,与预期结果相符。重组菌在37℃、IPTG终浓度为0.8mmol/L、诱导表达6h时重组蛋白的表达量达到最大值,表达的目的蛋白主要以包涵体的形式存在。将纯化的VP1重组蛋白免疫家兔,得到了超免疫血清。Western-blot分析表明,该重组蛋白与超免疫血清具有良好的反应原性。上述试验结果为深入研究VP1蛋白的功能和研制ELISA诊断试剂盒奠定了基础。

于细节处造经典

这支名为＂传奇＂的SAPPORO啤酒广告在本次上海举行的金投赏上获得了四项金奖,有幸得到评委的独到点评：＂每一个细节都做得很仔细很用心,它很丰富,丰富到以至于第一次有些细节都看不到,每一次看的时候都有新发现。＂