组蛋白变体H2A.Z的转录调控功能与动态作用机制

H2A.Z是组蛋白H2A常见的组蛋白变体。近年来,人们通过多学科手段探究了H2A.Z对于基因转录的激活或抑制作用。本文在概述组蛋白变体和H2A.Z发展史的基础上,重点阐述了H2A.Z不同亚型、不同翻译后修饰和基因组分布在转录调控过程中的作用,明确了其生物学意义和在肿瘤发生发展、神经系统分化发育过程中的病理生理学意义,并总结了H2A.Z在染色质沉积或者移除的动态调控机制方面的研究进展,以期为深入了解组蛋白变体的多样性,并为寻找相关疾病诊疗的新靶点提供参考。

泛素结合酶E2变体1与恶性肿瘤发生及转移的研究进展

泛素结合酶E2变体1(ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 1,Ube2v1)属于泛素结合酶E2的一种变体蛋白(Ube2v),Ube2v1主要参与调控炎症及癌症的发生。目前有关Ube2v1的研究涉及多种肿瘤,多与肿瘤预后相关。有望成为肿瘤治疗的潜在靶点。在此就近年来Ube2v1在恶性肿瘤方面的研究进展作一综述。

原位低温拉曼光谱技术在人工合成CaCl_2-H_2O和MgCl_2-H_2O体系流体包裹体分析中的应用Ⅱ:低温下流体包裹体相变行为的研究

本文利用低温原位拉曼技术,对 CaCl_2-H_2O 体系和 MgCl_2-H_2O 体系人工合成流体包裹体进行了研究。结果表明:对于盐浓度不同的溶液而言,可采用不同的冷冻方式有效采集低温拉曼光谱;通过系统采集不同温度下的拉曼光谱,可以直接准确地测定包裹体中流体的成分和低温相变过程。人工合成包裹体原位低温拉曼光谱的研究,为将该技术应用于天然包裹体分研究奠定了理论基础,可以预见,该技术必将在流体包裹体研究领域发挥其它方法不可替代的重要作用。

水基ZrB_2膏体的挤出流变行为研究

研究了用于Freeze-form Extrusion Fabrication工艺的水基ZrB2膏体的挤出流变性能。动态力学分析表明该膏体可以作为粘弹塑性体来处理:在挤出过程中,屈服前表现为粘弹性固体特性,屈服后表现为粘塑性流体特性。虽然有剪切变稀现象,但在实际的挤出工艺范围内表观粘度变化平稳,水基ZrB2膏体可稳定挤出,并可用宾汉体流体进行描述。挤出实验表明:挤出速度高于0.1 mm/s时不发生液相迁移现象,可以用Benbow-Bridgwater模型来预测挤出压力和挤出参数的关系。

增强型体外反搏装置治疗老年2型糖尿病合并下肢动脉粥样硬化性病变的疗效观察

目的探讨增强型体外反搏装置(enhanced external counterpulsation,EECP)对老年T2DM合并下肢动脉粥样硬化性病变(lower extremity atherosclerotic disease,LEAD)的临床疗效。方法将老年T2DM合并LEAD病人随机分为常规治疗组和EECP组,每组各20例。常规治疗组给予一级预防及抗PLT、调脂、控制血糖、扩张血管等治疗,EECP组在上述常规治疗基础上加用EECP治疗。治疗前及治疗35 d后评价病人的症状、体征改善情况;采用彩色多普勒超声测得病人的静息踝肱指数(ankle brachial index,ABI)、下肢动脉搏动指数(pulse index,PI)及收缩期峰值流速(peak systolic velocity,PSV),采用经皮氧分压监测仪检测病人下肢经皮氧分压(transcutaneous oxygen pressure,TcPO2),从而评价病人下肢动脉循环与血供改善情况。结果与治疗前相比,EECP组治疗后下肢皮温、麻木、疼痛、皮肤色泽、肌肤营养状态、足背动脉搏动情况均得到明显改善(P<0.05),常规治疗组仅皮温、肌肤营养状态得到明显改善(P<0.05),且EECP组治疗后下肢麻木、疼痛、皮肤色泽、肌肤营养状态、足背动脉搏动均较常规治疗组改善明显(P<0.05)。治疗后,EECP组双侧下肢动脉的ABI、PSV、TcPO2水平均较治疗前有所提高(P<0.05),PI水平降低(P<0.05);且EECP组病人上述指标均较常规治疗组改善明显(P<0.05)。结论EECP可以有效改善老年T2DM合并LEAD病人的症状和体征,改善下肢动脉循环与血供。

H2A变体在小鼠不同时期雄性生殖细胞核质区的分布

【目的】了解小鼠雄性生殖细胞中macro H2A、H2A.Z和H2A.X 3种组蛋白变体变化与其发育特征间的联系,为揭示原始生殖细胞(PGCs)的发育机理及其分子调控机制奠定基础。【方法】以C57BL/6J小鼠胚胎的中肾和生殖嵴为试验材料,通过免疫荧光染色技术检测11.5dpc、12.5dpc和13.5dpc不同发育时期含有PGCs的组织石蜡切片及单细胞中macro H2A、H2A.X和H2A.Z变体的分布情况。【结果】macro H2A变体在11.5dpc胚胎时主要存在于细胞质中,12.5dpc时在细胞质中的表达增强,但进入生殖嵴后(13.5dpc)表达消失;H2A.X变体在11.5dpc和12.5dpc时存在于PGCs的核质区,13.5dpc时主要存于细胞质,且呈聚集分布;H2A.Z变体在11.5dpc时在PGCs的核质区均有存在,12.5dpc和13.5dpc时主要分布在细胞核,且表达明显增强。【结论】随着PGCs的不断迁移、增殖与分化,macro H2A、H2A.X和H2A.Z 3种组蛋白H2A变体在细胞核质区的分布及表达情况也发生变化,即H2A变体分布特征与PGCs的性别分化及其有丝分裂停止相关。

Ni/TiO2基微粒巨电流变体的沉降稳定性研究

采用对比的方法,从影响巨电流变体沉降稳定性的因素入手,研究微粒大小、基液黏度、温度变化、添加剂的加入等对沉降稳定性的影响。研究表明:随微粒粒径增加,沉降稳定性越差;基液黏度增加,巨电流变体的沉降稳定性提高;添加剂SDBS可显著改善Ni/TiO2基巨电流变体的沉降稳定性,沉降稳定性由85%提高到97%。

表达谷胱甘肽S转移酶-蜂毒素-^(88)精氨酸变体白细胞介素2工程菌的发酵条件研究

目的研究重组蜂毒素-88精氨酸变体白细胞介素2(Melittin-88ArgIL-2)工程菌的发酵条件。方法采用摇瓶发酵,对含pGEX-4T-2-Melittin-88ArgIL-2重组质粒的工程菌进行诱导表达,研究诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、培养基的pH值等对谷胱甘肽S转移酶-Melittin-88ArgIL-2表达量的影响。同时研究培养温度对产物表达形式的影响。结果根据优化的条件,蛋白质的表达量占菌体总蛋白质的36%左右。结论确立了该重组melittin-88ArgIL-2工程菌的发酵条件。

假尿苷修饰体外转录mRNA在翻译过程中发生的+1核糖体框架移码

为应对世界范围内的COVID-19疫情,假尿苷(Ψ)修饰的体外转录mRNA(Ψ-IVT-mRNA)被授权应用于SARS-Cov-2 mRNA疫苗。最近,Ψ-IVT-mRNA被发现在翻译蛋白质时发生核糖体“滞顿”,导致+1核糖体移码,在体外和体内翻译出异常的蛋白质。在接种SARS-Cov-2 mRNA疫苗的人群,这种异常蛋白可能激发脱靶T细胞反应或抗体反应或产生其它意想不到的副作用。这一发现对研制有效“安全”的mRNA疫苗/药物有“警示”和指导意义。

SiO_2悬浮体的电流变性研究

本文根据流变量测原理，对ＳｉＯ２为悬浮粒子的ＥＲＦ在温度从１０℃到５０℃，电场强度从０到２５００Ｖ／ｍｍ，剪切率从４０／ｓ到１２０／ｓ的电流变传性进行了试验研究，并对ＥＲＦ的ＥＲ特性及机理做了适当的阐述．结果表明ＥＲＦ的温度依赖关系是可分离变量的，剪切应力的对数与绝对温度的倒数成正比，ＥＲＦ近似为幂律流体，稠度系数是电场强度的三次函数，流动特征指数是场强的递减函数．

H2A变体在卵原细胞及其前体细胞核质区的分布

小鼠卵原细胞发育之前经历细胞的迁移、大量繁殖和性别分化,为了进一步了解分子调控机制,通过组织石蜡切片免疫荧光染色和单细胞免疫荧光染色技术,对配种时间为11.5d、12.5d和13.5d卵原细胞及其前体细胞,组蛋白H2A变体MacroH2A、H2A.Z、H2A.X的分布情况进行研究。结果表明,配种时间为12.5d细胞中3种组蛋白H2A变体荧光强度减弱,macroH2A在配种时间为11.5d、12.5d细胞质表达,有少量的沉积,13.5d细胞质中macroH2A沉积明显增多。H2A.X在配种时间为11.5d、12.5d细胞核和细胞质中弥散分布,13.5d主要集中于细胞核。H2A.Z在配种时间为11.5d整个细胞核和细胞质都有表达,12.5dH2A.Z在细胞质内表达减弱,细胞核出现部分沉积,13.5d细胞中H2A.Z主要集中分布于细胞质。组蛋白H2A变体的分布特征,可能与细胞的性别分化及细胞的减数分裂相关。

3种H2A变体在卵原及前体细胞中的分布研究

通过组织石蜡切片和单细胞免疫荧光染色及定量PCR技术,对卵原及前体细胞中组蛋白H2A变体macroH2A、H2A.Z、H2A.X的分布情况进行了研究。结果表明:12.5 dpc细胞中3种组蛋白H2A变体荧光强度减弱,macroH2A在11.5 dpc、12.5 dpc的细胞质中表达,有少量沉积,13.5 dpc细胞质中macroH2A沉积明显增多。H2A.X在11.5 dpc、12.5 dpc细胞核质中弥散分布,13.5 dpc时主要集中于细胞核表达。H2A.Z在11.5 dpc细胞核质区都有表达,在12.5 dpc细胞质内表达减弱的同时细胞核中表达增强,13.5 dpc时主要集中在细胞质中表达。不同时期组蛋白H2A 3种变异体定量PCR结果与免疫荧光技术分析结果一致。由此推断,组蛋白H2A变体的分布可能与细胞的性别分化及减数分裂相关。

外加应力下Ni_2MnGa合金中马氏体孪晶变体再取向动力学的相场模拟

利用相场方法研究Ni2MnGa形状记忆合金中不同连续拉应力方向马氏体孪晶变体的再取向动力学。模拟结果表明:施加应力方向决定体系演化的最终结构和演化路径,沿[100]和[110]方向施加应力分别得到单变体和双变体,而沿[111]方向施加应力,体系依然保持为3种变体。计算了相应的与界面动力学因子和切变模量相关联的孪晶化应力,计算结果与实验结果接近。加载和卸载后2种变体和3种变体之间的组织转化具有可逆性。

进入生殖嵴前PGCs中H2A变体的分布

小鼠原始生殖细胞进入生殖嵴之前经历细胞迁移、大量繁殖。为进一步解分子调控机制，文章通过组织石蜡切片免疫荧光染色和单细胞免疫荧光染色技术，对8.5、10.5 dpcPGCs中组蛋白H2A变体MacroH2A、H2A.Z、H2A. X的分布情况进行研究。结果表明，8.5-10.5 dpc，H2A.Z在PGCs中的表达明显递增，10.5 dpc PGCs中H2A.Z的表达主要集中于细胞核；而MacroH2A和H2A.X在此过程中无明显变化，在细胞质和细胞核中弱表达。综合分析发现，8.5-10.5 dpc PGCs中H2A.Z可能是装配核小体的主要变体，PGCs大量繁殖可能有H2A.Z的参与。

中华鳖组蛋白H2A变体克隆及其在卵母细胞中的表达分析

为研究组蛋白H2A对龟鳖动物生殖细胞发育分化作用和机制,克隆了中华鳖(Pelodiscus sinensis)组蛋白H2A变体的同源物(命名为PsH2A),分析其转录本的表达模式及在卵巢发育成熟过程中的细胞定位。PsH2A cDNA序列全长575 bp,5′端非编码区68 bp,3′端非编码区108 bp,开放阅读框399 bp,编码133个氨基酸。氨基酸序列比对结果显示其与龟类的H2A变体同源性更高,与哺乳类同源性较低。RT-qPCR和RT-PCR结果显示,PsH2A转录本在1冬龄、2冬龄和3冬龄的中华鳖卵巢中高表达(P<0.01),而在精巢和其他成体组织中几乎检测不到。化学原位杂交结果显示,PsH2A mRNA在卵母细胞中特异性表达,其中初级卵母细胞中表达信号最强,且均匀的分布在细胞质中。随着卵母细胞发育成熟进入到生长期和成熟期后,目的信号逐渐减弱,并且主要在核周区域表达。此外,PsH2A mRNA的相对表达量也表现出中华鳖卵巢发育的季节性变化。综上,研究结果表明PsH2A在中华鳖卵母细胞发育过程中可能发挥着重要作用。

组蛋白变体macroH2A1调控肿瘤增殖的研究进展

组蛋白变体不仅为染色质提供独特的功能,而且通过特殊的沉积和清除机制参与基因表达调控。macroH2A1是主要的组蛋白变体之一,早期发现其与女性X染色体失活和转录抑制有关,但目前研究发现其在特定的条件下可通过调控细胞衰老和代谢抑制肿瘤增殖。该文基于目前研究进展阐述macroH2A1调控基因表达的分子机制及其在肿瘤进展中的作用。

α-Al2O3微粉和SiO2微粉浆体的动电特性和流变行为研究

研究了pH值不同时α-Al2O3微粉和SiO2微粉浆体ζ电位的变化,并分别测定了三聚磷酸钠、六偏磷酸钠和FDN3种分散剂在加入量(w)为0、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%时对固相质量分数为20%的α-Al2O3微粉和SiO2微粉浆体ζ电位的影响,以及3种分散剂对一定质量分数的3种浆体流变特性的影响。结果表明:1)α-Al2O3微粉浆体在强酸和强碱的条件下,ζ电位的绝对值都很大,而SiO2微粉浆体只有在靠近碱性的条件下才有利于浆体的分散稳定;2)α-Al2O3微粉浆体的等电点在pH值=7.56,SiO2微粉浆体的等电点在pH值为1～2之间;3)3种分散剂能显著提高α-Al2O3微粉浆体的ζ电位,而对两种SiO2微粉浆体的作用不大;4)3种分散剂能在一定程度上改善α-Al2O3微粉浆体和SiO2微粉浆体的流变特性,加入量在0.2%左右,其中,六偏磷酸钠较好。

盐离子作用下组蛋白变体H2A.Z增强核小体结构的稳定性

真核生物染色质的基本结构组成单元是核小体,基因组DNA被压缩在染色质中,核小体的存在通常会抑制转录、复制、修复和重组等发生在DNA模板上的生物学过程。组蛋白变体H2A.Z可以调控染色质结构进而影响基因的转录过程,但其详细的调控机制仍未研究清楚。为了比较含有组蛋白变体H2A.Z的核小体和常规核小体在盐离子作用下的稳定性差异,本文采用F rster共振能量转移的方法检测氯化钠、氯化钾、氯化锰、氯化钙、氯化镁等离子对核小体的解聚影响。实验对Widom 601 DNA序列进行双荧光Cy3和Cy5标记,通过荧光信号值的变化来反映核小体的解聚变化。F rster共振能量转移检测结果显示:在氯化钠、氯化钾、氯化锰、氯化钙和氯化镁作用下,含有组蛋白变体H2A.Z的核小体解聚速度相比于常规核小体要慢,且氯化钙、氯化锰和氯化镁的影响更明显。电泳分析结果表明,在75℃条件下含有组蛋白变体H2A.Z的核小体的解聚速率明显低于常规核小体。采用荧光热漂移检测(fluorescence thermal shift analysis,FTS)进一步分析含有组蛋白变体H2A.Z核小体的稳定性,发现两类核小体的荧光信号均呈现2个明显的增长期,含有组蛋白变体H2A.Z核小体的第1个荧光信号增速期所对应的温度明显高于常规核小体,表明核小体中H2A.Z/H2B二聚体的解聚变性温度要高于常规的H2A/H2B二聚体,含有组蛋白变体H2A.Z核小体的热稳定性高。研究结果均表明,含有组蛋白变体H2A.Z的核小体的结构比常规核小体的结构稳定。

抗钠钙交换体特异位点抗体对大鼠单个心室肌细胞钙瞬变的影响

目的:观察抗钠钙交换体(Sodium calcium exchanger,NCX)特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体对正常成年大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响。方法:利用Langendorff灌流方法,分离得到单个大鼠心室肌细胞;负载荧光染料Fura-2/AM和2%牛血清白蛋白后,利用离子影像分析系统记录激发光为340 nm和380 nm时心室肌细胞成对系列图像,计算钙瞬变峰值(F340/F380)、细胞钙恢复90%时程(TR_(90))以及钙敏感性(F340/F380与细胞缩短数值的比值)。结果:抗NCX特异位点抗体可以增加正常成年大鼠单个心室肌细胞F340/F380,缩短TR_(90),对钙敏感性无显著影响;尼卡地平和KB-R7943分别预处理心室肌细胞可以抵消大部分抗体对F340/F380和TR_(90)的增加或缩短效应,联合使用二者预处理心室肌细胞后,该抗体对钙瞬变不再有显著影响。结论:抗NCX特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体可以增加心室肌细胞钙瞬变峰值,同时缩短细胞钙恢复时程,这种效应主要与其激动L-型Ca^(2+)通道和NCX的作用有关。

血浆D-D、ET与TXB2对脊柱退行性变患者术后深静脉血栓栓塞症的预测价值

目的探究血浆D-二聚体(D-D)、血浆内皮素(ET)与血栓素B2(TXB2)水平对脊柱退行性变患者术后深静脉血栓栓塞症(DVT)的预测价值。方法选取2018年1月至2019年1月在本院接受治疗的134例脊柱退行性变患者作为研究对象,根据术后1个月彩色多普勒超声检查是否发生DVT分为DVT组(55例)和无DVT组(79例)。比较两组患者术前1 d和术后1、3、7 d血浆D-D、ET与TXB2水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析术后1、3、7 d血浆D-D、ET与TXB2水平对脊柱退行性变患者术后DVT的预测价值。结果重复测量方差分析结果显示,时点效应可以影响D-D水平的变化(P<0.05),组间效应可以影响D-D、ET、TXB2水平的变化(P<0.05),时点和组间的交互效应可以影响D-D、ET水平的变化(P<0.05);事后多重比较显示,两组患者术后1 d的D-D、ET、TXB2水平均高于术前1 d,DVT组术后3 d的D-D、ET、TXB2水平均高于术前1 d,术后7 d的D-D、ET水平均高于术前1 d,无DVT组术后3、7 d的D-D水平均高于术前1 d,术后1、3、7 d的DVT组D-D、ET、TXB2水平均高于无DVT组(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,术后1 d的D-D、ET、TXB2预测术后DVT的AUC分别为0.905、0.792、0.678,Cut-off值分别为1.605μg·mL^(-1)、72.395 ng·mL^(-1)、145.225 ng·L^(-1),灵敏度分别为80.0%、50.9%、50.9%,特异度分别为91.1%、98.7%、92.4%;术后3 d的D-D、ET、TXB2预测术后DVT的AUC分别为0.990、0.749、0.597,Cut-off值分别为1.920μg·mL^(-1)、60.995 ng·mL^(-1)、140.280 ng·L^(-1),灵敏度分别为94.5%、52.7%、43.6%,特异度分别为100.0%、89.9%、78.5%;术后7 d的D-D、ET、TXB2预测术后DVT的AUC分别为0.796、0.685、0.557,Cut-off值分别为1.670μg·mL^(-1)、40.550 ng·mL^(-1)、141.685 ng·L^(-1),灵敏度分别为56.4%、89.1%、34.5%,特异度分别为89.9%、48.1%、83.5%。结论术后1、3、7 d血浆D-D、ET与TXB2水平均对脊柱退行性变术后患者DVT有预测价值,且D-D预测的最佳时间点为术后3 d,ET、TXB2预测的最佳时间点为术后1 d。