不伴MBTPS2与SAT1基因突变的棘状秃发性毛囊角化病1例

目的检测1例散发性棘状秃发性毛囊角化病患者MBTPS2基因及SAT1基因突变。方法提取患者及其双亲与100名健康志愿者外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增MBTPS2基因与SAT1基因的全部外显子及相邻的内含子片段,纯化后对PCR产物进行直接测序。结果该例患者及其双亲在MBTPS2基因与SAT1基因未发现任何突变。讨论该例患者未检测到目前已知棘状秃发性毛囊角化病所有致病基因的任何突变,可能存在未知的致病基因突变。

斑马鱼sat1.a突变体的鉴定

目的在我们的前期研究工作中,通过Tol2转座子介导的插入突变,筛选到了一批组织特异性表达绿色荧光蛋白GFP的斑马鱼品系。其中一个品系Tol2:20141221t的GFP在神经系统中表达,但还没有鉴定到Tol2转座子插入到基因组什么位置,造成了哪个基因的突变。本文的主要研究目标就是对这一由Tol2转座子插入诱导的斑马鱼突变品系进行鉴定。方法使用交错式热不对称PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)鉴定Tol2转座子插入的基因组位置;利用原位杂交检测被突变的基因的时空表达是否与该品系GFP表达具有一致性;筛选鉴定纯合体突变体,并进一步分析该基因突变造成的发育缺陷。结果在该品系中,Tol2转座子插入到了亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶1a(spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1a,sat1.a)的第八个内含子区域,致使sat1.a基因转录提前终止。我们筛选到了sat1.a纯合突变体,但是没有检测到明显的发育缺陷。结论筛选鉴定的Tol2转座子介导的斑马鱼sat1.a突变体没有明显的发育缺陷,但可以作为研究神经系统发育的有力工具。

利用CRISPR/Cas9系统建立内生链霉菌SAT1的基因簇敲除体系

hyBl(hygB-like)基因簇是内生链霉菌SAT1 中的次级代谢基因簇,经分析它与潮霉素B 基因簇具有52%的相似性,可能在SAT1 抑制栗疫菌(Cryphonectria parasitica)的过程中发挥主要作用。为了深入研究该菌的抑菌机制和hyBl 基因簇的功能,以hyBl 为目标,利用CRISPR/Cas9 技术建立SAT1 的基因簇敲除体系。在实验过程中,通过protospacer 的筛选、敲除载体的构建、接合转移供体菌、Ca2+和Mg2+的选择以及接合时间等多个条件的探索,建立了SAT1 的基因簇敲除体系。最终以E. coli ET12567(pUZ8002/pCRISPomyces2-CB)为供体菌,在MS 培养基(含10 mmol Mg2+)上接合16-18 h,成功获得突变株SAT1△ hyBl(缺失14 kb 的hyBl 基因簇)。突变株对栗疫菌的抑制带宽较野生株降低了77%,这说明该基因簇指导合成的次级代谢产物在抑制栗疫菌方面具有重要的功能。本研究证明了利用CRISPR/Cas9 系统可以对内生链霉菌SAT1 进行基因簇编辑,也为深入研究该菌的抑菌机制、基因工程法验证未知基因簇功能提供了良好的技术支撑。

铁死亡相关基因SAT1在脑胶质瘤中的治疗意义

脑胶质瘤是指起源于脑神经胶质细胞的肿瘤,占所有原发性中枢神经系统肿瘤的40%~60%,是最常见的颅内恶性肿瘤之一。目前针对脑胶质瘤的标准治疗方案是手术切除结合放化疗。但由于颅脑手术的复杂性、脑胶质瘤浸润生长的特质以及化疗药物难以透过血脑屏障等多种因素的影响,经过标准治疗后脑胶质瘤患者的5年生存率仍然较低,特别是胶质母细胞瘤,患者5年生存率仅有10%-20%,治疗效果并不显著。因此,探索新的、有效的治疗方案对于提高脑胶质瘤患者的生存率具有重要意义。铁死亡相关基因SAT1在脑胶质瘤中的治疗意义一直是国内外学者的研究热点,并在近5年取得了丰富的成果,文章基于此,对近5年的相关研究结果进行了系统的树理和总结。

亚洲卫星1号顺利地满负荷运行

亚洲卫星1号经过一年多时间的正常运行,各项技术性能和参数指标均达到设计要求。本文详细介绍了亚洲卫星1号的租用情况,并推荐所需采用的天线尺寸。

铁死亡调控基因亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶1在脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨铁死亡调控基因亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶1(SAT1)在脑胶质瘤患者中的表达趋势及临床意义。方法纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA,http://www.cgga.org.cn/)及美国癌症基因组图谱计划(TCGA,http://www.cancergenome.nih.gov/)数据库中3批次共1720例(CGGA-325组、CGGA-693组及TCGA组分别为325、693、702例)脑胶质瘤患者的临床资料及其胶质瘤组织样本表达谱数据,分析SAT1基因的表达趋势及与患者病理、分子病理指标、预后等因素的相关关系。应用细胞模型研究SAT1基因在脑胶质瘤中的生物学功能。采用Kaplan-Meier生存曲线比较SAT1基因表达量不同的脑胶质瘤患者的生存差异;应用受试者工作特征(ROC)曲线评估SAT1对脑胶质瘤患者1年和3年总生存率的预测作用。结果在脑胶质瘤患者样本中,SAT1在异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型胶质母细胞瘤中表达水平最高,在IDH突变联合1p19q缺失的低级别胶质瘤中表达水平最低(CGGA-325组、CGGA-693组及TCGA组患者中,均P<0.001)。在世界卫生组织(WHO)Ⅲ级及Ⅳ级的患者中,SAT1高表达的患者预后更差(不同数据库、不同级别SAT1高表达及低表达患者的中位生存期分别为:CGGA325组WHOⅢ级患者,485 d和1321 d,P<0.05;CGGA-325组WHOⅣ级患者,286 d和493 d,P<0.05;CGGA-693组WHOⅢ级患者,836 d和2982 d,P<0.05;CGGA-693组WHOⅣ级患者,356 d和459 d,P<0.05;TCGA组WHOⅢ级患者,31.57个月和114个月,P<0.05;TCGA组WHOⅣ级患者,11.24个月和13.77个月,P<0.05)。CGGA-325组患者中,应用ROC曲线评估SAT1对患者1年和3年生存的预测能力,其曲线下面积(AUC)分别为0.725、0.793;在CGGA-693组数据中,其AUC分别为0.615、0.671;在TCGA组中,其AUC分别为0.791、0.808(均P<0.001);在细胞模型中,下调SAT1基因表达,可抑制胶质瘤细胞增殖率(两种细胞系作用24 h及48 h后,均P<0.05)。结论SAT1基因与脑胶质瘤患者级别、分子亚型、预后等显著相关,可能通过激活肿瘤细胞增殖发挥作用。