Savinase蛋白酶用于山羊绒防缩工艺参数研究

由于山羊绒表面鳞片的存在,产生定向摩擦效应,会产生毡缩,针对这种情况及传统防缩方法会产生污染的特点,采用了环保的生物酶对山羊绒纤维进行防缩处理.以夹角余弦赋权法确定权重,利用模糊正交法的理论与方法处理实验数据,借助于MATLAB7.0工程软件得出模糊综合评价值,将其作为目标函数.通过模糊数学主效应分析,得到优化工艺参数是温度40℃,时间20m in,Savinase浓度(owf)4%,pH值为8.

KMnO_4-Savinase蛋白酶对山羊绒纤维毡缩性能的影响

单独利用Savinase蛋白酶对山羊绒进行防毡缩处理的防缩效果并不十分明显,因此选用KMnO4预处理-Savinase蛋白酶复合处理工艺,通过单因素分析方法确定出Savinase蛋白酶优化处理条件为温度40℃,用量4%(owf),时间25 min,pH值8.5,此时所处理山羊绒的毡缩球体积为18.70 cm3,断裂强力为3.77 cN,断裂伸长率为35.99%,失重率为4.17%。

Savinase蛋白酶处理对粗纺毛织物性能的影响

粗纺毛织物以其质地丰厚、保暖性好深受消费者的喜爱,而毛织物在穿洗过程中易产生尺寸不稳定和毡缩现象,严重影响了织物的外观和服用性。针对以上情况,文章对粗纺毛织物的羊毛鳞片剥落的情况以及对织物性能的影响作了进一步的研究。首先采用双氧水进行预处理,然后采用Savinase蛋白酶对粗纺毛织物进行防缩整理,再对其进行强度、抗毡缩性、耐皱性、白度等性能测试,研究经Savinase蛋白酶处理后对粗纺毛织物性能的影响。通过测试发现,毛织物的防毡缩性能增加,断裂强力下降,织物白度增大,经纬向回复性都有所提高,织物变得较柔软,厚度减小,抗起毛起球性增加。

Savinase蛋白酶对羊毛织物的整理

研究了Savinase蛋白酶对羊毛织物的防毡缩效果,以及Savinase蛋白酶对羊毛纤维外层鳞片酶解作用的均匀性问题。尝试将Transglutaminase转移酶与Savinase蛋白酶同时作用于羊毛织物,增强了羊毛织物的强度,降低了减量率,进一步提高了羊毛织物的防毡缩性能。

Savinase蛋白酶用于毛织物防毡缩整理的工艺探讨

选用Savinase蛋白酶对羊毛织物进行防毡缩处理,采用非氯氧化剂——双氧水作为前处理剂,通过Savinase蛋白酶酶活测试,确定初步的实验参数,采用单因素分析和正交试验相结合的方法,确定Savinase蛋白酶防毡缩整理的最佳工艺为:蛋白酶用量3%(owf)、p H值7、温度55℃,时间40 min、浴比1∶30。实验结果表明,Savinase酶对羊毛织物防缩整理可使羊毛缩率下降到5.60%,由此得出,Savinase蛋白酶整理可使羊毛织物获得较好的防缩效果。

KMnO4预处理——Savinase蛋白酶对山羊绒纤维毡缩性能的影响

单独利用Savinase蛋白酶对山羊绒进行防毡缩处理的防缩效果并不十分明显，因此，西安工程大学的郑秋生等人选用KMnO4预处理——Savinase蛋白酶复合处理工艺，工艺流程为：

Savinase和木瓜蛋白酶处理对羊毛性能的影响

为提高羊毛酶法防毡缩整理效果,分别进行了基于角质酶预处理的羊毛Savinase碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶加工,考察了二步法协同处理对羊毛减量效果的影响。研究结果表明,相同酶浓度条件下,Savinase较木瓜蛋白酶具有稍高的酶解效率,试样失重率较高;相同失重率条件下,木瓜蛋白酶处理羊毛较Savinase处理样具有稍好的润湿性,碱溶解度与水洗毡缩率略低,表明角质酶、木瓜蛋白酶组合处理中羊毛纤维鳞片水解去除效果较好。XPS元素分析结果初步验证了木瓜蛋白酶较Savinase更趋于水解模式的羊毛酶解加工。

超声波和碱性蛋白酶处理对克氏原螯虾脱壳及虾仁品质的影响

为研究超声波和碱性蛋白酶处理对克氏原螯虾脱壳及虾仁品质的影响,通过壳分离功、虾仁得率、虾仁质构、色泽、气味、嫩度、离心损失、肌原纤维蛋白含量等指标进行分析,确定克氏原螯虾脱壳的最佳前处理方式。结果表明:相对于传统加工方式,0.5%碱性蛋白酶和300 W超声波联合处理,能有效降低壳分离功21.8%,提高虾仁得率31%,并且显著提高了虾仁的嫩度和肌原纤维蛋白含量,硬度有所下降,气味和色泽方面无显著变化,研究结果为克氏原螯虾加工工艺的优化提供参考。

多光谱法和分子对接模拟法研究茶碱和胃蛋白酶的相互作用

在模拟生理条件下,通过紫外可见吸收光谱法、傅里叶红外光谱、荧光光谱、三维荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色谱等方法以及分子对接模拟法对茶碱(TPL)与胃蛋白酶(PEP)的结合机理进行了研究,在分子层面探讨TPL与PEP相互作用的机制,有助于对TPL的药理毒性、药效进行深入研究。根据Stern-Volmer方程,计算在298、 303和308 K三种温度下TPL对PEP的动态荧光猝灭速率常数Kq远大于最大动态荧光猝灭常数2.0×10^(10)L·(mol·s)^(-1),证明TPL对PEP的猝灭方式为静态猝灭。随着TPL浓度的不断升高,PEP的动态猝灭常数Ksv呈规律性下降趋势,TPL可以有效对PEP的内源荧光进行猝灭,进一步判定作用机制为静态猝灭。三维荧光图谱分析表明,体系中随着TPL浓度的不断升高,PEP中代表色氨酸残基与酪氨酸残基以及肽链骨架结构的荧光强度峰值明显降低,且峰位发生红移,表明TPL对PEP的二级结构产生影响。同步荧光图谱分析表明TPL与PEP结合时,主要集中在色氨酸的残基上。红外光谱表明TPL引起PEP内官能团伸缩振动,使PEP的二级结构发生改变。紫外吸收光谱表明随着混合体系中TPL浓度增大,吸收峰峰值逐渐增大,表明TPL可以改变PEP的二级结构。分子对接模拟法表明,TPL与PEP中氨基酸残基GLU13、 VAL30、 TRP39、 GLY76、 GLY78、 PHE117的结合作用力为范德华力,与氨基酸残基THR77、 GLY217形成氢键,与氨基酸残基TYR75、 LEU112、 ILE120、PHE111之间存在疏水作用力,证明两者主要通过范德华力与氢键结合,进一步证明TPL改变了PEP的二级结构。圆二色谱分析显示PEP中β-折叠的占比从50.2%下降至48.8%, α-螺旋结构的占比从8.1%上升到8.4%;β-转角的占比从18.3%上升到18.7%;无规则结构的占比从29.1%上升到29.2%,表明TPL改变了PEP的二级结构。实验研究结果有助于了解TPL与PEP的结合作用机制,为TPL的使用及研究提供了数据依据。

粪便基质金属蛋白酶9及其相关蛋白在婴儿食物过敏中的诊断价值

目的探索基质金属蛋白酶9(MMP9)及其相关蛋白在婴儿食物过敏(FA)中的诊断价值。方法本研究为巢式病例对照研究,连续纳入2023年4月至2023年10月疑诊FA的婴儿,收集粪便,经口服食物激发试验将入组婴儿分为FA组和非FA组。通过酶联免疫吸附测定法测定粪便MMP9、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP 1)和脂质运载蛋白2(LCN 2)的浓度,通过对比粪便总蛋白浓度计算其相对含量,通过受试者工作曲线的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度等指标评价目标蛋白诊断婴儿FA的准确度。二元logistic回归筛选FA预测因子。结果共纳入FA组69例及非FA组72例。粪便MMP9及TIMP 1浓度诊断FA的AUC值分别为0.82和0.78,MMP9及TIMP 1相对含量的AUC值分别增加至0.85及0.83。LCN 2诊断价值不佳。多因素logistic回归提示粪便MMP 9是FA的最佳预测指标。结论粪便MMP 9和TIMP 1是诊断婴儿FA的有用工具,可以很好的区分FA及类似疾病。

大豆抗营养因子、病毒和激素的蛋白酶活性

大豆蛋白中的蛋白酶抑制剂(如胰蛋白酶抑制因子、大豆抗原蛋白)是大豆发芽的关键内源水解酶蛋白酶A1和多肽酶。抗胰蛋白酶抑制因子和胃蛋白酶、胰蛋白酶在一起时,前者蛋白水解酶活性更高,抗逆性更强,可以降解动物消化酶,而不是被消化酶降解。多种病毒的衣壳蛋白为蛋白酶,衣壳蛋白与膜蛋白受体结合后降解膜蛋白,使细胞完整性受损,导致细胞启动胞吞机制,或者形成膜裂纹,将被破坏的膜蛋白包括病毒一起内吞,形成胞内小囊泡,开启病毒感染机制。病毒是一种被DNA或者是RNA封装的蛋白酶,蛋白酶帮助核酸进入宿主细胞复制增殖。免疫反应是防御蛋白酶与病毒蛋白酶的酶促反应,是蛋白酶和蛋白酶的反应,因此特异性很强。文章提出了一些营养生理学和预防医学见解。

替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法选取128例老年胃癌患者为研究对象,随机分成对照组(n=64)与观察组(n=64)。对照组给予替吉奥治疗,观察组给予替吉奥联合奥沙利铂治疗。观察2组的胃动力相关激素[胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)]、MMP-2与MMP-9、肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)]、临床疗效以及不良反应发生情况。分析胃动力相关激素与MMP-2、MMP-9及肿瘤标记物水平的相关性。结果治疗后,2组MTL低于治疗前,VIP高于治疗前,且观察组MTL低于对照组,VIP高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为70.31%,高于对照组的53.13%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MTL与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈负相关(P<0.05);VIP与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈正相关(P<0.05)。结论替吉奥联合奥沙利铂治疗老年胃癌患者的效果较好,且安全性较高。MTL、VIP与MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9在老年胃癌患者的疾病发展中起相互关联作用。

右旋糖酐对Savinase蛋白酶的化学修饰及酶学性质研究

采用经高碘酸钠活化的右旋糖酐修饰Savinase蛋白酶,通过凝胶过滤层析(GPC)和圆二色性光谱(CD)表征了修饰后蛋白酶分子量和结构的变化,测试了修饰酶的反应动力学参数,并考察了温度及pH对修饰酶活力的影响。凝胶过滤层析结果证明修饰后蛋白酶分子量明显提高,圆二色光谱分析表明修饰后蛋白酶的结构有所改变,进一步验证了右旋糖酐和蛋白酶发生了反应。与原酶相比,修饰酶对底物的亲和力增加。原酶和修饰酶的最适温度均为40℃,在30℃～50℃之间修饰酶表现出优于原酶的热稳定性。在pH8.5～9.5之间,修饰酶的稳定性高于原酶。

蛋白酶N1对小鼠心肌细胞增殖的作用及机制

目的探讨蛋白酶N1(PKN1)对小鼠心肌细胞增殖的作用及机制。方法使用异氟烷麻醉1日龄小鼠2只,分离小鼠心肌细胞,并分为对照组和干扰组,干扰组心肌细胞转染PKN1干扰片段,对照组细胞转染对照片段。按照随机数字表法将10只小鼠分为正常组和观察组,每组5只。观察组小鼠于心脏原位注射PKN1干扰腺病毒,正常组小鼠于心脏原位注射空载腺病毒。采用免疫荧光法检测4组小鼠心肌细胞或心肌组织中Ki-67阳性表达率,以Ki-67阳性表达率表示心肌细胞增殖能力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测对照组和干扰组小鼠心肌细胞中PKN1 mRNA表达;采用Western blot法检测对照组和干扰组小鼠心肌细胞中PKN1和cyclin D1蛋白表达。结果干扰组心肌细胞中Ki-67阳性表达率均显著低于对照组(t=11.201,P<0.01),观察组小鼠心肌组织中Ki-67阳性表达率显著低于正常(t=11.851,P<0.01)。干扰组心肌细胞中PKN1 mRNA相对表达量显著低于对照组(t=7.022,P<0.01)。干扰组心肌细胞中PKN1和cyclin D1蛋白相对表达量均显著低于对照组(t=5.762、6.884,P<0.01)。结论小鼠心肌细胞中PKN1表达降低可抑制cyclin D1蛋白表达,从而抑制心肌细胞增殖。

泛素-蛋白酶体系统在寄生原虫生长发育中的调控作用及潜在药物靶点分析

蛋白质降解是细胞维持正常生命活动的重要途径之一,其中泛素-蛋白酶体系统发挥关键作用。泛素-蛋白酶体系统参与调控细胞分化、细胞凋亡、DNA复制、蛋白质质量控制等生命活动。研究表明,对该系统中的功能蛋白进行干预,可直接影响寄生原虫的生长发育。本文主要探讨近年关于泛素-蛋白酶体系统在寄生原虫生长分化过程中发挥的关键作用,揭示其作用靶点,为开发新型抗原虫药物提供思路。

沙蚕蛋白酶高效降解变异新冠病毒S蛋白作用与S蛋白的生化特性分析

从今年3月起,WHO不再将新冠病毒感染,列为全球关注的灾害性卫生事件,但是新感染病例依然存在,其原因与病毒基因组经常突变,引起特异抗体失效和免疫逃逸有关,同时特异性治疗药物依然有限。病毒S蛋白是病毒感染宿主细胞的关键结构,S蛋白质突变,导致其结构生化特征和功能等随之变化。我们曾分析了世卫组织(WHO)认定的野生型和5种关切变异毒株的生化特征,并研究证实了日本刺沙蚕碱性丝氨酸蛋白酶(ASP_(NJ))可以高效与相对特异地降解野生型病毒S蛋白。本文分析了Omicron变异毒株(BA.2、BF.7、XBB.1)S蛋白质与ASP_(NJ)相关的生物化学特征,并经SDS-PAGE分析,直观证实了ASP_(NJ)可以高效降解这些S蛋白质,但变异株S蛋白抵抗ASP_(NJ)消化能力更强一些。本文还报告了ASP_(NJ)对野生型假病毒的影响,初步结果显示,ASP_(NJ)可能具有减少野生型假病毒感染293T-CAE2受体细胞的作用。这些结果表明,ASP_(NJ)有可能成为一种新工具酶,用于研究新冠病毒的结构与功能。

双倍剂量链霉蛋白酶服用时机对磁控胶囊胃镜检查效果的影响

目的探讨双倍剂量链霉蛋白酶的服用时机对磁控胶囊胃镜(MCE)检查质量的影响。方法选取2021年2月-2022年3月于该院行MCE检查的225例患者作为研究对象,随机分为3组,A组检查前40 min口服链霉蛋白酶40000 u;B组检查前60和40 min分次口服20000 u;C组检查前40和20 min分次口服20000 u。记录胃部6个区域的胃腔清洁度和黏膜可视化程度评分(1~4分)、病变检出率和胃观察时间。结果共221例患者完成研究。黏膜可视化程度评分中,C组为(23.56±1.37)分,高于A组的(22.56±1.28)分和B组的(23.00±1.33)分,差异有统计学意义(P<0.05)。胃腔清洁度评分中,C组为(21.44±2.35)分,高于A组的(20.11±2.04)分,差异有统计学意义(P<0.01)。在近端胃(贲门和胃底)的清洁度评分和黏膜可视化程度评分中,C组高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。病变检出率中,C组胃息肉和糜烂检出率分别为17.8%和49.3%,高于A组(6.8%和29.7%)和B组(9.5%和31.1%),差异均有统计学意义(P<0.05)。C组胃观察时间短于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在检查前40和20 min分次口服20000 u链霉蛋白酶,可以提高MCE的检查质量。

血清丝氨酸蛋白酶Corin联合子宫动脉多普勒血流评分对子痫前期的预测价值评价

目的探讨Corin联合子宫动脉RI、PI、S/D值对子痫前期的预测价值。方法选择2015年12月-2020年9月在兰州大学第二医院行常规产检并诊断为子痫前期的孕妇(55例);同期单胎健康孕妇为对照组(55例)。ELISA方法测定孕中期(16~24周),孕晚期(28~32周)血清Corin浓度,超声多普勒检测孕中、晚期子宫动脉RI、PI、S/D值。ROC曲线分析上述指标联合对妊娠中晚期孕妇发生子痫前期的预测价值。结果孕中、晚期血清Corin含量联合子宫动脉PI、RI、S/D值得到的联合预测概率作ROC曲线下面积分别为0.850、0.862,敏感度分别为80.1%、88.3%,特异度分别为82.6%、83.9%,明显高于各指标单独使用的预测作用。结论联合检测孕妇血清Corin可提高子宫动脉血流动力参数对子痫前期的预测价值。

内皮脂肪酶和脂蛋白酶在冠状动脉粥样硬化发生及发展中的作用研究进展

冠心病是主要由冠状动脉粥样硬化导致的心肌缺血性病变。动脉壁僵硬、脂质代谢异常导致动脉内膜脂质类物质聚集、纤维组织增生和钙质沉积,斑块形成,从而影响血液运输。内皮脂肪酶(EL)是一种磷脂酶,可水解血浆高密度脂蛋白胆固醇,具有促进脂肪分解代谢的作用。脂蛋白酶(LPL)是溶解脂蛋白的关键酶,其特定的酶分子结构可水解甘油三酯,参与人体内脂蛋白代谢。因此,了解EL、LPL在冠状动脉粥样硬化发生及发展中的作用对早期防治冠心病至关重要。现对EL和LPL的结构、生物学特点以及在冠状动脉粥样硬化形成中的作用进行综述。

益生菌疗法根除不同分型H.pylori对胃泌素-17、胃蛋白酶原的影响

目的探讨联合益生菌根除不同分型H.pylori对胃泌素-17(gastrin-17,G-17)、胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)的影响。方法将116例H.pylori阳性慢性胃炎患者随机分为四联疗法组和联合益生菌疗法组,疗程均为2周。选取H.pylori阳性健康体检者100名作为健康对照组。对H.pylori抗体CagA、VacA、UreA和UreB进行血清学检测,并检测治疗前后血清中PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/Ⅱ比值(PGⅠ/PGⅡratio,PGR)及G-17水平。结果四联疗法组、联合益生菌疗法组及健康对照组的H.pyloriⅠ型阳性率均高于H.pyloriⅡ型,且两治疗组H.pyloriⅠ型的阳性率明显高于健康对照组(P<0.05);三组CagA+VacA抗体阳性率均高于各组CagA、VacA抗体阳性率(P<0.05)。三组VacA、UreA、UreB抗体阳性率均高于各组CagA抗体阳性率(P<0.05)。不同炎症程度慢性胃炎CagA、UreB抗体的阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);重度慢性胃炎与轻度慢性胃炎比较,VacA抗体阳性率显著升高,而UreA抗体阳性率显著下降(P<0.05)。治疗前,与H.pyloriⅡ型感染者相比,三组H.pyloriⅠ型感染者PGⅡ及G-17水平显著升高,PGR水平显著下降(P<0.05),而PGⅠ水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,联合益生菌疗法组H.pyloriⅠ型患者的PGⅠ、PGⅡ及G-17水平显著下降,PGR水平升高(P<0.05)。结论H.pyloriⅠ型菌株是慢性胃炎的主要致病菌株,并且影响患者血清PGⅠ、PGⅡ、PGR及G-17的水平。联合益生菌疗法治疗H.pyloriⅠ型慢性胃炎,能降低血清PGⅠ、PGⅡ、G-17水平,提高PGR水平。