聚乙二醇(PEG-5000)对胰激肽释放酶化学修饰的初步研究

以自制单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯对猪胰激肽释放酶进行化学修饰,修饰产物以super-dex G75凝胶色谱柱进行分离纯化。结果表明,修饰PPK分子质量增加,保留活性降低,对温度的耐受性加强,稳定性增加。

红藻条斑紫菜凝集素的纯化及其色氨酸化学修饰对其活性的抑制作用

为了探索条斑紫菜凝集素(Porphyra yezoensis Ueda lectin,PYL)的作用机理,对其进行了分离和纯化.条斑紫菜经磷酸盐缓冲液浸泡、20%～75%硫酸铵分级、DEAE-纤维素52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析,得到PYL纯品.Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为63.2 kD,在非还原SDS-PAGE上显示1条蛋白染色带,分子量为63.1 kD,还原SDS-PAGE显示1条蛋白染色带,亚基分子量为15.8 kD.PYL在对兔、大鼠、鸡、羊、狗血细胞的凝集作用中,对大鼠红细胞的凝集活性最高.PYL在pH 6.50～10.53范围内均有活性,在pH 8.40～8.91活性最高.经42℃热处理10 min后,仍然对大鼠红细胞血凝活性保留12.5%,其活性最大温度范围为4℃～20℃,48℃加热10 min后,其活性完全丧失.EDTA对PYL的凝集活性有抑制作用,最小抑制浓度为1.56 mmol/L,而Ca2+和Mg2+未发生凝集抑制现象.PYL凝集大鼠红细胞的作用不被D-果糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、菊粉、γ球蛋白、牛甲状腺球蛋白等所抑制,但可被蔗糖和麦芽糖抑制,最小抑制浓度蔗糖为20 mmol/L,麦芽糖为40 mmol/L.用N-溴代丁二酰亚胺(NBS)对PYL分子中的Trp残基进行化学修饰,有2.1个Trp残基被修饰,修饰后PYL活性丧失,表明Trp残基是PYL凝集活性所必需的基团.

广西野生铁皮石斛的化学成分研究

铁皮石斛(Dendrobium officinale)具有较高的药用价值,具有"药中黄金""救命仙草"的美誉。广西植物资源丰富,但野生铁皮石斛资源处于濒危状态。为了更好地开发应用铁皮石斛。本文对广西野生铁皮石斛多糖提取方法、分离纯化、结构表征、化学修饰、活性进行了大量文献考察,为进一步研究广西野生铁皮石斛提供了有效依据。

聚乙二醇醛(mPEG-ALD_(20000))对L-门冬酰胺酶化学修饰的初步研究

研究L-门冬酰胺酶的单甲氧基聚乙二醇醛化学修饰及纯化方法。以SDS-PAGE分析产物的单修饰产率,对反应的摩尔比,反应的pH值和反应时间和温度修饰条件进行优化,初步确定最佳修饰条件为L-ASP与mPEG、ALD反应摩尔比是1∶10,反应pH值为5.0,在4℃下反应32 h。离子交换和分子筛联用对产物进行分离纯化,修饰产物活性残留达36%。修饰产物结构没有明显变化,活性得到很好的保留。