Akt激活剂SC79抑制地塞米松诱导成骨细胞凋亡和程序性坏死的作用机制

背景:有研究发现SC79(一种Akt激活剂)具有一定的细胞保护作用,其不仅能够抑制兴奋性中毒,还能够减轻由于脑卒中等原因引起的神经元细胞死亡。目的:探究SC79抑制地塞米松诱导成骨细胞凋亡和程序性坏死的作用机制。方法:取对数生长期的人成骨细胞株OB-6,分4组处理:对照组常规培养,地塞米松组加入2μmol/L地塞米松处理24 h;SC79组加入20μmol/L SC79处理24 h;SC79+地塞米松组首先加入20μmol/L SC79处理2 h,再加入2μmol/L地塞米松处理24 h。检测细胞活性、乳酸脱氢酶释放、凋亡率、凋亡相关因子Caspase-3、Bax、Bcl-2的活性,以及氧化应激相关因子亲环蛋白D、细胞色素C的蛋白表达。结果与结论:①与对照组比较,地塞米松组细胞活性降低(P<0.05);与地塞米松组比较,SC79+地塞米松组细胞活性升高(P<0.05);②与对照组比较,地塞米松组细胞乳酸脱氢酶释放、线粒体膜电位升高(P<0.05);与地塞米松组比较,SC79+地塞米松组细胞乳酸脱氢酶释放、线粒体膜电位强度降低(P<0.05);③与对照组比较,地塞米松组Caspase-3、Bax的活性及细胞凋亡率升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与地塞米松组比较,SC79+地塞米松组Caspase-3、Bax的活性及细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);④与对照组比较,地塞米松组亲环蛋白D、细胞色素C蛋白表达升高(P<0.05);与地塞米松组比较,SC79+地塞米松组亲环蛋白D、细胞色素C蛋白表达降低(P<0.05);⑤结果表明,SC79可以通过增强细胞活性及抑制细胞凋亡、线粒体膜电位强度及氧化应激水平抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡和程序性坏死。

SC79对高糖诱导RPE细胞凋亡的拮抗作用及其对AKT-XIAP信号通路的调控机制

目的探讨特异性AKT激活剂SC79对体外高糖诱导人视网膜色素上皮(ARPE)-19细胞凋亡的拮抗作用及其潜在机制。方法将体外培养的ARPE-19细胞分别置于含5、10、20μg/ml SC79的高糖(30 mmol/L葡萄糖)培养液中培养6、12、24 h,根据细胞增生率探索最佳的作用浓度和作用时间。将细胞分为4个组,其中正常对照组、甘露醇组和高糖组、分别于含5.6 mmol/L葡萄糖正常培养液、含5.6 mmol/L葡萄糖和24.4 mmol/L甘露醇培养液、高糖培养液中培养48 h,高糖+SC79组细胞于含10μg/ml SC79正常培养液中培养12 h,然后于高糖培养液中继续培养36 h。采用MTS法检测细胞的增生率,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,采用Western blot法检测磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、caspase-9、caspase-3及活化片段active-caspase-3的相对表达量。将细胞分为Neg-shRNA组、AKT shRNA组和空白对照组分别加入相应转染复合物和无血清培养基,采用实时荧光定量PCR检测各转染组Akt mRNA表达。将转染细胞分为Neg-shRNA+SC79组和AKT shRNA+SC79组,参照高糖+SC79组处理方式进行培养,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果不同浓度SC79处理不同时间细胞中以10μg/ml SC79预处理12 h细胞的增生率最高。高糖组细胞增生率明显低于正常对照组、甘露糖组和高糖+SC79组,差异具有统计学意义(均P<0.01)。高糖组细胞凋亡率为(52.27±3.21)%,明显高于正常对照组的(3.90±0.71)%和高糖+SC79组的(20.70±3.62)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。高糖组p-Akt、XIAP、caspase-9及caspase-3蛋白相对表达量明显低于正常对照组和高糖+SC79组,active-caspase-3蛋白相对表达量明显高于正常对照组和高糖+SC79组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。正常对照组、Neg-shRNA组和AKT shRNA组AKT mRNA相对表达量分别为0.60±0.07、0.59±0.03和0.11±0.10,总体比较差异有统计学意义(F=30.44,P<0.01)。AKT shRNA+SC79组细胞凋亡率明显高于高糖+SC79组和Neg-shRNA+SC79组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论SC79可以部分拮抗高糖诱导的ARPE-19细胞凋亡,其机制可能与活化AKT/XIAP通路,抑制凋亡执行蛋白caspase家族有关。

全国无线电业务保护分技术委员会标准化工作现状与建议

近年来,无线电技术迅猛发展并得到广泛应用,与此同时也导致电磁环境更加复杂,无线电干扰事件时有发生,这对无线电业务保护标准化工作提出了更高的要求。本文介绍了全国无线电业务保护分技术委员会的基本情况,详细梳理了归口负责的国际标准及国家标准现状,提出了未来的工作建议,为无线电业务保护标准化工作提供参考。

参与铝及铝合金表面处理国际标准制修订工作简介

在中国、日本有关部门联合制定ISO 28340《铝复合膜—铝阳极氧化膜和电泳有机膜复合膜总规范》标准的基础上,我国有色轻金属标准化分技术委员会组织知名的研究院所、铝型材企业及相关专业公司对阳极氧化膜封孔失重检测方法的改进、阳极氧化膜砂纸耐磨性测试方法、建筑铝材的膜层类型评定性能的试验及检测方法选择指南等有关课题进行跟踪研究,并结合我国铝型材产品的实际情况开展有针对性的研究试验,获得了大量数据,形成多项ISO建议书,委派代表将建议书提交到相关ISO/TC79/SC02工作组,参加多届ISO/TC79/SC02年会,参与ISO铝表面处理相关标准的制修订工作,取得了很好成果。