模拟低氧对舌鳞癌SCC-15细胞系中SOX2和OCT4表达的影响

目的研究模拟低氧条件对舌鳞癌SCC-15细胞增殖、周期、凋亡的影响,及SOX2和OCT4蛋白、mRNA的表达变化。方法体外培养舌鳞癌SCC-15细胞,加入模拟低氧物去铁胺(desferrioxamine,DFO)模拟低氧环境,为模拟低氧组,同时设置不加DFO的常氧组为对照,采用CCK-8法检测SCC-15细胞的增殖率;流式细胞技术检测SCC-15细胞的周期和细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、SOX2及OCT4蛋白的表达;qPCR检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2及OCT4mRNA的表达。结果与常氧组相比,模拟低氧组SCC-15细胞的增殖受到抑制(P<0.05),G1期细胞所占比例上升、S+G2期细胞所占比例下降(P<0.05),细胞凋亡率未见明显变化(P>0.05);蛋白质印迹法结果显示,与常氧组比较,模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2、OCT4蛋白的表达均升高,且HIF-1α、OCT4蛋白的升高幅度大于SOX2蛋白,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);qPCR结果显示,两组SCC-15细胞中HIF-1αmRNA水平差异无统计学意义(P>0.05),而模拟低氧组SCC-15细胞中SOX2、OCT4mRNA的表达水平高于常氧组(P<0.05)。结论 DFO可以有效模拟低氧环境,促进SOX2和OCT4的蛋白和mRNA表达水平升高。

抑癌基因Lkb1超表达载体构建及其在人舌鳞癌细胞SCC-15中的生物活性分析

目的:了解抑癌基因LKB1对人舌鳞癌细胞的影响,初步探讨其相关通路机制。方法:构建LKB1真核表达载体,通过脂质体转染人舌鳞癌细胞系(SCC-15),利用RT-PCR、Western blot和流式细胞术来检测SCC-15中基因表达和细胞周期凋亡的变化。结果:LKB1在SCC-15细胞中mRNA水平上成功过表达约300倍,蛋白表达水平也显著上调;同时发现LKB1超表达对细胞周期起阻滞作用,并可上调p53、PTEN和TGF-β,同时下调VEGF的表达,差异均有统计学意义。结论:成功构建了LKB1真核表达载体,该基因在SCC-15细胞中超表达对细胞周期起阻滞作用,调控p53、PTEN、TGF-β和VEGF基因表达,可能参与调控p53和TGF-β等多种信号通路,为进一步研究LKB1基因在恶性舌鳞癌发病的机制和临床治疗的作用提供了重要实验依据。

NOD2上调自噬抑制舌鳞癌细胞增殖和迁移

目的:探讨NOD2在雷帕霉素(Rap)诱导下上调舌鳞癌SCC-15细胞自噬对增殖和迁移能力的影响。方法:NOD2表达载体转染SCC-15细胞上调NOD2表达,NOD2-shRNA载体转染SCC-15细胞,抑制NOD2表达;应用Rap诱导SCC-15细胞正常组、NOD2上调组和抑制组的细胞自噬活性,采用Western blot检测自噬标记蛋白LC3和Beclin-1表达变化;MTT法检测NOD2对自噬诱导后细胞增殖的影响;划痕实验检测NOD2对自噬诱导后细胞迁移能力的变化。结果:Rap诱导NOD2上调组细胞中LC3-II和Beclin-1表达显著增强(P<0.05)、诱导NOD2抑制组细胞中LC3-II和Beclin-1表达显著降低(P<0.05)。与对照组相比,Rap诱导NOD2上调组细胞生长明显抑制(P<0.05),迁移速率减慢;诱导NOD2抑制组细胞增殖加快(P<0.05),迁移速率增快。结论:NOD2可上调舌鳞癌SCC-15细胞自噬抑制其增殖和迁移。

纳米管辅助紫杉醇化疗口腔舌癌的增敏疗效分析

旨在研究多壁碳纳米管负载紫杉醇后对口腔舌癌SCC-15细胞的影响,探讨多壁碳纳米管负载紫杉醇后化疗口腔舌癌的增敏疗效作用。通过制备多壁碳纳米管和多壁碳纳米管-多烯紫杉醇载药系统,分别与SCC-15口腔舌癌细胞共育,采用CCK-8检测活性,Prestoblue检测细胞增殖抑制率,免疫组化法检测P53蛋白的表达,hoechst/PI双染法检测细胞凋亡,探讨碳纳米管对紫杉醇化疗口腔舌癌的敏感性是否提高,为临床化疗肿瘤提供了新方法。