耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及SCCmec分型

目的了解上海市普陀区人民医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药情况及SCCmec型别,为预测耐药菌株的发展趋势、为临床预防和治疗MRSA感染提供理论依据。方法收集该院2012年1月至2016年12月临床分离的MRSA共380株,采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验,采用多重聚合酶链反应检测SCCmec型别。结果所有菌株对利奈唑胺、万古霉素均敏感,敏感率为100.0%;对利福平、复方磺胺甲噁唑耐药率较低,分别为5.0%和7.6%;对红霉素、左氧氟沙星、四环素高度耐药,耐药率分别是100.0%、94.2%、93.4%和90.0%;对青霉素耐药率为100.0%。380株MRSA有SCCmecⅡ型281株(73.9%),SCCmecⅢ型59株(15.5%),SCCmecⅣa型5株(1.3%),另有35株(9.2%)未能分型。结论上海市普陀区人民医院分离的MRSA标本以SCCmecⅡ型为主,具有多重耐药的特征,不同SCCmec型别的耐药谱有所差异。

SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的基因定位

目的了解SCCmec相关的psm-mec基因在血液来源人葡萄球菌中的基因定位特征,为深入研究psm-mec基因在人葡萄球菌中的功能奠定基础。方法收集临床血培养分离的人葡萄球菌25株,通过PCR扩增mecA基因和psm-mec基因,多重PCR对耐甲氧西林人葡萄球菌SCCmec分型,PCR扩增mecR1/psm-mec基因与psm-mec/xylR基因间隔序列及fudoh基因,探究psm-mec基因在SCCmec上的定位特点。结果 PCR检测显示,21株为耐甲氧西林人葡萄球菌,psm-mec基因的检出率为47.6%,4株为甲氧西林敏感人葡萄球菌,未检出psm-mec基因。多重PCR结果显示,10株psm-mec基因阳性菌株中,2株属典型SCCmecⅢ型,5株属类SCCmecⅢ型,3株属SCCmec新型别。基因间隔序列和fudoh基因检测显示,10株psm-mec基因阳性人葡萄球菌中,mecR1/psm-mec基因和psm-mec/xylR基因及fudoh基因均阳性。结论 SCCmec相关的psm-mec基因广泛存在于血液来源的人葡萄球菌中,主要分布在典型SCCmecⅢ型、类SCCmecⅢ型和SCCmec新型别上,定位于mecR1基因与xylR基因之间。

医院获得性感染中出现携带SCCmec Ⅳ/Ⅴ的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（英文）

目的研究某院临床分离的医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型及分子流行病学特征。方法收集中南大学湘雅医院2012年1月~2012年12月临床分离的71株HA-MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,PCR检测PVL毒素基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性。结果 71株HA-MRSA以SCCmecⅢ型为主,占69.0%(49/71),其次为SCCmecⅣ型、SCCmecⅤ型和SCCmecⅡ型,分别占14.1%(10/71)、4.2%(3/71)和4.2%(3/71),另有6株(8.5%)菌株未能分型。HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA感染者年龄显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,携带PVL基因阳性率显著高于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,而两者入院至检出菌株的时间及住院天数均未见明显差异。HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA对左旋氧氟沙星、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素等的耐药率均显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA(P<0.05)。13株HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA菌株在55%的相似度水平形成一个大的组群。按照≥85%的相似度,这些菌株共形成3个PFGE簇以及4个单一菌株的PFGE型。结论在国内首次发现携带SCCmecⅤ型的HA-MRSA菌株,HASCCmecⅣ/ⅤMRSA已有在医疗机构传播的趋势,并成为医院内感染的重要来源。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因检测及耐药性分析

目的了解本院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）SCCmec基因的分布特点及耐药性。方法采用VITEK-2全自动微生物分析系统检测2010-2011年从患者分离的MRSA的耐药性，利用PCR方法检测SCCmec基因。结果分离株中mecA基因携带率为97．2％，对万古霉素、利奈唑胺敏感，对喹努普汀／达福普汀和利福平的耐药率小于20％，对左氧氟沙星、环丙沙星、红霉素和复方新诺明、克林霉素耐药率均大于70％。SCCmec基因共有4种类型（I～Ⅳ型），Ⅱ型17株（23．6％），Ⅲ型48株（66．7％），1V型3株（4．2％）。结论本院分离的MRSA的型别以SCCmecⅢ型为主，MRSA对抗茵药物呈现多重耐药现象。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性,SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MRSA的SCCmec基因型、PVLT、SST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主(47.2%),PVL基因均为阴性,12株(22%)MRSA TSST-1阳性。结论53株MRSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。

胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型

目的调查消化内科患者胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因的金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型。方法收集浙江大学医学院附属第一医院2008年7月～2013年7月消化内科患者815名分离的金黄色葡萄球菌75株，采用VITEK2COMPACT全自动微生物分析仪分析其药敏结果，采用PCR检测PVL基因，采用多重PCR对所有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型。结果消化内科金黄色葡萄球菌的感染率为9．2％，25例为社区获得性感染，其PVL阳性菌株16例，占64．0％；50例为医院获得性感染，其中PVL阳性菌株11例，占22％。SCC分型显示以SCCmecnl型为主，占43．3％（13／30），SCCmecⅡ型2株，SCCmec1V型10株，未检出SCCmecI型和V型。16株PVL基因阳性MRSA菌株中SCCmecnl型有9株（56．25％），IV型有6株（37．5％），另外有1株未成功分型。结论消化内科胆汁分离的金黄色葡萄球菌PVL基因携带及分子流行情况显示主要以SCCmec11I型为主，携带PVL基因率较高，存在区域性流行的特点。

牛源金黄色葡萄球菌耐药性及甲氧西林敏感和耐甲氧西林菌株演化相关性研究

为研究牛源金黄色葡萄球菌耐药性以及甲氧西林敏感(MSSA)和耐甲氧西林(MRSA)菌携带的耐药基因、MRSA的SCCmec基因型,揭示牛源MSSA与MRSA之间的演化相关性和MRSA起源和扩散途径,对2009年以来中国五省区不同牛场分离的54株金黄色葡萄球菌进行了药敏试验。对确定的12株MSSA和MRSA进行了耐药基因检测、SCCmec基因型分型和多位点测序分型(MLST)研究。54株菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明、多西环素、四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素的耐药菌株分别为88.8%、81.5%、88.9%、90.7%、92.6%、94.4%、79.6%、63.0%和70.4%。其中,对所测10种抗生素完全耐药的占5.6%,对5种以上耐药的占85.2%,6株(11.1%)对头孢西丁耐药。12株MSSA和MRSA菌株的药敏和耐药基因检测结果显示,3株MRSA对10种抗生素耐药;6株MSSA菌中,新疆分离株对2～4种抗生素耐药,其它省区分离株对7种以上抗菌素耐药。12株MSSA和MRSA菌均检出ermC和tetK基因;6株MRSA中均检出aac(6′)/aph(2″)基因,5株检出tetM基因,4株检出aph(3′)-Ⅲ基因;6株MSSA均未检出aac(6′)/aph(2″)和aph(3′)-Ⅲ,4株检出tetM基因。用多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型显示,5株为SCCmec IV,1株未能分型;12株菌的MLST分型发现,所有菌株分为ST50、ST965、ST6、ST97和ST9序列型。经eBURST v3分析,MRSA分布在CC7、CC4、CC21和CC9四个克隆复合群(CCs)中,MSSA分布在CC7和CC32克隆复合群中。以上研究表明,我国牛源金黄色葡萄球菌不仅耐药严重,且表现多重耐药;MRSA基因型以SCCmec IV为主。对牛源SCCmec IV型MRSA与同型人源MRSA的耐药谱分析发现有较大差异,推测位于质粒或转座子上的耐药基因可能插入到金黄色葡萄球菌基因组中,导致耐药基因在不同菌株间传播。根据ST97中有MSSA和MRSA以及牛源MRSA与人源MRSA的MLST比较,确认我国牛源MRSA是在抗生素的选择压力下由来源于不同克隆复合群的MSSA获得SCCmecIV而产生,推测同一克隆株MRSA的扩散并不是MRSA大范围出现的主要原因。

tst和pvl基因阳性金黄色葡萄球菌流行情况及分子特征

目的了解中毒性休克综合征毒素-1的tst基因和杀白细胞素的pvl基因阳性金黄色葡萄球菌(金葡菌)流行情况及其附属基因调节子(agr)和葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)型别。方法收集上海市及浙江省共7所医院的916株金葡菌,聚合酶链反应(PCR)检测tst、pvl、mec A和mec C基因,并对tst或pvl基因阳性菌株作agr及SCCmec(针对甲氧西林耐药金葡菌,MRSA)遗传学分型。结果 916株金葡菌中tst阳性208株,阳性率22.7%;pvl阳性35株,阳性率3.8%;mec A阳性665株(MRSA),未检测到mec C基因。在665株MRSA中,tst阳性198株(29.8%),agr和SCCmec分型均以2/Ⅱ型为主,分别占97.0%和94.4%;pvl阳性14株(2.1%),agr分型以1型(85.7%)为主,SCCmec分型以Ⅲ型(42.9%)和Ⅳa型(28.6%)为主。在251株甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)中,tst阳性10株(4.0%);pvl阳性21株(8.4%)。tst阳性率在MRSA菌株中较MSSA中高,而pvl检出率则在MSSA菌株中较高,且浙江地区MRSA中pvl的阳性率高于上海菌株,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 tst基因在MRSA菌株中阳性率较MSSA高;pvl阳性率相对较低,但因其与某些严重的金葡菌感染相关,临床应予以关注。

医院环境及临床分离MRSA分子流行病学研究

目的研究医院环境及临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病特征,为MRSA的医院感染防控提供依据。方法使用MicroScan walkaway-40SI全自动微生物分析仪对医院环境与临床分离MRSA进行鉴定。通过多重PCR扩增特异基因片段进行SCCmec基因分型,并应用spa分型技术进行同源性分析。结果 SCCmec分型结果显示,环境分离的7株MRSA分为两型:其中SCCmecⅢ型6株;SCCmecⅣ型1株。临床分离44株MRSA分为四型:其中SCCmecⅡ型8株、Ⅲ型22株、Ⅳ型12株、Ⅴ型1株,未检出Ⅰ型菌株,并有1株未能分型。SCCmecⅢ型MRSA主要分布在新生儿监护病房(NICU)、呼吸内科、重症监护病房(ICU)和神经外科。对MRSA进行spa基因分型可见:NICU主要流行株为t437型,呼吸内科主要流行株为t030型,而ICU和神经外科流行株均为t034型,且上述科室环境与临床分离株高度同源。结论医院环境与临床分离的MRSA均以SCCmecⅢ型为主。spa分型结果显示两类MRSA同源性较高,科室之间存在同型MRSA的交叉传播。MRSA定植于医院环境是导致其医院感染流行传播的重要因素。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌染色体盒的研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的产生是由甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)获得外源性的SCCmec所致。MRSA菌株可以产生一种新的青霉素结合蛋白PBP2a,PBP2a降低了与β-内酰胺类抗生素的亲合力,从而对β-内酰胺类抗生素产生耐药性。PBP2a由mecA基因编码,mecA基因存在于葡萄球菌盒式染色体(Staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec)中,SCCmec是一种可移动的遗传元件,该元件还携带除mecA基因外的其他抗菌药物的耐药基因,造成多重耐药(Multidrug-resistance,MDR)。SCCmec目前主要分为8型,其中又分为若干亚型。SCCmec的基因型与MRSA的流行背景有关,不同地区的SCCmec基因分型分布可能不同。

舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药性的逆转作用

以多重耐药金黄色葡萄球菌为研究对象,通过测定非抗生素类药物舍曲林与不同抗生素作用的最低抑菌浓度、生长速率、时间-杀菌曲线及实时荧光定量PCR定量检测耐药基因mecA和外排泵基因norA的转录水平,探讨舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药性的逆转作用及逆转机制.结果显示:当舍曲林质量浓度高于1μg/mL时,对金黄色葡萄球菌有抑制作用;亚抑菌浓度(1/2MIC)的舍曲林和四环素联用时对金黄色葡萄球菌具有杀菌作用;当舍曲林和四环素、环丙沙星、克林霉素联用时对金黄色葡萄球菌具有协同或相加抑制作用,可使其对3种抗生素的敏感性提高75%以上;低质量浓度的舍曲林可显著降低外排泵基因norA和SCCmec基因盒中mecA基因的表达水平.实验结果表明,舍曲林能通过抑制norA和mecA等耐药基因的表达来调控金黄色葡萄球菌的多重耐药性,通过联合抑菌部分逆转金黄色葡萄球菌对多种抗生素的耐药性.

青海省某三甲医院MRSA耐药性的分子流行病学研究

目的:通过分析某三甲医院无菌体液标本MRSA菌株(30株)耐药基因分型,间接掌握该地区MRSA耐药基因携带状况,为该院及本地区的医院感染防控提供基础依据。方法:收集2018年1月至11月临床分离的MRSA菌株进行体外药敏试验,采用聚合酶链反应及凝胶电泳技术测定SCCmec基因及型别,并通过基因测序与GENBANK上的MRSASCCmec基因组序列进行比对。结果:MRSA菌株对青霉素类、头孢菌素类耐药率为100%,对林可胺类、大环内酯类耐药率为78.6%;多重PCR及基因测序检测SCCmec基因阳性率为87%,基因型为SCCmecⅣ型,其中,26株为SCCmecⅣa型,2株为SCCmecⅣd型。结论:该院MRSA菌株SCCmec基因阳性率与国内其他地区报道基本一致,其分型又与其他地区不同,分离的MRSA菌株为SCCmecⅣ型。

新的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌染色体基因盒型别与其产毒性和耐药性的研究

目的探讨新的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）染色体基因盒（SCCmec）型别的耐药性和产毒性，进一步明确SCCmec型别的多重耐药模式。方法采用多重聚合酶链反应（PCR）扩增法，对临床分离出的金黄色葡萄球菌菌株进行SCCmec分型及其相关毒力基因耐药性测定。 结果本实验应用9对位点特异性引物对13株MRSA进行了多位点PCR分型测定，共检测到5种不同的测定位点构成图谱，其中3种图谱与已有的ⅢD型、ⅡD型和Ⅳ型相同，2种图谱为未见报道的Ⅱ型和Ⅲ型新亚型。ⅢD型、ⅡD型和Ⅳ型分别发现1株、1株和2株，Ⅱ型新亚型发现6株，Ⅲ型新亚型发现3株，新的SCCmec型别亚型比例较高，占69.2%（913）。新Ⅱ型亚型含有Ⅱ型上游位点B和C,下游位点G，缺乏Ⅱ型下游特异性位点D；新Ⅲ型亚型含有Ⅲ型的上游位点C、E和下游位点F，缺乏下游位点G，多了一个Ⅱ型的下游位点D；其对应菌株的毒力基因检测含有femA、see、etb和tst基因。结论新的SCCmec型别的MRSA，它的基因型与已报道的基因型有所不同，新的菌株同时产3种毒素基因，而且还含有femA基因，故新的菌株不仅是MRSA的高度耐药株，同时产毒性高、耐药性高、抗药谱广，值得引起高度重视和关注。

多重PCR系统的建立及其在社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌中PVL噬菌体分型中的应用

目的从基因组型和表型两方面解析从医院环境中分离出的社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA),对携带杀白细胞素(PVL)基因的MRSA中的PVL溶原噬菌体进行分型。方法聚合酶链式反应(PCR)解析菌株所携带的SCCmec基因岛型及PVL毒素基因;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;设计8组PCR反应组合检测PVL溶原噬菌体型。结果 36株菌株所携带的SCCmec基因岛分型多样化。携带Ⅳc型SCCmec的菌株占多数,为16株(44.4%),其次为携带Ⅱ型SCCmec的菌株,为10株(27.8%)。各菌株所携带的SCCmec型别与菌株的凝固酶分型高度一致。经多重PCR检测,6株PVL阳性菌株所携带的PVL噬菌体型分别为φ108PVL型(3株),φ2958PVL型(1株)和φSa2mw型(2株)。结论院内分离的社区型MRSA的基因型和表型多样化,PVL噬菌体分型的多重PCR系统具有可应用性,应用此系统对鉴别具有异构六角形头部和伸长形头部的PVL溶原噬菌体有意义。

某院ICU医院获得性肺炎患者痰分离MRSA耐药基因和pvl基因携带情况

目的了解医院获得性肺炎患者痰中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因和毒力因子pvl基因携带情况。方法对来源于某院重症监护病房(ICU)医院获得性肺炎患者痰中的46株MRSA,采用聚合酶链反应(PCR)检测细菌耐药基因(mecA、aacA-D、tetK、tet M、msrA、msrB、ermA、ermC、vatA、vatB、vatC、femB和linA)和毒力因子pvl基因,并以PCR法分析MRSA菌株SCCmec型别。结果 46株MRSA中,耐药基因mecA、aacA-D、tetK、msrA、ermA、ermC、femB和linA的检出率分别为100%、54.35%、36.96%、13.04%、36.96%、52.17%、71.74%和10.87%,所有菌株均未检出tet M、msrB、vatA、vatB和vatC基因;毒力基因pvl携带率为65.22%。46株MRSA共检出4种SCCmec基因型,其中SCCmecⅡ型、Ⅲ型、IVc型、V型分别为26.09%、52.17%、2.17%和2.17%。结论医院获得性肺炎患者痰中MRSA携带多种耐药基因,且毒力基因pvl携带率较高,SCCmec基因型以Ⅲ型为主,临床医务人员对此情况应高度重视。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型研究与耐药基因检测

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒染色体(SCCmec)基因型分布特点和耐药基因的携带状况。方法采用多重聚合酶链反应(PCR)对医院分离的125株MRSA进行SCCmec基因型分型,普通PCR对其中的50株MRSA进行6种耐药基因扩增。结果检测的125株MRSA中124株SCCmec基因型为Ⅲ型,1株不能分型,6种耐药基因的阳性率分别为aac(6′)/aph(2″)98%、aph(3′)Ⅲ基因46%t、etM基因72%、erm基因86%,未扩增出TEM和ant(4′、4″)基因。结论引起感染的MRSA的基因型基本为SCCmecⅢ型,SC-CmecⅢ型的MRSA对氨基糖苷类、红霉素类、四环素类耐药基因有较高的携带率,多重PCR法可以有效的用于大批量临床分离的MRSA的SCCmec分型研究。

99株表皮葡萄球菌早孕宫颈拭子与外环境分离株耐药性及SCCmec分型研究

目的了解2015—2016年从北京市朝阳区早孕宫颈拭子和外环境中分离的99株表皮葡萄球菌的耐药性与耐药基因携带情况以及SCCmec型别。方法对99株表皮葡萄球菌,采用K-B法对头孢西丁、微量肉汤稀释法对万古霉素、达托霉素、青霉素、红霉素、复方新诺明、四环素、环丙沙星、克林霉素、庆大霉素、氯霉素进行药敏试验,采用PCR法对ermA、ermB、ermC、msrA、norA1、norA2、sul1、sul2、sul3、aac(6′)/aph(2″)、ant(4′,4″)、ant(6)、tetM耐药基因和SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc、Ⅳd、Ⅴ型别基因进行检测,毛细管凝胶电泳法进行结果确认,SPSS进行数据分析。结果99株mecA阳性表皮葡萄球菌对万古霉素100%敏感、对达托霉素93.94%敏感,对青霉素、红霉素、头孢西丁、复方新诺明、四环素、环丙沙星、克林霉素、庆大霉素、氯霉素耐药率依次为97.98%、85.86%、79.80%、52.54%、27.27%、43.43%、36.36%、23.23%、11.11%;norA1、norA2、ermA、ermB、ermC、msrA、sul1、sul2、sul3、aac(6′)/aph(2″)、ant(4′,4″)、ant(6)、tetM携带率分别为100%、93.94%、0.00%、3.03%、17.17%、57.58%、50.51%、12.12%、4.04%、30.30%、8.08%、4.04%、25.26%;99株mecA阳性表葡葡萄球菌SCCmecⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc、Ⅳd、Ⅴ分离率分别为5.05%、0.00%、43.43%、10.10%、0.00%、3.03%、3.03%、19.19%,并有4.04%(4/99)的菌株携带两种SCCmec型别,12.12%(12/99)菌株未分型。结论99株mecA阳性表皮葡萄球菌中未发现万古霉素耐药菌株。mecA阳性表皮葡萄球菌多重耐药基因携带率为89.90%。菌株大环内酯类、磺胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药机制以携带msrA、sul1、aac(6′)/aph(2″)耐药基因为主。SCCmec分型以SCCmecⅢ型为主。SCCmecⅢ型和未分型菌株的多重耐药基因携带率分别为88.37%和75%,其他SCCmec型菌株均100%携带多重耐药基因。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec中ccr复合体基因型分析

目的了解MRSA临床株葡萄球菌盒染色体mec（SCCmec）中盒染色体重组酶（ccr）复合体型别的特点。方法收集MRSA临床株78株，应用多重引物PCR扩增ccr复合体各型中的特异性序列，确定ccr型别。结果78株MRSA中，1株ccr1（1．28％）、3株ccr2（3．85％）、11株ccr3（14．10％）、3株ccr5（3．85％）。52株同时携带两种及以上ccr基因，其中50株携带ccr3、ccr5（64．10％）、1株携带ccr2、ccr5（1．28％）、1株携带ccr2、ccr3、ccr5（1．28％），另有8株未检测到ccr基因。结论本研究中MRSA的ccr基因型以ccr3、ccr5复合型为主，并可能存在一些新型ccr复合体。

金黄色葡萄球菌药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型

【摘要】 目的 探讨金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型情况。方法 采取纸片琼脂扩散法对500株金黄色葡萄球菌进行药敏检测和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的测定,并采取多聚酶链反应（PCR）法进行SCCmec基因分型检测。结果 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为40.0%（200/500）,而且对克林霉素和复方磺胺甲噁唑以及四环素具有较高的耐药率,其中对庆大霉素和喹诺酮类药物的耐药率较低,同时对克林霉素和β-内酰胺类的药物呈现完全耐药,其他的则表现多重的耐药性,并未发现有耐万古霉素的菌株;通过对MRSA的SCCmec基因分型,其中主要表现为SCCmecⅢ型和 SCCmecⅣ型以及SCCmecⅤ型,另外有7株未分型。结论 在金黄色葡萄球菌的分离中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌表现多重耐药性,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型和SCCmecⅣ型以及SCCmecⅤ型。

迷你SCC重组质粒的构建及ccr重组酶对SCCmec基因岛的整合功能研究

目的构建4组迷你SCC重组质粒载体,并导入受体菌N315ex中,验证并比较ccrC和ccrAB重组酶具有识别特异性DNA片段,进而把Ⅴ型或Ⅱ型SCCmec基因岛整合入细菌染色体上的功能。方法以转化株0342(pSR5C)和N315(pSR2AB)中抽提的染色体DNA为模板,PCR扩增DNA片段attⅤ和attⅡ,并连接到pYT3载体上,构建pYTattⅤ和pYTattⅡ;将PCR扩增的重组酶基因ccrC0342和ccrAB315分别交叉克隆到pYTattⅤ和pYTattⅡ上,构建重组质粒,并导入N315ex受体菌,在适宜温度培育下充分表达质粒,应用在不同温度培养下含药培养基上菌落数量变化及PCR方法,检测各转化株中质粒整合频率,验证质粒插入方向。结果成功构建4组迷你SCC重组质粒。转化株N315ex(pSR5attⅤ)、N315ex(pSR5attⅡ)和N315ex(pSR2attⅡ)中迷你SCC质粒以不同频度和特定方向整合入细菌染色体中,整合效率分别为8.600%、0.005%和7.200%。N315ex(pSR2attⅤ)中未见整合发生。结论与ccrAB仅可识别Ⅱ型SCCmec基因岛的attⅡ相比,ccrC重组酶可识别V型SCCmec的attⅤ和Ⅱ型SCCmec的attⅡ两组DNA片段,发挥其重组整合作用。