期刊文献+
共找到73篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
Preparation and Properties of Aqueous SCNTs Dispersion based on A UV-curable Polymeric Dispersant 被引量:1
1
作者 袁妍 WU Haiqiang +3 位作者 LIU Jingcheng LUO Jing LIU Ren LIU Xiaoya 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2018年第2期485-491,共7页
A novel photosensitive copolymer P(SS-co-AA-g-GMA)(PSAG) was synthesized and utilized to noncovalently functionalize pristine single-walled carbon nanotubes(SCNTs). PSAG was highly effective for the solubilizati... A novel photosensitive copolymer P(SS-co-AA-g-GMA)(PSAG) was synthesized and utilized to noncovalently functionalize pristine single-walled carbon nanotubes(SCNTs). PSAG was highly effective for the solubilization of SCNTs in water and validated by UV-vis absorption spectra experiments, resulting in homogeneous and stable PSAG-SCNT aqueous dispersion. The microstructure of SCNTs was observed through Raman spectroscopy and transmission electron microscopy. In addition, compared with the two common polymeric dispersants of Triton X-100 and PSS, PSAG demonstrated more effective performances for dispersing SCNTs under identical conditions. Furthermore, the photosensitive PSAG-SCNTs can be crosslinked after UV irradiation, leading to significant improvement in the water resistance of SCNT films. UV-cured films can be transferred to plastic wrap to form a flexible film with high electrical conductivity. 展开更多
关键词 single-walled carbon nanotubes(scnts) polymeric dispersant UV-curable conductive water resistance
下载PDF
Computational Analysis of Heat and Mass Transfer in Magnetized Darcy-Forchheimer Hybrid Nanofluid Flow with Porous Medium and Slip Effects 被引量:1
2
作者 Nosheen Fatima Nabeela Kousar +1 位作者 Khalil Ur Rehman Wasfi Shatanawi 《Computer Modeling in Engineering & Sciences》 SCIE EI 2023年第12期2311-2330,共20页
A computational analysis of magnetized hybrid Darcy-Forchheimer nanofluid flow across a flat surface is presented in this work.For the study of heat and mass transfer aspects viscous dissipation,activation energy,Joul... A computational analysis of magnetized hybrid Darcy-Forchheimer nanofluid flow across a flat surface is presented in this work.For the study of heat and mass transfer aspects viscous dissipation,activation energy,Joule heating,thermal radiation,and heat generation effects are considered.The suspension of nanoparticles singlewalled carbon nanotubes(SWCNTs)and multi-walled carbon nanotubes(MWCNTs)are created by hybrid nanofluids.However,single-walled carbon nanotubes(SWCNTs)produce nanofluids,with water acting as conventional fluid,respectively.Nonlinear partial differential equations(PDEs)that describe the ultimate flow are converted to nonlinear ordinary differential equations(ODEs)using appropriate similarity transformation.The ODEs are dealt with numerically by means of MATLAB’s inbuilt routine function bvp4c.Velocity,temperature,and concentration profiles are explained pictorially whereas Sherwood number,local skin friction coefficient,and Nusselt number values are represented through bar charts.Thermal radiation and activation parameters shows direct impact on flow field.Furthermore,hybrid nanofluid admits a higher magnitude of velocity and temperature than nanofluid,but the concentration profile exhibits the opposite trend.The notable findings of the present investigation have significant applications in heat combustion and cooling chambers,space technology,the ceramics industry,paint and conductive coatings,bio-sensors,and many more. 展开更多
关键词 Heat transfer hybrid nanofluid MCNTs scnts MHD Darcy-Forchheimer joule heating activation energy
下载PDF
猪成纤维细胞细胞周期同期化对核移植胚胎发育的影响 被引量:2
3
作者 吴正三 杨素芳 +3 位作者 陈凌声 陈施蓓 汪彩珠 石德顺 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-7,共7页
供体细胞所处的细胞周期及细胞周期同期化的方法对于体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)的成功非常重要,本研究对血清饥饿培养处理与培养至完全汇合后的猪成纤维细胞周期同期化水平进行了检测。利用不同方法对猪成... 供体细胞所处的细胞周期及细胞周期同期化的方法对于体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)的成功非常重要,本研究对血清饥饿培养处理与培养至完全汇合后的猪成纤维细胞周期同期化水平进行了检测。利用不同方法对猪成纤维细胞同期化处理后,通过流式细胞仪对细胞的细胞周期分布比率进行了检测。将细胞进行血清饥饿24~72h,显著地增加了Go/G。期的细胞百分率(92.2%-93.7%VS.77.8%,P〈0.05)。将细胞培养至完全汇合后再培养24-48h,GgG。期的细胞比例类似于血清饥饿法(94.4%,89.6%)。血清饥饿24h后,置换为10%FBS能逆转至生长期。用这两种不同方法处理后的体细胞作为核移植的供体构建重构胚,分裂率与囊胚率差异不显著(P〉0.05)。结果表明,猪成纤维细胞通过血清饥饿法或者培养至汇合完全均能有效地将细胞周期同期化至G0/G1期,且均可作为体细胞核移植的供体细胞。 展开更多
关键词 成纤维细胞 细胞周期同期化 体细胞核移植(scnt) 胚胎发育
下载PDF
1例死亡克隆牛主要脏器组织学观察及胎盘印记基因甲基化水平分析 被引量:2
4
作者 马馨 张胜 +4 位作者 朱屹然 马盼盼 杨树宝 栾维民 李子义 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期16-18,22,I0001,共5页
虽然体细胞克隆技术已经在多种动物获得成功,但是仍然存在效率低、克隆胚胎发育异常等问题,严重限制了该技术的应用。为提高克隆效率,探讨克隆动物发育异常的原因,本研究对1例死亡克隆牛主要内脏器官进行了组织学观察,并对其胎盘印记基... 虽然体细胞克隆技术已经在多种动物获得成功,但是仍然存在效率低、克隆胚胎发育异常等问题,严重限制了该技术的应用。为提高克隆效率,探讨克隆动物发育异常的原因,本研究对1例死亡克隆牛主要内脏器官进行了组织学观察,并对其胎盘印记基因甲基化状态进行分析。结果表明,此例死亡克隆牛主要内脏器官除肾脏外,均不同程度出现充血、增生及淋巴细胞浸润等病理变化。胎盘增生明显并伴有充血,胎盘中印记基因H19及Peg-10的甲基化水平分别为84.6%和88.6%,显著高于50%,出现超甲基化状态。推测体细胞核移植过程影响了供核细胞的表观重编程,导致了印记基因H19及Peg-10的迷乱的DNA甲基化状态,并影响胎盘及内脏器官的正常发育。 展开更多
关键词 scnt 主要内脏器官 印记基因 胎盘
下载PDF
外源激素组合控制青春期前奶山羊卵泡超数同步发育及其卵母细胞发育潜能的评价(英文) 被引量:1
5
作者 沙红英 孙建华 +6 位作者 陈娟 陈建泉 徐旭俊 吴友宾 黄志军 胡大为 成国祥 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期245-252,共8页
本研究的目的是探索自青春期前奶山羊获取大量可用于体细胞核移植的卵母细胞的可能性。为此,本研究比较了几种不同组合的激素处理方法(对照、FSH、E2-P4和E2-P4-FSH)对出生39-60日龄的奶山羊卵巢大小、卵泡数量和卵泡大小的影响:同时将... 本研究的目的是探索自青春期前奶山羊获取大量可用于体细胞核移植的卵母细胞的可能性。为此,本研究比较了几种不同组合的激素处理方法(对照、FSH、E2-P4和E2-P4-FSH)对出生39-60日龄的奶山羊卵巢大小、卵泡数量和卵泡大小的影响:同时将出生39-120日龄奶山羊按年龄分成三组来研究年龄对激素处理时招募起始生长卵泡数量的影响:然后,比较了来自E2-P4- FSH和FSH处理的早青春期前奶山羊卵巢上直径大于3mm卵泡中卵母细胞减数分裂能力;最后,通过SCNT方法验证E2-P4-FSH处理的早青春期前奶山羊卵巢上直径大于3mm卵泡中卵母细胞的发育能力。在四组激素处理的早青春期前奶山羊中,E2-P4-FSH处理组的卵巢最大、卵泡(直径大于3 mm)数量最多。在不同的年龄组中,39-60天组奶山羊卵巢上直径大于3mm的卵泡数量显著多于61-90天和91-120天组的。卵母细胞减数分裂能力的分析结果表明,来自E2-P4-FSH处理组的卵母细胞减数分裂能力显著高于FSH处理组的卵母细胞。与E2-P4-FSH处理后的成年奶山羊卵母细胞相比,早青春期前奶山羊卵母细胞发育能力较低:卵母细胞成熟后,作为受体用于体细胞核移植后的克隆囊胚发育率低于成年奶山羊(15.3%versus 22.1%,P<0.01)。然而,早青春期前的奶山羊经E2-P4-FSH处理后,自每头羊卵巢上直径大于3mm的卵泡数显著高于成年奶山羊(108±10.3 versus 28±5.0),因此,每头早青春期前奶山羊产生的克隆囊胚绝对数量显著高于成年奶山羊(7.1±2.7 versus 4.2±1.4)。由此,从本研究可以得出结论:E2-P4-FSH处理的早青春期前奶山羊能够为体细胞核移植研究提供相对多数量的具备一定发育能力的成熟卵。 展开更多
关键词 青春期前奶山羊 E2-P4-FSH处理 成熟卵 scnt胚胎发育能力
下载PDF
提高哺乳动物克隆效率的研究进展 被引量:3
6
作者 许卫华 吴珍芳 石俊松 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2516-2523,共8页
体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer,SCNT)又称为体细胞克隆技术,在生物医学、遗传修饰动物研究及大家畜的育种和良种扩繁等领域具有重要的理论意义和现实价值,但目前该项技术依然存在如克隆效率低下、克隆动物表型异常等... 体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer,SCNT)又称为体细胞克隆技术,在生物医学、遗传修饰动物研究及大家畜的育种和良种扩繁等领域具有重要的理论意义和现实价值,但目前该项技术依然存在如克隆效率低下、克隆动物表型异常等问题。近年来,研究人员通过在培养基中添加小分子药物、选择优势供体细胞系(包括iPS细胞)、优化传统核移植参数、对发育关键基因(如XIST及H3K9me3去甲基化酶等)的靶向遗传调控等途径,探索提高克隆效率的新思路、新工艺和新方法,作者着重对上述研究进展进行简要综述。 展开更多
关键词 哺乳动物 体细胞核移植技术(scnt) 克隆效率
下载PDF
体细胞核移植与iPS细胞研究的对比分析
7
作者 罗虎 刘渔凯 李泽桂 《局解手术学杂志》 2010年第5期427-428,共2页
关键词 scnt技术 诱导多能干细胞 IPSC
下载PDF
转基因克隆牛胎盘中印迹基因PEG10的DNA甲基化水平 被引量:8
8
作者 苏建民 许文兵 +3 位作者 李艳艳 王丽君 王勇胜 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期533-538,共6页
低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死... 低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死亡是否与其胎盘中印迹基因的甲基化的重编程程度相关,文章通过亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)和亚硫酸氢盐联合限制性内切酶分析法(Combined bisulfite restriction analysis,COBRA),对印迹基因PEG10在围产期死亡且存在发育缺陷的转基因克隆牛的胎盘(死亡组)和存活的转基因克隆牛的胎盘(存活组)与正常对照牛胎盘(对照组)的DNA甲基化水平进行了详细的比较。结果发现,与对照组相比,PEG10基因在死亡组上表现出异常的超甲基化水平,而存活组与对照组相比无显著性差异。研究结果显示,胎盘中印迹基因的DNA甲基化表观重编程不彻底可能是导致转基因克隆牛发育异常进而死亡的主要原因之一。 展开更多
关键词 DNA甲基化 PEG10 体细胞核移植 转基因克隆牛
下载PDF
利用改进的手工克隆技术生产转GFP基因猪克隆胚胎 被引量:5
9
作者 张鹏 杨珍珍 +6 位作者 窦红伟 李伟杭 律波 Bolund Lars 杜玉涛 谭萍萍 马润林 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期527-532,共6页
通过体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)培育转基因动物新个体是当前被广泛使用的技术之一,但其生产成本高和转基因囊胚形成率低在很大程度上制约了该技术的应用。文章报告对该技术的一些改进以提高其成功率并降低成本... 通过体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)培育转基因动物新个体是当前被广泛使用的技术之一,但其生产成本高和转基因囊胚形成率低在很大程度上制约了该技术的应用。文章报告对该技术的一些改进以提高其成功率并降低成本。首先将增强型绿色荧光基因(EGFP)导入猪胎儿成纤维细胞中,通过荧光观察EGFP的表达来筛选适合做细胞核移植的体细胞。这样避免了外源EGFP基因虽已整合至猪基因组但不表达的情况,保证供体细胞100%是表达目标蛋白(绿色荧光蛋白)的细胞;然后利用新一代体细胞核移植技术——手工克隆技术(Handmade cloning,HMC)将供体细胞与卵母细胞融合生产胚胎。共收集了4个批次378个肉用家猪的卵母细胞,经体外培养成熟后手工去核得到266个去核卵母细胞,与EGFP细胞融合后获得127个重构胚胎,将重构胚胎体外培养到144 h,得到转基因囊胚65个,平均囊胚率为52.1±8.3%。与传统SCNT相比,HMC不仅操作简便,而且能大幅提高核移植细胞的囊胚率。更为重要的是,改进的手工克隆技术摆脱了昂贵的显微操作仪,为产业化生产转基因动物提供了新的实用基础。 展开更多
关键词 手工克隆 体细胞核移植 绿色荧光蛋白 克隆胚胎
下载PDF
无血清培养基IVD101和G1/G2在牛体细胞核移植中的应用研究 被引量:3
10
作者 李荣 刘颖 +7 位作者 赵兴波 王莉莉 王海萍 丁方荣 李京 李松 高凤磊 戴蕴平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1487-1492,共6页
通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作... 通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基(IVD101、G1/G2)条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1/G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa+5%FBS作为对照组。无血清培养基IVD101和G1/G2的囊胚发育率与对照组无显著性差异(41.2%±9.1%、42.2%±10.8%,48.0%±9.2%,P>0.05)。通过囊胚差异染色和冷冻/解冻胚胎存活率分析胚胎质量,发现无血清培养基ICM/Total略低于对照组(31.8%±10.5%、29.5%±11.9%vs.33.0%±14.8%),但无显著性差异(P>0.05);3个组别的囊胚经程序化冷冻/解冻后无血清培养基的存活率(IVD101、G1/G2)略高于对照组,但差异不显著(84.8%、80.4%vs.77.3%,P>0.05)。结果证明无血清培养基(IVD101、G1/G2)可以支持体细胞核移植重构胚的体外发育,且其对程序化冷冻的耐受性与添加血清组(CR1aa+5%FBS)相似。 展开更多
关键词 无血清培养基 体细胞核移植 差异染色 胚胎冷冻
下载PDF
序贯培养液G1/G2对山羊核移植胚胎发育和质量的影响 被引量:2
11
作者 刘军 郑聪颖 +4 位作者 李长雷 杜珊 李亮亮 马保华 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期442-447,共6页
为了优化山羊核移植胚胎体外培养体系,提高核移植效率,本研究检测了山羊体细胞核移植(SCNT)胚胎在序贯培养液G1/G2中的发育率和囊胚细胞凋亡,以及核移植胚胎移植后的妊娠率,以传统mSOF-FBS培养液作为对照组,评估序贯培养液G1/G2支持山... 为了优化山羊核移植胚胎体外培养体系,提高核移植效率,本研究检测了山羊体细胞核移植(SCNT)胚胎在序贯培养液G1/G2中的发育率和囊胚细胞凋亡,以及核移植胚胎移植后的妊娠率,以传统mSOF-FBS培养液作为对照组,评估序贯培养液G1/G2支持山羊核移植胚胎的发育能力。结果显示,与对照组相比,G1/G2组的囊胚发育率差异不显著((27.7±3.1)%vs(25.3±1.0)%,P>0.05),囊胚细胞数和囊胚细胞凋亡率显著降低(分别为(93.2±4.5)vs(109.1±6.2)和(4.9±0.2)%vs(11.3±0.1)%,P<0.05),但移植后的妊娠率显著增高(21.4%vs 8.0%,P<0.05)。结果表明,与传统的培养液mSOF-FBS相比,序贯培养液G1/G2能更好地支持山羊核移植胚胎的发育。 展开更多
关键词 山羊 胚胎培养 体细胞核移植 凋亡
下载PDF
亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响 被引量:3
12
作者 曹泽磊 苏建民 +3 位作者 胡广卫 王勇胜 唐爽 张涌 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期24-28,共5页
为探索用亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞是否有利于牛体细胞克隆胚的体外发育,将采集的卵母细胞分成3组:对照组,采集后的卵母细胞直接放入成熟液培养,不用亮甲酚蓝处理;控制对照组,卵母细胞于PBS中放置90 min后放入成熟液中培养;试验组,将... 为探索用亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞是否有利于牛体细胞克隆胚的体外发育,将采集的卵母细胞分成3组:对照组,采集后的卵母细胞直接放入成熟液培养,不用亮甲酚蓝处理;控制对照组,卵母细胞于PBS中放置90 min后放入成熟液中培养;试验组,将采集的卵母细胞在含有26μmol/L亮甲酚蓝的PBS中放置90 min。然后将处理过的卵母细胞根据着色情况分为两组,即BCB+(胞质呈蓝色,成熟卵母细胞)和BCB-(胞质未着色,生长期卵母细胞)。各组卵母细胞24 h体外成熟培养,统计各组卵母细胞成熟率。分别用成熟后的各组卵母细胞用于细胞核移植,统计体细胞核移植的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数。结果表明,BCB+组卵母细胞的成熟率明显高于BCB-组卵母细胞的成熟率(74.0%,53.4%),差异显著(P<0.05)。BCB+组的囊胚率(45.0%)与对照组、控制对照组和BCB-组的囊胚率(34.9%,36.4%和5.2%)相比差异显著(P<0.05)。另外BCB+组的囊胚细胞总数(114.5±7.5)较其他组差异显著(P<0.05)。表明通过亮甲酚蓝染色法筛选出成熟的高质量牛卵母细胞用于体细胞核移植,可以获得更高的克隆囊胚率。 展开更多
关键词 亮甲酚蓝 卵母细胞 体细胞核移植
下载PDF
全细胞胞质内注射法生产猪重构胚的研究(简报) 被引量:3
13
作者 孔庆然 罗一博 +3 位作者 田江天 王振坤 张力 刘忠华 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期70-74,共5页
自从1997年克隆羊“Dolly”出生以来。体细胞核移植技术得到广泛应用,已经有十余种克隆哺乳动物出生,但克隆效率仍然很低。核移植方法的不够完善是其重要原因之一。传统的核移植方法——电融合法和胞质内注射法虽然都取得了成功。但还... 自从1997年克隆羊“Dolly”出生以来。体细胞核移植技术得到广泛应用,已经有十余种克隆哺乳动物出生,但克隆效率仍然很低。核移植方法的不够完善是其重要原因之一。传统的核移植方法——电融合法和胞质内注射法虽然都取得了成功。但还存在操作复杂及需要辅助设备等问题。为了能够找出一种既容易操作,又不需要特殊设备的核移植方法,本研究对胞质内注射技术进行了改进,尝试了一种新的核移植方法——非Piezo辅助的全细胞胞质内注射法,即不通过Piezo辅助。不破坏供体细胞膜直接将供体细胞注入卵母细胞内,并且比较了这种方法与电融合法对猪体细胞核移植效率的影响。探讨了非Piezo辅助的全细胞胞质内注射法在猪体细胞核移植上的可行性。 展开更多
关键词 体细胞核移植 电融合法 全细胞胞质内注射法
下载PDF
胚胎移植时机对牛体细胞克隆胚胎妊娠率的影响 被引量:5
14
作者 赵磊文 伏静 +3 位作者 管鹏飞 李华 黄淑帧 曾溢滔 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2008年第2期96-100,共5页
以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆,并将发育7 d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,... 以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆,并将发育7 d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,组1:排卵后5~6 d(不含6 d);组2:排卵后6~7d;组3:排卵后7~8 d(不含7 d)。结果显示:对于体外胚胎而言,第2组的受孕率高于第1组(P>0.05),第3组的受孕率最低(P<0.05),且120 d的受孕率为0。与此相反,对于体内胚胎,第3组的受孕率高于其他2组。通过实验可以证明对于7 d的体外胚胎选择在代孕牛排卵后6—7 d移植可以得到较高的受孕率:而对于体内胚胎而言则应选择在受体牛排卵后7~8 d移植,可得到较高的妊娠率。 展开更多
关键词 体细胞核移植 受孕 胚胎移植
下载PDF
体细胞核移植克隆牛的遗传物质鉴定 被引量:3
15
作者 焦飞 颜景斌 +3 位作者 李华 黄英 黄淑帧 曾溢滔 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第3期268-272,共5页
应用活体取卵(OPU)技术采集遗传背景清晰的卵母细胞作为受体细胞,与不同来源的供体细胞核进行体细胞核移植(SCNT)。通过微卫星DNA及线粒体DNA检测,分别对5头克隆牛核内和核外DNA进行了分析。结果表明克隆牛的微卫星DNA与核供体牛完全一... 应用活体取卵(OPU)技术采集遗传背景清晰的卵母细胞作为受体细胞,与不同来源的供体细胞核进行体细胞核移植(SCNT)。通过微卫星DNA及线粒体DNA检测,分别对5头克隆牛核内和核外DNA进行了分析。结果表明克隆牛的微卫星DNA与核供体牛完全一致,而线粒体DNA则全部来源于卵母细胞。 展开更多
关键词 体细胞核移植 活体取卵 微卫星DNA 线粒体DNA
下载PDF
TSA浓度及处理时间对猪体细胞核移植胚胎体外发育影响 被引量:3
16
作者 黄波 郇延军 +7 位作者 石永乾 王峰 何文腾 张鑫淼 刘仲凤 朱江 吕明 刘忠华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期122-126,共5页
曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。有研究表明TSA处理可以提高核移植胚胎的发育率。为探讨TSA对猪核移植胚胎发育的作用,试验重点研究了TSA浓度及处理时间对核移植胚胎体外发育的影响,同时也探索了TSA对... 曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。有研究表明TSA处理可以提高核移植胚胎的发育率。为探讨TSA对猪核移植胚胎发育的作用,试验重点研究了TSA浓度及处理时间对核移植胚胎体外发育的影响,同时也探索了TSA对不同供核细胞构建的重构胚体外发育的影响。结果表明,40nmo·lL-1的TSA处理核移植胚胎可以显著提高其体外囊胚发育率;40nmo·lL-1TSA处理重构胚12和24h,两组重构胚的卵裂率与囊胚发育率差异不显著;40nmo·lL-1TSA处理12h对不同供核细胞构建的重构胚均具有提高囊胚发育率的效果,不同供核细胞所构建的重构胚发育率无显著差异。由此可知,40nmo·lL-1TSA处理12或24h可以提高猪体细胞核移植胚胎体外发育能力。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A 体细胞核移植 体外发育
下载PDF
猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究 被引量:3
17
作者 王振坤 田江天 +6 位作者 李秋明 武美玲 孔庆然 郑重 于学武 雷蕾 刘忠华 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期275-282,共8页
不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖... 不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同。本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化,对猪骨髓间充质干细胞的增殖及生长特性进行了观察分析,并以其作为供体细胞进行核移植,对此类型细胞进行重编程的潜力进行了评估。结果表明用密度梯度离心法分离猪骨髓间充质干细胞优于全骨髓贴壁法;猪骨髓间充质干细胞数目在培养第6天达到峰值,传代培养10h时,贴壁率达到78.50%;传代培养后第4天分裂指数最高,为24.00‰;以猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)和猪胎儿成纤维细胞(PF)分别作为供核细胞构建核移植胚胎,其体外囊胚发育率分别为14.63%与15.07%(P>0.05),孤雌对照组囊胚发育率为30.91%(P<0.05);而三组囊胚细胞数分别为30.67±17.7、24.1±6.5和25.8±11.4(P>0.05)。实验表明,体外培养的猪骨髓间充质干细胞生长增殖旺盛,生物学性状稳定,并适合作为核移植供体细胞。 展开更多
关键词 猪骨髓间充质干细胞 生长特性 核移植
下载PDF
Highly efficient generation of GGTA1 knockout pigs using a combination of TALEN m RNA and magnetic beads with somatic cell nuclear transfer 被引量:7
18
作者 FENG Chong LI Xi-rui +5 位作者 CUI Hui-ting LONG Chuan LIU Xia TIAN Xing-hua PAN Deng-ke LUO Yu-zhu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第7期1540-1549,共10页
The transcription activator-like effector nuclease (TALEN) technique combined with the somatic cel nuclear transfer (SCNT) method has been successfuly applied for creating geneticaly modiifed pigs. However, method... The transcription activator-like effector nuclease (TALEN) technique combined with the somatic cel nuclear transfer (SCNT) method has been successfuly applied for creating geneticaly modiifed pigs. However, methods for isolating cels with bialelic indels requires further improvement because of the relatively low enrichment efifciency of mutated somatic cels. Moreover, little is known regarding the off-target effects of the TALEN system and the heredity of TALEN-modiifed pigs. In this study, an efifcient method to increase the enrichment efifciency of TALEN-mediated bialelic knockout (KO) cels was established, and corresponding geneticaly modiifed pigs with the expected genotype were generated whose off-target effect, fertility and heredity characteristics were aslo evaluated. Two TALEN pairs were constructed to target the porcine α-1,3-galactosyltransferase (GGTA1) gene locus. TALEN mRNA was transfected into the ear ifbroblasts folowed by the enrichment of α-Gal nul cels of minipigs using isolectin B4 (IB4) lectin and magnetic beads. A total of 115 cel colonies were formed and validated to beGGTA1 KO cels by sequencing and 10 bialelic KO cel colonies were used as nuclear donors for SCNT. ThirtyGGTA1 bialelic KO piglets were successfuly delivered and grew normaly. Seventeen potential off-target sites were investigated, and no off-target events were detected in the live piglets. To determine the fertility and heredity characteristics of TALEN-modiifed pigs, 10 mature founders were mated with each other and the mutations were determined to be transmitted to the F1 piglets. We established a robust and safe technology for developing geneticaly modiifed pig lines with expected genotypes for agricultural breeding and biomedical application. 展开更多
关键词 transcription activator-like effector nuclease (TALEN) magnetic beads somatic cel nuclear transfer scnt off-target geneticaly modiifed pigs
下载PDF
卵母细胞和供核体细胞质量对牛体细胞核移植效率的影响 被引量:1
19
作者 江胜芳 张昌军 +2 位作者 姜雪强 罗清炳 董毅飞 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-31,共4页
将未成熟牛卵母细胞进行体外成熟培养,挤压法去除卵母细胞核,以牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞核移植研究,观察形成囊胚组与未形成囊胚组平均每卵巢获卵数、卵母细胞体外成熟率、供核体细胞细胞传代次数、饥饿天数的差异。结果表... 将未成熟牛卵母细胞进行体外成熟培养,挤压法去除卵母细胞核,以牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞核移植研究,观察形成囊胚组与未形成囊胚组平均每卵巢获卵数、卵母细胞体外成熟率、供核体细胞细胞传代次数、饥饿天数的差异。结果表明:形成囊胚组平均每卵巢获卵数(4.90枚)和体外成熟率(63.9%)均显著高于未形成囊胚组(分别为4.05枚、48.4%)。形成囊胚组供核体细胞代数(4.7代)和血清饥饿天数(4.7d)与未形成囊胚组(分别为6.1代、4.4d)无显著差异。卵巢质量和卵母细胞质量是决定能否形成克隆囊胚的重要影响因素,在供体细胞传代3~8代、饥饿1~9d的范围内,供体细胞传代次数和血清饥饿处理时间对克隆效率无显著影响。 展开更多
关键词 体细胞核移植 卵母细胞 供核体细胞
下载PDF
LINC24065在体细胞核移植牛中的异常表达 被引量:1
20
作者 张萃 陈玮娜 +4 位作者 李俊良 谷书凯 徐达 李冬杰 李世杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期44-51,共8页
旨在揭示DLK1-DIO3印记域上一个新的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)LINC24065在自然繁殖牛(natural reproduction,NR)与体细胞核移植牛(somatic cell nuclear transfer,SCNT)中的组织表达与印记状态,对进一步了解DLK1-DIO3... 旨在揭示DLK1-DIO3印记域上一个新的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)LINC24065在自然繁殖牛(natural reproduction,NR)与体细胞核移植牛(somatic cell nuclear transfer,SCNT)中的组织表达与印记状态,对进一步了解DLK1-DIO3印记域在供体核重编程中的作用提供一定的理论基础。本研究以自然繁殖牛的大脑组织为试验材料,利用RACE和RT-PCR技术,在牛的DLK1-DIO3印记域内鉴定了一个新的印记的lncRNA基因,命名为LINC24065。用基于SNP(single nucleotide polymopisms)的RT-PCR产物直接测序方法分析LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛组织中的表达及印记状态。序列分析发现,LINC24065编码6个可变剪接体,并在自然繁殖牛被检测的7个组织中都表达,而在体细胞核移植牛组织中没有检测到可变剪接体LINC24065-V3,且其它5个剪接体呈现组织特异性表达。印记状态分析发现,LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛的7个组织中均为单等位基因表达,但在体细胞核移植牛的大脑组织中出现了与其他组织亲本来源不同的单等位基因表达。研究结果说明,LINC24065基因在体细胞核移植牛的大脑中出现了印记紊乱,并且剪接体在组织中的表达也发生了改变。以上研究结果说明LINC24065基因与体细胞核移植牛的发育异常有关。 展开更多
关键词 DLK1-DIO3印记域 表观重编程 体细胞核移植 长非编码RNA
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部