新生SD大鼠细菌性脑膜炎动物模型的建立

目的建立新生SD大鼠细菌性脑膜炎(BM)动物模型。方法11日龄新生SD大鼠分为实验组(n=30)、正常对照组(n=10)和生理盐水对照组(n=10)。实验组经小脑延髓池分别接种不同浓度B组链球菌Ⅲ(GBSⅢ)10μL,生理盐水对照组用生理盐水替代GBSⅢ,正常对照组不作处理。观察发绀、呼吸困难等临床症状及最早出现的症状和时间点。采用Loeffler的评分方法作行为评分。根据Racine的抽搐分级标准进行抽搐评价。脑脊液(CSF)作WBC计数、细菌培养,作心血细菌培养。观察脑组织病理学改变,作细胞凋亡检测。结果实验组出现所观察的全部临床症状,最早于感染后6h出现发绀;神经行为学评分低于对照组(P<0.01);多数出现抽搐(21/30),其分级均在Ⅳ级以上;CSF的WBC计数高于对照组(P<0.05);CSF和心血培养出的细菌与接种细菌相同;神经细胞出现坏死和凋亡,凋亡指数为15.92±5.36%。对照组均无临床症状,细菌培养阴性,脑组织病理学检查正常。结论11日龄SD新生大鼠经小脑延髓池接种GBSⅢ,可成功地制作BM动物模型。

新生SD大鼠心肌细胞培养方法的简化及改良

目的改良简化心肌细胞培养的条件和方法,培养纯度高、存活时间长的新生SD大鼠的心肌细胞。方法采用含牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的Ⅱ型胶原酶单次消化心肌、差速贴壁1 h纯化心肌细胞进行培养,全过程在37℃条件下进行。于培养5、10、15、20、25、30 d时,用台盼蓝染色法检测细胞的存活率,并在生物倒置显微镜下观察形态学变化。取培养48 h的细胞,用免疫组织化学染色的方法检测心肌细胞的纯度。结果心肌组织在6 h时基本消化完全。培养5、10、15、20、25、30 d时,用台盼蓝染色法检测心肌细胞的存活率均大于95%,培养30 d时仍为95.2%。在生物倒置显微镜下观察,培养24 h左右的细胞之间形成交联并有细胞搏动。培养48h的细胞经免疫组织化学染色法测定,心肌细胞的纯度为(97.1±1.9)%。结论应用改良并简化的心肌细胞培养方法和培养条件,可得到纯度和存活率均高能满足大多数科研要求的原代乳鼠心肌细胞。

博莱霉素制备新生SD大鼠慢性肺部疾病模型

目的探索合适剂量的博莱霉素(BLM)腹腔注射导致新生SD大鼠肺发育不良,肺间质纤维化,建立一种新的慢性肺部疾病(CLD)动物模型。方法 30只2日龄新生SD大鼠随机分为3组,每组10只,分别予BLM 5.0、7.5 mg/(kg.d)及等体积生理盐水连续5 d腹腔注射,分别于第14、30天各处死5只。观察新生大鼠的存活状况,肺组织病理改变、Masson染色和羟脯氨酸(HYP)含量的变化。结果给予5.0 mg/kg BLM后大鼠可存活4周以上,肺组织病理主要为小肺泡数量减少,肺间隔增厚,Masson染色可见肺间隔有较多蓝色胶原沉积,HYP增加等肺发育不良、肺纤维化的表现;7.5 mg/kg BLM注射后大鼠陆续死亡,肺组织病理为肺泡出血,肺结构紊乱;等体积生理盐水注射大鼠存活状况良好,肺组织未见有病理改变。结论新生SD大鼠用BLM 5.0 mg/kg连续5d腹腔注射,可成功制备CLD模型。

新生SD大鼠心室肌细胞改良的培养方法

目的 探讨简单稳定、可靠的新生SD大鼠心室肌细胞原代培养方法,使分离的心室肌细胞存活率和纯度更高.方法 用胰蛋白酶和胶原酶Ⅱ型联合消化,分离新生大鼠心室肌细胞,离心使用低转速（750r·6min-1）,进行体外培养,观察使用培养板贴壁细胞的原位计数方法计算存活率,观察心室肌细胞生存过程当中的形态以及心率变化,并以细胞免疫荧光进行心室肌细胞纯度鉴定,结合共聚焦镜下观察心室肌细胞形态结构.结果 最初分离下来的心室肌细胞为圆形,形状饱满,亮度高,培养第1天,心肌细胞多数贴壁,伸出伪足,少数贴壁的单个细胞开始出现搏动,搏动的频率和节律不齐,培养3 ～4d后可铺满成单层,呈大片同心圆状,开始同步搏动,收缩有力,搏动频率多在40～90次·min-1.培养第5～7天的心室肌细胞搏动频率趋于一致,搏动频率多在80 ～ 100次·min-1.直至第9d后细胞的搏动频率逐渐下降,成纤维细胞逐渐优势生长,搏动细胞的比例也逐渐降低,心室肌细胞形态开始明显改变,培养第20天时,部分细胞停止搏动,形态发生很大的改变,心室肌细胞的胞浆出现空泡,原先出现的伪足的地方变细,开始出现断续的表现,细胞大多脱落;免疫荧光显示培养的心室肌细胞纯度达93％以上;平均存活率达96％.结论 改进的细胞培养技术可获得生长状态良好的心室肌细胞,提高存活率和心室肌细胞纯度.

不同静压力对新生SD大鼠髁突软骨细胞增殖与凋亡的影响

目的:就不同静压力对新生SD大鼠髁突软骨细胞增殖与凋亡的影响进行探讨。方法:加载压力分别为36k Pa、24k Pa、12k Pa、0k Pa,持续静压1h,在加力后立即(0h)收集细胞进行检测,并且开展流式细胞术检测。结果:当加载压力分别为36k Pa、12k Pa时,与0k Pa相比,髁突软骨细胞的各个增殖、凋亡指数都呈现出明显的下降趋势,具有统计学意义(P<0.05)。当加载压力为12k Pa时,细胞凋亡指数减幅最大;当加载压力为36k Pa时,细胞增殖指数减幅最大。结论:不同静压力对新生SD大鼠髁突软骨细胞增殖与凋亡有一定的影响,但并非线性关系,值得深入研究。

新生SD大鼠血常规各项与发育时间的相关性分析及其与血清铁浓度变化的机制

目的:探讨经心脏穿刺和剪尾2种采血方式对新生SD大鼠血常规的影响;建立其血常规正常参考值范围;研究发育过程中血常规各项、血细胞形态和血清铁(SI)的消长变化及其相互关系,揭示SI变化的可能机理。方法:新生鼠出生后1、2、3、7和14 d,经全自动血液分析仪检测心脏血和鼠尾血中红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数和白细胞(WBC)计数的改变;通过瑞氏-姬姆萨染色观察2种血液中血细胞形态的差别,及其在不同发育阶段的变化情况;选择心脏穿刺采血建立血常规正常值参考范围;经血液生化分析仪检测各时点心脏血SI含量变化;统计学分析发育时间、血常规各项及SI含量三者间的动态关系。结果:鼠尾血中RBC计数、HGB含量和WBC计数均高于心脏血,且RBC碎片较多;RBC形态随发育逐渐成熟稳定,其碎片亦明显减少;发育时间与心脏血中RBC和PLT计数呈正相关(P<0.01),与HGB含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、WBC计数和SI含量呈负相关(P<0.01)。SI含量与RBC计数呈负相关(P<0.05),与MCV(P<0.01)和MCH(P<0.05)则呈显著正相关。结论:经心脏采血能建立相对完善的正常新生SD大鼠血常规参考值范围;新生鼠血常规各项与发育时间存在显著相关性;发育早期RBC的不稳定性可能是导致SI含量在发育早期较高的原因。

新生SD大鼠心房肌细胞的原代培养及改良

目的:探讨新生SD大鼠心房肌细胞的原代培养及鉴定,并对其中部分步骤进行改良。方法:采用出生1~3 d的SD乳鼠,运用“两步法”提取心房肌细胞,利用心房肌细胞与成纤维细胞贴壁时间不同和Brd U能抑制成纤维细胞繁殖进行心房肌细胞纯化,并运用双色免疫荧光进行鉴定。结果:36 h后镜下可见细胞已经贴壁,并可见少数细胞出现自发搏动,72 h后细胞铺满瓶底90%,经双色免疫荧光鉴定超过95%为心房肌细胞。结论:“两步法”可缩短胰酶消化时间,Ⅱ型胶原酶+BSA联合消化可以更有效地培养出原代心房肌细胞。

新生SD大鼠海马神经元氧-糖剥夺再灌注模型的构建

体外培养新生SD大鼠海马神经元并构建氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤模型,为临床脑血管疾病中进一步研究缺氧缺血性脑损伤打下基石。L-多聚赖氨酸包被和90%DMEM/F12+10%FBS为海马神经元体外培养的生长基质,取24h内新生SD大鼠海马,加入胰蛋白酶在37℃,5%CO2培养箱中消化15min。

环境噪音对新生大鼠身长体质量及学习记忆的影响

目的研究环境噪音对新生大鼠身长体质量及学习记忆的影响。方法选用7 d SD大鼠16只,分为高噪音组和对照组,每组8只,高噪音组的平均噪音为90 db(A)、对照组50 db(A)。分别在P10、P15、P20时进行身长、体质量的测量,P20时利用Morris水迷宫观察学习记忆功能、ELISA检测生长激素,RT-PCR、Western blot观察突触素表达。结果高噪音组身长、体质量低于同年龄对照组大鼠[身长(cm):P10(9.54±0.1)vs(9.98±0.1),P15(10.24±0.1)vs(10.79±0.1),P20(10.59±0.1)vs(11.68±0.1);体质量(g):P10(14.33±0.02)vs(14.51±0.02),P15(15.31±0.02)vs(15.68±0.02),P20(16.63±0.02)vs(16.76±0.02),P<0.05];与对照组比较,高噪音组学习能力下降,生长激素、突触素(synaptophysin,SYP)mRNA、SYP表达水平低于同年龄对照组大鼠[生长激素(pg/ml):(299.7±4.9)vs(504.9±13.14),SYP mRNA:(0.182±0.008)vs(1.056±0.011),SYP:(0.168±0.007)vs(0.432±0.025),P<0.05]。结论高噪音环境下新生SD大鼠的身长、体质量增长缓慢,学习记忆能力下降。

神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响

目的研究神经干细胞(NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后感觉运动障碍的作用。方法7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组,HIBD组和脑内移植组,后两组HIBD损伤后3d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的NSCs或培养基作为对照,观察植入4周后大鼠感觉运动功能的变化和移植细胞在脑内的存活和分化情况。结果与HIBD组比较,移植组在T迷宫和四项感觉运动功能测试中,表现出明显的改善。在T迷宫中,自发改变率[(69.23±13.34)%vs(45.00±27.27)%](P<0.05)上升;在握持牵引试验中,握持时间明显延长[(49.15±13.39)svs(27.20±15.18)s](P<0.05);在肢体放置和足错误试验中的不对称性消失,姿势反射也明显改善(P<0.05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周,在脑内可见存活的NSCs分布于移植点附近;BrdU和NF-200免疫荧光双标显示移植后4周NSCs可部分分化为神经元表达NF-200。结论脑内移植NSCs对HIBD新生大鼠的感觉运动机能和行为的恢复有良好的促进作用。

重复应用TGF-β1对缺氧缺血性新生大鼠的影响

目的 探讨重复应用转化生长因子（TGF）-β1对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的影响.方法 95只不分性别的7日龄新生SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、处理组（生理盐水干预组及TGF-β1干预组）,模型成功后2h、10d,处理组腹腔注入10ng的生理盐水或TGF-β1,原位末端标记法和SP免疫组织化学方法,观察10d和40d后脑组织海马CA1区锥体细胞凋亡情况和Caspase-3表达.结果 建模后10d,与正常对照组和假手术组相比,TGF-β1治疗组海马CA1区锥体细胞凋亡存在（t=9.35,P〈0.05）,Caspase-3表达可见（t=7.43,P〈0.05）;与模型组和盐水干预组比较,细胞因子TGF-β1治疗组海马CA1区锥体细胞凋亡明显减少（t=5.63,P〈0.05）,Caspase-3表达减轻（t=4.55,P〈0.05）.建立模型后40d,与正常对照组和假手术组相比,模型组海马CA1区锥体细胞凋亡存在（t=7.25,P〈0.05）,Caspase-3表达可见（t=8.17,P〈0.05）,TGF-β1治疗组海马CA1区锥体细胞凋亡仍存在（t=6.07,P〈0.05）,Caspase-3表达可见（t=3.98,P〈0.05）.结论 新生大鼠脑缺氧缺血后应用TGF-β1具有明显的保护作用;单剂量应用TGF-β1可以保护神经元,重复应用TGF-β1未使保护神经元的作用得到延长;TGF-β1的作用可能是通过减少凋亡相关蛋白Caspase-3的表达起到作用的;该实验为细胞因子TGF-β1用于临床治疗缺氧缺血性脑损害提供了一些理论依据,并为TGF-β1治疗脑损伤机制的探讨提供了一定思路.

罗格列酮通过降低IL-17减轻LPS诱导的新生大鼠急性肺损伤

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对脂多糖(lipopolysaccharide LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤气道炎症的影响及其机制。方法清洁级SD新生大鼠随机分为对照组、LPS组及罗格列酮干预组。LPS组鼻腔中滴入LPS的剂量为4 mg/kg,对照组给予等量生理盐水,罗格列酮干预组鼻腔中滴入LPS(剂量同前)1 h后腹腔内注射罗格列酮(2 mg/kg);对照组和LPS组鼻腔滴入等量LPS或生理盐水1 h后腹腔注射等量生理盐水。各组新生鼠分别于6、12、24 h被处死,然后评估肺组织的病理评分、湿/干质量比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中多形核白细胞(PMN)计数,并检测BALF中的IL-17水平。结果与对照组相比,不同时间点LPS组的肺组织炎症病理评分、W/D、BALF中的PMN值及IL-17水平均升高(P<0.05),而罗格列酮干预组肺组织炎症病理评分、W/D、BALF中的PMN值及IL-17水平在不同时间点均较LPS组降低(P<0.05)。结论罗格列酮可显著减轻LPS诱导的新生鼠肺部炎症,其机制可能与其抑制IL-17分泌相关。

TGF—β1对新生缺氧缺血性脑损伤大鼠的影响

目的探讨TGF-β1对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型的保护作用。方法95只新生不分性别的7日龄SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、干预组（盐水组及治疗组），模型建立成功后2小时，干预组大鼠腹腔注入10ng的盐水或TGF-β1，用免疫组织化学方法观察建立模型后2小时及给药后24小时脑组织海马CA1区锥体细胞凋亡的情况和Caspase-3表达的变化。结果建模后2小时模型组与正常对照组和假手术组比较，脑海马CA1区锥体细胞凋亡明显增加（U1=11．58、U2=11．50．均P〈0．01），Caspase-3表达增强（U1=3．49、U2=5．31，均P〈0．01）；给药后24小时模型纽与正常对照组和假手术组比较，脑海马CA1区锥体细胞凋亡明显增强（U1=14．56、U2=14．65，均P〈0．01），Caspase-3表达增强（U1=4．95、U2=5．91，均P〈0．01）；治疗组与模型组和盐水干预组比较，脑海马CA1区锥体细胞凋亡明显减轻（U1=11．39、U2=9．19，均P〈0．01），Caspase-3表达减少（U1=3．34、U2=2．83，均P〈0．01）。结论脑缺氧缺血后应用TGF-β1具有明显的保护作用，TGF-β1可显著减少新生大鼠脑缺氧缺血后海马CA1区锥体细胞的凋亡，TGF-β1保护神经元、减轻凋亡可能是通过减少凋亡相关蛋白Caspase-3的表达起作用的。

新生大鼠心肌细胞体外原代培养及鉴定

目的探讨一种较为理想的体外原代心肌细胞培养的方法。方法取新生SD大鼠心脏心尖部，冷胰蛋白酶和II型胶原酶．BSA消化分离单细胞，二次差速贴壁法纯化心肌细胞，倒置相差显微镜和流式细胞仪检测细胞存活率、活力及纯度。结果获得的心肌细胞存活率为90％，纯度达94％以上，自发搏动明显，频率为80—120次／min，且培养前15d细胞搏动频率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本方法可获得较高存活率及纯度的心肌细胞，可满足实验要求。

用于SD大鼠神经祖细胞增殖分化研究的体外培养法的建立

目的建立一种用于SD大鼠神经祖细胞(NPC)增殖分化研究的体外培养法,为深入研究其增殖分化奠定基础。方法机械法分离和传代新生SD大鼠海马组织NPC,应用特定培养基进行体外培养,BrdU标记后应用免疫荧光法观察鉴定NPC和分化后神经细胞。对机械法离解后的活细胞率差异进行比较。结果培养的NPCs可以在体外进行培养扩增,体外传代至第9代末仍可见Nestin抗体阳性的神经球形成,并且有分化为3种神经终末细胞的潜能。每次机械法分离后的NPC活细胞率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立的SD大鼠NPC体外培养法更利于增殖分化的研究。

哺乳期阻断JAK2/STAT3信号通路对新生鼠青年期、成年期的影响

目的:观察哺乳期阻断JAK2/STAT3信号通路对新生SD大鼠青、成年期的影响。方法:通过限制妊娠期饮食建立小于胎龄鼠(SGA)新生鼠模型;在哺乳期予新生鼠皮下注射AZD1480,观察新生鼠在青、成年期体质量、鼻尾长、腹围、体重指数(BMI)值的变化。结果:正常出生体重鼠(AGA)新生雌鼠在各个日龄检测时间点皮下注射AZD1480各项指标均小于对照组,SGA雌鼠在出生后30 d体质量及BMI大于对照组(P<0.05)。AGA雄鼠在出生后90 d日龄BMI值大于对照组(P<0.05),SGA雄鼠在出生后90 d体质量、腹围及BMI值大于对照组(P<0.05)。结论:阻断JAK2/STAT3通路,SGA雌鼠在青年期BMI值增高,SGA及AGA雄鼠在成年期BMI值增高,AGA雌鼠在观察日龄无BMI值增高。脂质代谢存在其他作用通路。

高氧致新生鼠肺PECAM-1 mRNA及蛋白质表达动态改变的研究

目的研究高浓度氧持续吸入后新生鼠肺部组织PECAM-1mRNA及蛋白质的表达规律,探讨高氧对发育中鼠肺微血管发育的影响。方法新生SD大鼠生后12h内放入氧箱,持续吸入高氧制作高氧CLD模型,采用RT-PCR和免疫组织化学技术测定实验组和对照组在生后1d、4d、7d、14d、21d肺组织内PECAM-1mRNA及蛋白质表达并半定量。结果新生鼠肺部PECAM-1mRNA及蛋白质表达随生后日龄增长而增加,高氧持续吸入后PECAM-1表达减少。结论高氧导致肺组织PECAM-1mRNA和蛋白质表达减少,提示肺微血管生成减少,肺微循环发育异常。推测,高氧可能直接损伤内皮细胞干扰肺血管发育过程,进而影响肺泡分化导致CLD的病理改变。

大鼠胰腺间质细胞体外培养过程及其形态学特征

目的:对胰腺间质细胞进行原代及传代培养,观察其形态学的变化。以探索一种简单稳定的获取及培养胰腺间质细胞的方法。方法:用机械剪切加胰蛋白酶消化的方法制备SD大鼠胰腺单细胞悬液,取新生SD大鼠1只麻醉断髓处死,体积分数0.75的乙醇浸泡消毒,无菌条件下取出胰腺组织,去除红细胞,剪切,加入胰蛋白酶消化,消化终止后细胞筛过滤,收集滤过的细胞悬液离心,弃上清液,重复1次。收集获得的单个胰腺间质细胞。接种于含体积分数0.1的胎牛血清、0.05g/L的亚胺培南的DMEM/F-12(1∶1)培养基,培养48h后换液,弃上清及悬浮细胞,继续培养48h后,换用含1×10-5mol/L阿糖胞苷的完全培养基培养24h,再换正常培养基继续培养,在培养细胞达到80%～90%的细胞汇合时,按1∶3进行传代培养。测定细胞生长曲线及贴壁率,原代细胞及传代细胞用双硫腙染色,鉴定有无胰腺β细胞。结果:①原代细胞及传代细胞形态学观察:原代培养换液前,显微镜下可见细胞大小不等,悬浮,有较多细胞碎片。48h首次全量换液后,悬浮细胞减少,经3次换液可基本去除。加用阿糖胞苷培养24h,大量细胞相继死亡。至第10-14天,培养细胞明显增加,基本铺满瓶底,以星形、梭形为主,细胞呈放射状或漩涡状生长,部分区域呈灶状。传至第5代细胞出现老化。②细胞生长曲线:细胞从传代后第2天,数量即开始增加,第4天增加幅度最大,至第6天细胞数量最大,以后数量略有下降。传代培养对数增殖期为2-4d,对数增殖期结束后,第6天细胞生长缓慢,进入平台期。③细胞的贴壁率:传代细胞培养2h已有部分细胞贴壁;培养4h贴壁细胞接近50%;培养10h贴壁达79%;培养12h细胞全部贴壁,而且部分细胞开始分裂增殖,细胞形态与原代细胞基本相似。④胰腺β细胞的化学鉴定:对胰腺组织分离所得单个细胞、原代培养细胞及传代培养细胞分别用双硫腙染色。培养前细胞染色,可见少量腥红色细胞,随着培养时间延长腥红色细胞逐渐减少,在原代培养10～14d,腥红色细胞消失,传代培养细胞染色未见腥红色细胞。结论:细胞培养12h全部贴壁,传代培养对数增殖期为2-4d,第6天细胞进入平台期。原代培养胰腺间质细胞形态多样,主要呈梭形,少数呈三角形或星形,贴壁爬行生长,第1周增殖较慢,随后增殖加速,细胞团块多见,偶可见大的圆形细胞生长,核大,胞浆内颗粒多。传代培养,细胞能迅速贴壁生长,细胞形态逐渐均一,主要为梭形、三角形细胞,呈集落样生长,双硫腙染色阴性;但细胞培养至第5代,胞浆颗粒增多,细胞增殖减慢,大部分细胞逐渐老化死亡。

阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响

目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液。培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养。采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P<0．05)。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml／L时最强,与雌激素组比较无显著性差异(P>0 05),且明显高于对照组(P<0．05)。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml／L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P<0 05),且明显低于对照组(P<0．05)。结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节 OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。

大鼠脑室下区神经干细胞的分离培养与分化

目的从新生SD大鼠脑室下区分离并培养神经干细胞,观察其生长、增殖及分化。方法采取无血清培养和单细胞克隆技术,采用原代贴壁及传代悬浮方法,培养获得细胞克隆。利用免疫细胞化学方法鉴定神经干细胞。结果从新生SD大鼠脑室下区分离的组织,经原代和传代培养均可形成细胞克隆,且具有增殖能力。原代和传代细胞巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗原呈阳性。神经干细胞可分化为神经元。结论用上述方法分离的细胞具有自我更新能力和分化潜能以及很强的增殖能力,属于中枢神经系统的干细胞。