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Caspase-3在D-半乳糖致衰老SD大鼠海马的表达 被引量:4
1
作者 胡艳丽 李守民 +3 位作者 傅希玥 李明 孙俊 陆地 《昆明医学院学报》 2009年第6期9-13,共5页
目的了解Caspase-3在D-半乳糖致衰老SD大鼠脑海马的表达情况.方法将健康成年雄性SD大鼠40只随机分为两组,分别为对照组和衰老组,每组各20只.以Morris水迷宫实验评估动物的学习记忆功能,应用免疫组织化学染色法检测Caspase-3在两组大鼠... 目的了解Caspase-3在D-半乳糖致衰老SD大鼠脑海马的表达情况.方法将健康成年雄性SD大鼠40只随机分为两组,分别为对照组和衰老组,每组各20只.以Morris水迷宫实验评估动物的学习记忆功能,应用免疫组织化学染色法检测Caspase-3在两组大鼠脑海马中的表达水平.结果衰老组大鼠的逃避潜伏期较对照组明显延长,在第Ⅲ象限逗留的时间和跨越平台次数较对照组明显减少.Caspase-3的免疫阳性反应物的表达在衰老组较对照组明显增多.结论D-半乳糖可通过活化Caspase-3,促进海马神经元的凋亡,引发大鼠学习记忆功能减退. 展开更多
关键词 D-半乳糖 sd大鼠 衰老 海马 CASPASE-3
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SD-3系列测氡仪检查源在FD-125测氡仪坪曲线测试工作中的实验研究
2
作者 张光顺 起卫罗 +3 位作者 李朝明 李艳池 龙艳 应骁睿 《四川地震》 2017年第4期39-42,共4页
在FD-125测氡仪检查工作中,需使用α检查源或固体氡气源测试高压-坪曲线来确定及检查最佳工作高压。由于厂家提供α检查源测试高压-计数率坪曲线坪区不明显、氡源故障,造成在FD-125测氡仪检查工作中难以对工作高压进行检查的问题。考虑... 在FD-125测氡仪检查工作中,需使用α检查源或固体氡气源测试高压-坪曲线来确定及检查最佳工作高压。由于厂家提供α检查源测试高压-计数率坪曲线坪区不明显、氡源故障,造成在FD-125测氡仪检查工作中难以对工作高压进行检查的问题。考虑到SD-3系列测氡仪其工作原理与FD-125测氡仪基本一致,SD-3系列测氡仪故障后所配置α检查源仍然可用,因此,将SD-3测氡仪检查源用于FD-125测氡仪的检查工作,经测试效果较好。 展开更多
关键词 sd.3 FD.125 测氡仪 检查源 坪曲线
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复方中药制剂对SD大鼠胸腺组织结构及Caspase-3蛋白分布的影响 被引量:2
3
作者 周金星 钱兆全 +2 位作者 靳二辉 刘文举 金光明 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期722-729,共8页
为研究由炒白术、山楂、黄芪、板蓝根、茯苓、陈皮、甘草、山药制成的复方中药制剂对SD大鼠胸腺组织结构及其Caspase-3蛋白分布的影响。选择60只SPF级断奶SD大鼠,随机分为对照组、1.5 m L·kg^(-1)组、3.0 m L·kg^(-1)组和6.0 ... 为研究由炒白术、山楂、黄芪、板蓝根、茯苓、陈皮、甘草、山药制成的复方中药制剂对SD大鼠胸腺组织结构及其Caspase-3蛋白分布的影响。选择60只SPF级断奶SD大鼠,随机分为对照组、1.5 m L·kg^(-1)组、3.0 m L·kg^(-1)组和6.0 m L·kg^(-1)组,每组15只,预饲1周后按每千克体质量分别定时灌胃3.0 m L蒸馏水、1.5m L、3.0 m L和6.0 m L药液(每m L含1 g生药)。至90 d,各处理组SD大鼠禁食禁水3 h,称量、麻醉、处死后取完整的胸腺称量,立即投入4%的多聚甲醛磷酸缓冲液固定72 h,制作石蜡组织切片,经HE、网状纤维和Caspase-3免疫组化染色,显微观察,Image-pro PLUS 6.0软件分析并摄影。结果表明,按每kg体质量灌胃本复方中药制剂3.0 m L可显著增加胸腺皮质区且胸腺的生长指数显著高于对照组(P<0.05)。网状纤维主要分布于SD大鼠胸腺髓质部,3.0 m L·kg^(-1)剂量组网状纤维含量较对照组显著减少。各实验组均不同程度抑制Caspase-3蛋白的出现,其中以3.0 m L·kg^(-1)剂量组最为显著。说明灌胃3.0 m L·kg^(-1)复方中药制剂可改善SD大鼠胸腺组织结构,延缓其结构和功能退化。 展开更多
关键词 胸腺 组织结构 CASPASE-3蛋白 复方中药制剂 sd大鼠
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SDS对Na_2SeO_3-GSH-溶解O_2体系的作用研究
4
作者 付春莲 杨祥良 +1 位作者 周井炎 徐辉碧 《广东微量元素科学》 CAS 2001年第3期22-24,共3页
围绕GSH Px和Na2 SeO3在清除或催化产生ROS过程中可能共同存在的机理 ,以Na2 SeO3 GSH 溶解O2 体系为主要研究对象 ,引入表面活性剂SDS模拟GSH Px的笼效应 ,考察其对Na2 SeO3体系的影响。结果表明 ,表面活性剂可抑制该体系中O÷2 ... 围绕GSH Px和Na2 SeO3在清除或催化产生ROS过程中可能共同存在的机理 ,以Na2 SeO3 GSH 溶解O2 体系为主要研究对象 ,引入表面活性剂SDS模拟GSH Px的笼效应 ,考察其对Na2 SeO3体系的影响。结果表明 ,表面活性剂可抑制该体系中O÷2 的产生 ,并且具有稳定反应中间体GSSeSG的作用 ,证明了笼效应在GSH Px及Na2 SeO3与GSH反应体系中的重要作用。 展开更多
关键词 Na2SeO3 表面活性剂 sdS 硒酸钠-GSH溶解O2体系 硒酶
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Z型异质结Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS光催化降解抗生素的研究 被引量:1
5
作者 杨馨 李欣昊 王宏归 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期92-97,共6页
通过超声的方法将十二烷基硫酸钠(SDS)修饰至Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)表面,得到Z型异质结Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS光催化剂,考察了Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS光催化降解四环素(TC)的降解率。结果表明,在光照2 h后,Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS对T... 通过超声的方法将十二烷基硫酸钠(SDS)修饰至Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)表面,得到Z型异质结Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS光催化剂,考察了Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS光催化降解四环素(TC)的降解率。结果表明,在光照2 h后,Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS对TC的去除率达到89.7%,远高于Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)(57.6%)、MoS_(2)(43.4%)、Fe_(3)O_(4)(26.7%);Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS对TC的光降解过程符合一级动力学。在TC的光降解过程中h^(+)、·O_(2)^(-)、·OH活性自由基均发挥了作用,且h^(+)、·O_(2)^(-)在降解TC时起主要作用。Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@SDS属于Z型异质结,该结构有效加速了光生电子和h^(+)的转移和分离效率。 展开更多
关键词 Fe_(3)O_(4)@MoS_(2)@sdS Z型异质结 四环素(TC) 光催化
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Determination of Trace Amounts of Zinc, Iron and Copper by Flame Atomic Absorption after Their Preconcentration Using Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) Coated Alumina Nanoparticles Modified with 3-Mercapto-D-Valin from Environmental Samples 被引量:3
6
作者 Mohammad Reza Baezzat Hojjat Maleki +1 位作者 Ehsan Moghadamhosseyni Mahboobeh Tabandeh 《American Journal of Analytical Chemistry》 2014年第17期1228-1238,共11页
A sensitive and simple solid phase extraction method for the simultaneous determination of trace and toxic metals in environmental samples has been reported. The method is based on the adsorption of Zinc, Iron and Cop... A sensitive and simple solid phase extraction method for the simultaneous determination of trace and toxic metals in environmental samples has been reported. The method is based on the adsorption of Zinc, Iron and Copper on SDS-coated alumina nanoparticles, which is also modified with 3-mercapto-D-valine. The retained analyte ions on modified solid phase were eluted using 5 mL of 4 mol·L﹣1 HNO3. The analyte determination was carried out by flame atomic absorption spectrometry. The influences of some metal ion and anions on the recoveries of understudy analyte ion were investigated. The influences of the analytical parameters including pH, ligand and SDS amount, eluting solution (type and concentrations) and sample volume on metal ions recoveries were investigated. The extraction efficiency was > 98% with relative standard deviation lower than 3% the method has been successfully applied for the extraction and determination of these ions content in some real samples. Prepared adsorbent was characterized by SEM and FT-IR measurements. 展开更多
关键词 Sodium Dodecyl SULFATE (sdS) COATED ALUMINA Nanoparticles 3-Mercapto-D-Valin FLAME Atomic Absorption Solid Phase Extraction
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利用SD对壳模型讨论质子中子耦合系统U(5)■SU(3)相变
7
作者 刘霖 王芙蓉 罗延安 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1-3,共3页
利用SD对壳模型讨论了质子中子耦合系统中U(5)■SU(3)相变的问题.结果发现该模型可以很好地再现相互作用玻色子模型中U(5)■SU(3)相变.这一结果说明了SD对近似的合理性,同时也证明了相互作用玻色子模型具有很好的壳模型基础.
关键词 sd对壳模型 相变 U(5)极限 SU(3)极限
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SD—Ⅲ三眠素诱导家蚕三眠化的效果及对茧丝质量的影响 被引量:12
8
作者 谭智达 孔令汶 +3 位作者 范慧莲 巩晓霞 韩毓鼎 晏日安 《蚕业科学》 CAS CSCD 1992年第4期237-242,共6页
SD—Ⅲ三眠素具有极强的抗保幼激素和抗蜕皮激素生理活性。应用SD—Ⅲ300ppm浓度的药液喷体,适宜时期在三龄饷食后1天,三眠诱导率可在95%以上,蚕儿发育齐整,虫蛹生命力,50公斤桑产茧、茧层较四眠蚕均有不同程度的提高,茧丝纤度细、综... SD—Ⅲ三眠素具有极强的抗保幼激素和抗蜕皮激素生理活性。应用SD—Ⅲ300ppm浓度的药液喷体,适宜时期在三龄饷食后1天,三眠诱导率可在95%以上,蚕儿发育齐整,虫蛹生命力,50公斤桑产茧、茧层较四眠蚕均有不同程度的提高,茧丝纤度细、综合均方差小,原料茧性状好,宜缫制高品位细纤度生丝。 展开更多
关键词 sd-Ⅲ三眠素 家蚕 三眠蚕 诱导
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冬凌草甲素通过线粒体途径诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡 被引量:5
9
作者 丁笑笑 罗文达 +2 位作者 张佳 洪叶 冯长伟 《医学研究杂志》 2013年第3期111-114,共4页
目的研究冬凌草甲素诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的凋亡作用及其机制。方法 MTS法检测冬凌草甲素对GBC-SD细胞的生长抑制作用;瑞氏染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、caspase-3活性变化;Western blot... 目的研究冬凌草甲素诱导人胆囊癌GBC-SD细胞的凋亡作用及其机制。方法 MTS法检测冬凌草甲素对GBC-SD细胞的生长抑制作用;瑞氏染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、caspase-3活性变化;Western blot检测caspase-9活化情况。结果冬凌草甲素能显著抑制GBC-SD细胞增殖,呈时间剂量依赖性(P<0.05)。细胞形态学观察可见冬凌草甲素可诱导细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示28μmol/L药物处理GBC-SD细胞24h后,细胞凋亡率为51.28%±2.65%。随着药物浓度增加,GBC-SD细胞线粒体膜电位逐渐下降而caspase-3活性逐渐增强,56μmol/L组caspase-3活性是对照组的11倍。Western blot分析结果显示caspase-9酶原被激活,且活化条带随药物浓度的增加而增强。结论 冬凌草甲素可能通过细胞线粒体膜电位下降激活caspase-3并最终诱导GBC-SD细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 GBC-sd细胞 细胞凋亡 线粒体 CASPASE-3
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黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响 被引量:12
10
作者 张霞 高维娟 +1 位作者 钱涛 刘莎莎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期867-871,共5页
目的观察黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响。方法将132只♂SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪注射液溶剂对照组及黄芪注射液组。采用四血管阻断法建立大鼠脑缺血/再灌注模型[1],于再灌注后0、0.5、2... 目的观察黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响。方法将132只♂SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪注射液溶剂对照组及黄芪注射液组。采用四血管阻断法建立大鼠脑缺血/再灌注模型[1],于再灌注后0、0.5、2、6、24、72和120 h断头取脑。采用免疫组织化学法、Western blot法检测大鼠海马组织Caspase-3蛋白的表达,实时荧光PCR法检测Caspase-3 mR-NA的表达。结果模型组除0和0.5 h外,其余各个时间点Caspase-3蛋白及mRNA表达均较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,黄芪注射液组除0和0.5 h外其余各个时间点Caspase-3蛋白及mRNA表达均减少(P<0.05),而黄芪注射液溶剂对照组则无明显变化(P>0.05)。结论黄芪注射液能抑制大鼠海马神经元Caspase-3的表达,从而抑制海马神经元的凋亡,保护神经元。 展开更多
关键词 脑缺血/再灌注 黄芪注射液 Caspase-3 细胞凋亡 海马神经元 sd大鼠
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尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏抗炎抗氧化保护作用及对TGF-β_1/p38MAPK信号通路影响的研究 被引量:38
11
作者 谭菲 盛瑶环 何勇 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期117-122,共6页
目的探讨尿毒清胶囊对糖尿病肾病大鼠的抗炎、抗氧化作用及对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机分为10只正常组,60只模型组。模型组大鼠腹腔注射45 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)造模,... 目的探讨尿毒清胶囊对糖尿病肾病大鼠的抗炎、抗氧化作用及对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机分为10只正常组,60只模型组。模型组大鼠腹腔注射45 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)造模,取造模成功的60只大鼠随机分为12只模型组,12只厄贝沙坦阳性组,12只尿毒清颗粒低剂量组(0.04 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒中剂量组(0.08 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒高剂量(0.16 mg·kg^(-1)),灌胃给药12周,模型组和空白组给予生理盐水。每周称量体质量,每周检测24 h尿蛋白量。给药治疗12周后,取血检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;麻醉处死大鼠,各取8只对肾组织行HE染色,观察肾组织的病理形态;并取肾组织进行RT-PCR和免疫组化观察TGF-β_1/p38MAPK信号转导等转化因子的mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著增高(P<0.05),NO、SOD含量显著降低(P<0.01),肾组织胞浆中TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);通过治疗后,与模型组对比,尿毒清颗粒高剂量组和阳性组肾脏病理损害明显减轻,尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著降低(P<0.05),NO、SOD含量明显增高(P<0.05),肾组织内TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 m RNA及蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论尿毒清颗粒能降低24 h尿蛋白量,降低TG和MDA含量及升高NO、SOD含量,通过调控TGF-β_1/p38MAPK从而治疗糖尿病肾病的肾组织受损部位,改善肾功能和减轻病理损伤,能有效地保护糖尿病肾病组织。 展开更多
关键词 尿毒清颗粒 糖尿病肾病 转化生长因子β1 P38MAPK Caspase-3 信号通路 sd大鼠
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茶多酚诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞凋亡的机制 被引量:4
12
作者 连超群 夏俊 +1 位作者 高琴 张静 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期2077-2080,共4页
目的探讨茶多酚体外诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞凋亡的机制。方法茶多酚作用GBC-SD细胞48 h后,光学显微镜观察细胞形态变化;Hoechst33258/PI双染色,激光扫描共聚焦显微镜观察茶多酚诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞凋亡作用;DCFH-DA为细... 目的探讨茶多酚体外诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞凋亡的机制。方法茶多酚作用GBC-SD细胞48 h后,光学显微镜观察细胞形态变化;Hoechst33258/PI双染色,激光扫描共聚焦显微镜观察茶多酚诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞凋亡作用;DCFH-DA为细胞内活性氧探针,激光扫描共聚焦显微镜检测茶多酚对人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞活性氧(ROS)水平的影响,分光光度法测定茶多酚对人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞内caspase-3活性的影响。结果 50、100、200μg/ml茶多酚作用GBC-SD细胞48 h后,人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞呈现典型的凋亡特征;激光扫描共聚焦显微镜下观察茶多酚作用后GBC-SD细胞ROS明显上升,细胞内caspase-3活性增强(P<0.01)。结论茶多酚能显著诱导人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞发生凋亡作用,其机制可能是ROS过量积聚、激发caspase级联反应,从而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 茶多酚 GBC-sd细胞 活性氧 CASPASE-3
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白酒对大鼠心肌凋亡基因bcl-2、caspas-3表达水平的影响
13
作者 杜峰 毛华 +2 位作者 鲁玉明 周文汀 熊宗华 《贵州医药》 CAS 2013年第1期16-18,共3页
目的观察不同剂量白酒对大鼠凋亡基因bcl-2、Caspas-3表达的影响。方法140只2~3月龄健康SD大鼠随机分成7组:正常对照组及不同剂量白酒灌胃模型A组(0.8mL/kg.d)、B组(1.6mL/kg.d)、C组(2.4mL/kg.d)、D组(3.2mL/kg.d)、E组(4.0mL/kg.d)和... 目的观察不同剂量白酒对大鼠凋亡基因bcl-2、Caspas-3表达的影响。方法140只2~3月龄健康SD大鼠随机分成7组:正常对照组及不同剂量白酒灌胃模型A组(0.8mL/kg.d)、B组(1.6mL/kg.d)、C组(2.4mL/kg.d)、D组(3.2mL/kg.d)、E组(4.0mL/kg.d)和F组(4.8mL/kg.d),每组20只。对照组每日给予10mL/kg.d生理盐水灌胃,其余模型组分别给予53度白酒灌胃,每周灌胃6次,称重一次,连续灌胃16周。16周后处死大鼠取心肌组织进行病理学检查,同时取大鼠心肌组织用TUNEL法检测细胞凋亡相关蛋白bcl-2、caspase-3的表达水平。结果bcl-2、caspase-3在对照组、模型A、B、C组心肌细胞浆中呈低水平表达,差异无统计学意义(P>0.05);模型D、E、F组与对照组比较bcl-2、caspase-3表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);模型D、E、F组与A、B、C组相比bcl-2、caspase-3水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论适量白酒不会引起大鼠凋亡基因bcl-2、Caspas-3表达变化,但过量白酒(大于3.2mL/kg.d)摄入可导致bcl-2、caspase-3表达上调,加速心肌细胞的凋亡和坏死。 展开更多
关键词 白酒 心肌细胞 BCL-2 CASPASE-3 sd大鼠
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槲皮素-3-葡萄糖苷对肾缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用 被引量:2
14
作者 胡清茹 《中医临床研究》 2015年第23期3-5,共3页
目的:观察槲皮素-3-葡萄糖苷对急性肾缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用。方法:采用夹闭大鼠双侧肾动脉45min后再灌注60min的方法,建立大鼠急性肾缺血-再灌注损伤的动物模型。通过测定血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、血清肌酐(Cr)... 目的:观察槲皮素-3-葡萄糖苷对急性肾缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用。方法:采用夹闭大鼠双侧肾动脉45min后再灌注60min的方法,建立大鼠急性肾缺血-再灌注损伤的动物模型。通过测定血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN),和TUNEL法分析肾小管上皮细胞的凋亡情况,探讨槲皮素-3-葡萄糖苷对急性肾缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用及可能机制。结果:槲皮素-3-葡萄糖苷组MDA值显著降低(P<0.05);血清SOD含量升高明显;血清NO含量较模型组明显下降,两组比较有显著性差异(P<0.05)。槲皮素-3-葡萄糖苷组的TUNEL阳性细胞数与模型组相比明显减少(P<0.05)。结论:槲皮素-3-葡萄糖苷可以减轻肾小管细胞的损伤,对肾缺血-再灌注损伤大鼠具有保护作用,其作用机制可能是通过清除氧自由基,抑制脂质过氧化,进而改善肾功能。 展开更多
关键词 肾缺血-再灌注损伤模型 sd大鼠 槲皮素-3-葡萄糖苷
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白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达 被引量:1
15
作者 赵珊梅 袁雪岩 +2 位作者 石建峰 李昂 苗群爱 《北京口腔医学》 CAS 2013年第5期257-260,共4页
目的构建白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)的表达载体并使其在大肠杆菌中正确表达。方法提取基因组总RNA,PCR方法获得GAPDH基因,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-GAPDH,转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生蛋白,用SDS-PAGE和Western ... 目的构建白色念珠菌3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)的表达载体并使其在大肠杆菌中正确表达。方法提取基因组总RNA,PCR方法获得GAPDH基因,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-GAPDH,转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生蛋白,用SDS-PAGE和Western Blotting检测GAPDH蛋白表达情况。结果构建的白色念珠菌GAPDH基因表达质粒经序列测定证实,与GenBank数据完全一致。双酶切鉴定证实,克隆基因正确插入pET-32a(+)载体。在1.0 mmol·L-1的IPTG浓度诱导下表达,可观察到相对分子量51kDa的蛋白,经SDSPAGE和Western Blotting检测证实为GAPDH蛋白。结论实验成功克隆白色念珠菌GAPDH基因,并在大肠杆菌中正确表达,为白色念珠菌感染的候选疫苗奠定工作基础。 展开更多
关键词 白色念珠菌 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 原核表达 sdS-PAGE WESTERN BLOTTING
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人类3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达、纯化和鉴定
16
作者 李毅 万涛 +3 位作者 杨琴 蔡雪飞 张文露 汤华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期102-105,共4页
为了研究3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)化生物学功能,以pcDNA3.1-GAPDH质粒为模板,PCR方法扩增GAPDH基因,经BamHI和SalI双酶切后插入相同酶切的pET32a(+)载体,构建His-GAPDH融合蛋白表达质粒pET32a(+)-GAPDH;转化JM109感受态细胞,并进行阳... 为了研究3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)化生物学功能,以pcDNA3.1-GAPDH质粒为模板,PCR方法扩增GAPDH基因,经BamHI和SalI双酶切后插入相同酶切的pET32a(+)载体,构建His-GAPDH融合蛋白表达质粒pET32a(+)-GAPDH;转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选,扩增目的质粒;转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导产生融合蛋白,亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blotting检测GAPDH蛋白表达情况。结果表明,构建的人GAPDH基因表达载体经序列测定证实,与GenBank数据完全一致;双酶切鉴定证实,克隆基因正确插入pET32a(+)载体;表达质粒pET32a(+)-GAPDH在大肠杆菌BL21中成功地诱导表达了可溶性His-GAPDH融合蛋白,纯化后SDS-PAGE和Western blotting检测证实融合蛋白表达成功。人GAPDH原核表达载体的成功构建,及6His-GAPDH融合蛋白的正确表达,为进一步深入研究GAPDH的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 原核表达 sdS—PAGE 免疫印迹
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基质金属蛋白酶-3在实验性腰椎间盘退变中的表达及其意义
17
作者 李燕 陈德胜 +1 位作者 杨卫东 金群华 《宁夏医学杂志》 CAS 2007年第3期200-202,I0004,共4页
目的检测实验性椎间盘退变中MMP-3的表达,进一步研究椎间盘退变的发病机制。方法建立SD大鼠腰椎间盘退变模型为实验组,正常SD大鼠为对照组,每组各16只,采用免疫组织化学、SDS-PAGE进行检测两组椎间盘组织中MMP-3的表达。结果实验组和对... 目的检测实验性椎间盘退变中MMP-3的表达,进一步研究椎间盘退变的发病机制。方法建立SD大鼠腰椎间盘退变模型为实验组,正常SD大鼠为对照组,每组各16只,采用免疫组织化学、SDS-PAGE进行检测两组椎间盘组织中MMP-3的表达。结果实验组和对照组的椎间盘组织均有MMP-3表达,实验组的MMP-3表达较对照组显著增高(P<0.05)。结论MMP-3在腰椎间盘退变的发生和发展中起着非常重要的作用。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-3 腰椎间盘退变 免疫组织化学 sdS—PAGE
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糖尿病大鼠骨骼肌内脂素和磷脂酰肌醇3激酶的表达
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作者 张晗 张安星 +4 位作者 高琳 阳琰 廖鑫 李明泽 杨孟雪 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第14期1889-1892,共4页
目的观察糖尿病大鼠骨骼肌中内脂素(visfatin)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的表达,探讨visfatin在糖尿病中的作用及可能机制。方法 8周龄雄性SD大鼠55只(造模成功39只),采用随机数字表法分为4组:正常对照组(A组)10只,饮食诱导肥胖组(B组)10... 目的观察糖尿病大鼠骨骼肌中内脂素(visfatin)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的表达,探讨visfatin在糖尿病中的作用及可能机制。方法 8周龄雄性SD大鼠55只(造模成功39只),采用随机数字表法分为4组:正常对照组(A组)10只,饮食诱导肥胖组(B组)10只,血糖未控制糖尿病组(C组)10只,血糖控制糖尿病组(D组)9只。喂养至12周末,测定空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、空腹胰岛素(FINS),计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI);RT-PCR测定骨骼肌组织visfatin、PI3K mRNA表达;Western blot测定骨骼肌组织visfatin、PI3K蛋白表达。结果 C组FBG较A、B组明显增高(P<0.01);D组FBG较C组明显降低(P<0.01)。B组TG较A组明显增高(P<0.05);C组TG、TC、LDL-C、FFA较A、B组明显增高(P<0.01);D组TG、TC、FFA较A组明显增高(P<0.05);D组TG较A、B组明显增高(P<0.05);D组TG、TC、LDL-C、FFA较C组明显降低(P<0.01)。B、C组较A组FINS、HOMA-IR明显增高,ISI明显降低(P<0.01),C组较B组FINS、HOMA-IR明显增高,ISI明显降低(P<0.01)。C、D组visfatin mRNA和蛋白表达较A组均明显增高(P<0.05),C组visfatin蛋白较B组明显增高(P<0.01)。C组PI3K mRNA和蛋白表达较A、B组均明显降低(P<0.01),D组PI3K mRNA和蛋白表达较A组均明显降低(P<0.05)。结论 visfatin在骨骼肌中的表达水平与骨骼肌糖脂代谢状态有关,可能通过PI3K参与骨骼肌糖脂代谢的调节。 展开更多
关键词 1-磷脂酰肌醇3-激酶 糖尿病 肥胖症 骨骼 内脏脂肪素 sd大鼠
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马尾松松针提取物调节JNK3/caspase-3信号转导减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤 被引量:1
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作者 章蕾 王凌峰 +4 位作者 胡培豪 钟晓明 张丹妮 仇凤梅 黄真 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期563-572,共10页
目的:探讨马尾松松针提取物(PNE)对大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、依达拉奉组、PNE小剂量组(200 mg/kg)、PNE中剂量组(400 mg/kg)、PNE大剂量组(800 mg/kg),于造模前连... 目的:探讨马尾松松针提取物(PNE)对大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、依达拉奉组、PNE小剂量组(200 mg/kg)、PNE中剂量组(400 mg/kg)、PNE大剂量组(800 mg/kg),于造模前连续7 d及造模后6 h分别灌胃给药。其中,手术对照组和模型对照组灌胃给予等渗氯化钠溶液,依达拉奉组灌胃给予等渗氯化钠溶液的同时腹腔注射依达拉奉3 mg/kg,PNE各组灌胃给予各剂量PNE。通过大脑中动脉阻塞法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型,于再灌注24 h后测定各组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积。采用苏木素-伊红染色观察大脑皮层及海马组织结构病理变化并统计正常神经细胞数;TUNEL法检测大脑皮层神经细胞凋亡率;试剂盒检测缺血侧脑组织一氧化氮、丙二醛含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白质印迹法检测大脑皮层c-Jun氨基末端激酶(JNK)3、磷酸化JNK3、B淋巴细胞瘤蛋白(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C、胱天蛋白酶(caspase)-3的蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,PNE各剂量组行为学评分、脑组织含水量及脑梗死体积均显著降低(均P<0.05),大脑皮层及海马CA1区组织病理性损伤显著减轻,缺血侧皮层及海马CA1区中正常神经细胞数增加(均P<0.05),以PNE中剂量组效果最好。与模型对照组比较,PNE中剂量组皮层神经细胞凋亡率显著减小,大脑皮层组织中一氧化氮、丙二醛含量显著减少,SOD活性显著升高,磷酸化JNK3/JNK3比值、细胞色素C、caspase-3蛋白表达水平均显著降低,Bcl-2/Bax比值显著升高(均P<0.05)。结论:PNE对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,这种保护作用可能与清除一氧化氮和丙二醛,抑制氧化应激介导的JNK3/caspase-3信号转导来抑制神经细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 马尾松松针提取物 脑缺血再灌注 神经保护作用 氧化应激 JNK3/caspase-3 sd大鼠
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基于MT3、SOD2 mRNA表达调控的醒脑再造胶囊抗脑缺血再灌注损伤作用
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作者 李向阳 姚永琴 +3 位作者 吴光泽 徐庆锋 吴芹 石京山 《遵义医学院学报》 2017年第4期394-397,共4页
目的观察醒脑再造胶囊的抗脑缺血再灌注损伤作用并探讨其作用机制。方法灌胃给药醒脑再造胶囊1周后,建立SD大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,进行大鼠神经功能评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法观察脑组织梗死范围,实时荧光定... 目的观察醒脑再造胶囊的抗脑缺血再灌注损伤作用并探讨其作用机制。方法灌胃给药醒脑再造胶囊1周后,建立SD大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,进行大鼠神经功能评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法观察脑组织梗死范围,实时荧光定量PCR检测脑组织缺血半暗带区域金属硫蛋白3(MT_3)和超氧化物歧化酶2(SOD_2)mRNA的表达。结果醒脑再造胶囊预处理可明显降低大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能评分,缩小脑组织梗死范围,并使脑组织缺血半暗带区域MT_3和SOD_2 mRNA的表达显著增加。结论醒脑再造胶囊抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用与上调脑组织抗氧化损伤基因MT_3和SOD_2 mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 金属硫蛋白3 超氧化物歧化酶2 氧化损伤 sd大鼠
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