糖尿病视网膜病变患者SDF-1、HO-1及MDA水平变化及与IL-6、TNF-α、CRP的相关性

目的 分析糖尿病视网膜病变(DR)患者基质细胞衍生因子(SDF-1)、血红素加氧酶-1(HO-1)及丙二醛(MDA)水平变化及与白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)的相关性。方法 选取2020年5月至2023年1月解放军总医院收治的131例DR患者为DR组,另选取同期在本院住院的2型糖尿病患者100例为非DR组。比较两组SDF-1、HO-1、MDA水平;比较两组IL-6、TNF-α、CRP水平;比较不同分期DR患者SDF-1、HO-1、MDA水平;采用Logistic回归分析影响DR发生的相关因素,分析DR组患者SDF-1、HO-1、MDA水平与IL-6、TNF-α、CRP的相关性。结果 DR组SDF-1、HO-1水平比非DR组低,MDA水平比非DR组高,差异有统计学意义(P<0.05);DR组IL-6、TNF-α、CRP水平均比非DR组高,差异有统计学意义(P<0.05);SDF-1、HO-1水平:Ⅰ~Ⅱ期>Ⅲ~Ⅳ期>Ⅴ~Ⅵ期,MDA水平:Ⅰ~Ⅱ期<Ⅲ~Ⅳ期<Ⅴ~Ⅵ期,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic多因素分析显示,性别为女、BMI≥24 km/m2、合并患有高血压、高血脂、IL-6>1.17 mg/mL、TNF-α>30 ng/L、CRP>10 ng/mL、SDF-1>2 ng/mL、HO-1<125 ng/mL、MDA>4.06μmol/mL均是影响DR发生的独立危险因素(P<0.05);血清炎性因子IL-6、TNF-α、CRP与SDF-1、HO-1呈负相关,与MDA呈正相关,且均为中度相关(P<0.05)。结论 SDF-1、HO-1、MDA、IL-6、CRP、TNF-α水平与DR的发生、发展有一定关系,通过检测上述指标水平可为进一步探讨DR的发病机制和治疗方法提供新的思路。

隐丹参酮调节SDF-1/CXCR4轴对卵巢功能不全大鼠的保护作用

目的基于基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子CXC亚家族受体4(CXCR4)轴,探究隐丹参酮对卵巢功能不全(POI)大鼠的保护作用及潜在机制。方法采用腹腔注射乙烯基环己烯(VCD)的方法建立POI大鼠模型,并将造模成功的大鼠分为模型组、隐丹参酮低剂量组(50mg/kg)、隐丹参酮高剂量组(100mg/kg)、隐丹参酮高剂量+AMD3100组(100mg/kg隐丹参酮+2.5mg/kg CXCR4抑制剂AMD3100),每组10只;另取大鼠10只,以生理盐水代替VCD注射,作为对照组。各药物组大鼠灌胃或(和)腹腔注射相应药液,每天1次,连续4周。检测各组大鼠血清中雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平和卵巢组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,观察其卵巢组织形态,检测其卵巢组织细胞凋亡情况以及其中SDF-1、CXCR4 mRNA和胱天蛋白酶3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、SDF-1、CXCR4蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠卵巢萎缩,原始卵泡数量减少,闭锁卵泡数量增多,损伤明显;其血清中E2水平,卵巢组织中SOD、GSH-Px水平,以及卵巢组织中SDF-1、CXCR4 mRNA的表达和Bcl-2、SDF-1、CXCR4蛋白的表达均显著降低或下调;血清中FSH和LH水平,卵巢组织中ROS和MDA水平,细胞凋亡率,以及卵巢组织中caspase-3、Bax蛋白的表达均显著升高或上调(P<0.05)。与模型组比较,隐丹参酮低、高剂量组大鼠卵巢组织病变明显好转,各定量指标均显著改善(P<0.05);AMD3100可显著逆转隐丹参酮对上述指标的改善作用(P<0.05)。结论隐丹参酮可通过激活SDF-1/CXCR4轴来减少POI大鼠卵巢组织细胞凋亡,减轻氧化应激,调节血清激素水平,进而改善卵巢损伤。

“脾肾相关”治法SDF-1/CXCR4通路对BMSCs成肌、MDSCs成骨分化的影响

目的探究SDF-1/CXCR4通路在补肾健脾法干预下对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成肌、肌源性干细胞(MDSCs)成骨分化的影响。方法正常、诱导(正常血清加相应成骨、成肌诱导液)、补肾阴、补肾阳、健脾、补肾健脾血清干预BMSCs成肌、MDSCs成骨分化培养15 d后取材。免疫荧光鉴定Desmin表达,Image J分析细胞平均荧光强度;茜素红染色观察成骨分化矿化结节;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Myosin、BMP2、以及SDF-1、CXCR4蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time qPCR)检测细胞SDF-1、CXCR4 mRNA表达。结果与正常组相比,BMSCs成肌分化中,Myosin蛋白水平降低(P<0.05)、诱导组Desmin表达升高(P<0.01)、SDF-1、CXCR4蛋白及mRNA表达升高;MDSCs成骨分化中,诱导组出现较小面积的矿化结节,BMP2蛋白表达升高(P<0.05)、SDF-1、CXCR4蛋白及mRNA表达升高。与诱导组相比,BMSCs成肌分化中,用药组Desmin表达升高(P<0.01),Myosin蛋白水平升高(P<0.05)、SDF-1和CXCR4蛋白及mRNA表达水平显著升高;MDSCs成骨分化中,用药组矿化结节数量增多、面积增大,BMP2蛋白水平升高(P<0.05)、SDF-1和CXCR4蛋白及mRNA表达升高。结论补肾健脾中医不同治法可提高SDF-1/CXCR4通路蛋白及mRAN表达从而促进BMSCs成肌、MDSCs成骨分化,补肾健脾法促进作用最为明显。

灯盏花乙素调节SDF⁃1/CXCR4轴保护脓毒症大鼠心肌损伤

目的探讨灯盏花乙素调节SDF⁃1/CXCR4信号通路对脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法将SD大鼠分为假手术组、模型组、低剂量灯盏花乙素组、高剂量灯盏花乙素组、高剂量灯盏花乙素+AMD3100(CXCR4抑制剂)组,每组12只。采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型;血液生化分析仪检测心肌损伤标志物血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白(cTnI)水平;ELISA法检测大鼠血清IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化;商品化试剂盒检测GSH、SOD、MDA水平;Western blot检测大鼠心肌组织中Bcl⁃2、Bax、SDF⁃1、CXCR4蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织有严重损伤,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著升高,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,低、高剂量灯盏花乙素组大鼠心肌组织损伤显著减轻,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著降低,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著升高(P<0.05);与高剂量灯盏花乙素组相比,高剂量灯盏花乙素+AMD3100组大鼠心肌组织损伤显著加重,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著升高,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论灯盏花乙素通过激活SDF⁃1/CXCR4信号通路可降低脓毒症大鼠炎症反应和氧化应激,减轻脓毒症大鼠心肌损伤。

舒芬太尼调节SDF-1/CXCR4信号通路对急性脑梗死大鼠的神经保护作用研究

目的 探究舒芬太尼调节基质细胞衍生因子-1/CXC型趋化因子受体4(SDF-1/CXCR4)轴对急性脑梗死(ACI)大鼠的神经保护作用。方法 将SD大鼠分为空白组、ACI组、舒芬太尼低剂量组(10 ng·kg^(-1))、舒芬太尼高剂量组(30 ng·kg^(-1))、丁苯酞组(30 mg·kg^(-1))、AMD3100 (SDF-1/CXCR4通路拮抗剂)组(2.5 mg·kg^(-1))、舒芬太尼高剂量+AMD3100组(30 ng·kg^(-1)舒芬太尼+2.5 mg·kg^(-1)AMD3100),每组15只:除空白组外,其余各组大鼠采用中动脉闭塞(MCAO)法复制ACI大鼠模型:建模成功后次日给予相应药物处理,每天1次,持续7d,空白组、ACI组给予等体积生理盐水:改良神经功能缺损评分测定大鼠神经功能缺损情况;TCC染色测定大鼠脑梗死面积;苏木精-伊红染色观察大鼠海马组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠神经元凋亡;Western blot法测定大鼠海马组织SDF-1、CXCR4及凋亡蛋白表达水平。结果 与对照组比较,ACI组大鼠脑组织神经功能缺损评分、脑梗死体积百分数、神经元凋亡率及B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、相关X蛋白(Bax)表达升高,Bcl-2、SDF-1、CXCR4蛋白表达降低,海马组织细胞间隙增大,细胞核破裂且细胞排列紊乱(P<0.05)。与ACI组比较,舒芬太尼低剂量组、舒芬太尼高剂量组、丁苯酞组大鼠脑组织神经功能缺损评分、脑梗死体积百分数、神经元凋亡率及Bax表达降低,Bcl-2、SDF-1、CXCR4蛋白表达升高,海马组织病理损伤有所改善,AMD3100组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);且AMD3100减弱了高剂量舒芬太尼对ACI大鼠的神经保护作用。结论 舒芬太尼可能通过激活SDF-1/CXCR4通路对ACI大鼠产生神经保护作用。

SDF-1/CXCR4轴在皮肤及周围神经损伤修复中的研究进展

皮肤组织遭受损伤时,其损伤修复对于恢复皮肤的稳态非常重要,趋化因子SDF-1在此过程中起着非常关键的作用。本文对SDF-1/CXCR4轴在创面愈合、损伤处神经修复作用、创伤后瘢痕形成以及其对损伤部位神经疼痛的影响进行综述,为开发更有效的皮肤及周围神经损伤的治疗方法和策略提供指导。

趋化因子SDF-1对巨噬细胞迁移和极化的调控作用

目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体C-X-C趋化因子受体4(CXCR4),C-X-C趋化因子受体7(CXCR7)对巨噬细胞迁移和极化的调控作用。方法:Transwell检测SDF-1/CXCR4、SDF-1/CXCR7通路对巨噬细胞迁移能力的影响;Western blot检测SDF-1对CXCR4和CXCR7受体蛋白表达的影响;RT-qPCR、ELISA以及流式细胞术检测SDF-1/CXCR4、SDF-1/CXCR7通路对巨噬细胞极化的影响。结果:SDF-1可明显促进巨噬细胞迁移并促进CXCR4和CXCR7受体蛋白的表达(P<0.001);SDF-1的促进迁移作用可以被AMD3100和CXCR7 antagonist-1抑制(P<0.001);SDF-1可以增强M1型标记物TNF-α、iNOS和M2型标记物IL-10、TGF-β的表达(P<0.05),CXCR7 antagonist-1降低这些标记物的表达(P<0.01);AMD3100对SDF-1增强标记物表达作用无明显影响(P>0.05);流式细胞术结果表明,与对照组相比,SDF-1显著提高M2型的表达比例,该作用可被CXCR7 antagonist-1抑制。结论:SDF-1可以激活CXCR4/CXCR7信号通路,其促进巨噬细胞迁移作用通过CXCR4和CXCR7两个受体实现,而对巨噬细胞极化的调控主要是通过CXCR7受体发挥作用。

基质细胞衍生因子1在软骨和软骨下骨稳态中的作用

背景:骨性关节炎是一种以软骨退变和软骨下骨异常骨重塑为特征的退行性病变。近年来,许多研究表明基质细胞衍生因子1在骨性关节炎的病理进展中发挥关键作用,靶向调控基质细胞衍生因子1及其CXC趋化因子受体4型和CXC趋化因子受体7型组成的信号通路是预防和治疗骨性关节炎的新方法。目的:综述基质细胞衍生因子1参与调控软骨细胞、骨髓间充质干细胞、成骨细胞及破骨细胞增殖、分化及凋亡的作用,以及这些细胞相互作用,探究导致软骨退变、软骨下骨异常骨重塑而加速骨性关节炎病理进展的机制,以期为骨性关节炎的防治提供新的思路。方法:以“基质细胞衍生因子1,软骨,软骨细胞,软骨下骨,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,破骨细胞,CXC趋化因子受体4型,CXC趋化因子受体7型”为中文检索词检索中国知网、万方和维普数据库,以“Stromal cell-derived factor 1,SDF-1,CXCL12,cartilage,chondrocyte,subchondral bone,mesenchymal stem cells,osteoblasts,osteoclasts,CXCR4,CXCR7”为英文检索词检索PubMed、Medline和Embase数据库,检索各数据库建库至2024年1月的相关文献,根据纳入和排除标准,最终纳入77篇文献进行归纳总结。结果与结论:①基质细胞衍生因子1调控软骨细胞、骨髓间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞迁移、增殖、分化和死亡,在维持软骨和软骨下骨稳态以及促进或抑制骨性关节炎软骨退变、软骨下骨异常骨重塑等病理过程中均发挥至关重要的作用,靶向调控基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4型/CXC趋化因子受体7型信号通路有望成为今后防治骨性关节炎研究的重点。②由于基质细胞衍生因子1亚型在组织之间表达量的差异,目前以基质细胞衍生因子1α研究最为广泛,基质细胞衍生因子1β和基质细胞衍生因子1γ的相关研究多集中在探索影响干细胞生物学行为、在调控软骨和软骨下骨稳态中的作用,与骨性关节炎的相关性尚不清楚。③基质细胞衍生因子1能够有效促进干细胞归巢至软骨损伤部位,并诱导其增殖、存活及成软骨分化和应用负载基质细胞衍生因子1的生物支架来改善软骨修复质量已成为软骨组织工程研究的热点;然而,已有研究表明基质细胞衍生因子1可促进骨髓间充质干细胞向肥大型软骨细胞分化,而新生软骨细胞肥大表型会造成软骨内骨形成,软骨细胞凋亡,整个组织发生血管化和骨化,影响最终软骨修复的质量;另外,不同支架与基质细胞衍生因子1组合在修复部分软骨损伤和全层软骨损伤时,再生组织不都是理想的透明软骨组织。因而,未来深入探寻基质细胞衍生因子1在干细胞生物学效应中的潜在机制以及基质细胞衍生因子1与支架组合在修复不同软骨缺损的最佳组合方式将有助于提升软骨修复质量。④目前有关CXC趋化因子受体4型拮抗剂的研究主要集中在AMD3100,T140和TN14003,且绝大部分处于基础实验阶段,有待临床转化。针对基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4型/CXC趋化因子受体7型信号通路开发的治疗药物、方法的安全性、有效性仍需大量的生物学和临床试验加以佐证。

基于SDF-1/CXCR4轴探讨补肾壮筋汤促进小鼠BMSCs归巢和保护关节软骨的机制研究

目的探讨补肾壮筋汤调控SDF-1/CXCR4轴促进小鼠BMSCs归巢和保护关节软骨的作用机制,为膝骨关节炎(KOA)的康复治疗提供实验依据。方法①动物实验中,选用8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠30只,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、补肾壮筋汤组,每组10只,干预12周。采用micro-CT、HE染色观察各组软骨形态变化;激光共聚焦显微镜观察骨组织SDF-1荧光强度;qPCR、Western blot检测各组归巢相关调控因子mRNA转录水平和蛋白相对表达量。②细胞实验中,选用4周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠,采用全骨髓贴壁法提取原代BMSCs,流式细胞术对所提取的细胞进行鉴定后,筛选最佳慢病毒MOI值;随机将细胞分为空白组、空载组、补肾壮筋汤组、sh-SDF-1组、sh-SDF-1+补肾壮筋汤组5组,采用划痕实验观察各组BMSCs迁移情况;阿利新蓝、CollagenⅡ免疫细胞学染色观察各组细胞成软骨分化能力;激光共聚焦显微镜观察各组SDF-1、CXCR4的荧光强度;qPCR检测各组归巢相关调控因子mRNA转录水平。结果①动物实验中,关节组织形态学结果(micro-CT、HE染色)显示:与假手术组比较,模型组股骨髁间可见一圆形缺损,骨皮质失连,软骨细胞缺失;与模型组比较,补肾壮筋汤组股骨髁间环形缺损好转,软骨细胞排列稍紊乱。关节组织免疫荧光显示:与假手术组比较,模型组SDF-1蛋白相对表达量升高;与模型组比较,补肾壮筋汤组SDF-1的蛋白相对表达量升高(P<0.05)。qPCR与Western blot结果显示:与假手术组比较,模型组归巢关键调控因子(SDF-1、CXCR4、MIP-1α、MCP-1、MIP-1β、RANTES、VEGF、G-CSF、NCAM-1、MMP-2)的mRNA转录水平和蛋白相对表达量升高(P<0.05);与模型组比较,补肾壮筋汤组归巢关键调控因子mRNA转录水平和蛋白相对表达量升高(P<0.05)。②细胞实验中,BMSCs经细胞流式术鉴定:CD44、CD105呈阳性表达,CD34呈阴性表达。当病毒MOI值为100时,SDF-1基因感染率最高。BMSCs迁移和成软骨分化能力检测结果显示:与空白组比较,sh-SDF-1组细胞向划痕区域迁移的细胞数量、酸性黏多糖及CollagenⅡ蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);补肾壮筋汤组和sh-SDF-1+补肾壮筋汤组迁移的细胞数量、阿利新蓝染色及CollagenⅡ蛋白相对表达量显著增多(P<0.05)。细胞免疫荧光显示:与空白组比较,sh-SDF-1组细胞SDF-1、CXCR4蛋白相对表达量显著减少;补肾壮筋汤组和sh-SDF-1+补肾壮筋汤组细胞SDF-1、CXCR4蛋白相对表达量显著增多(P<0.05)。qPCR结果显示:与空白组比较,sh-SDF-1组归巢关键调控因子的mRNA转录水平降低(P<0.05),补肾壮筋汤组归巢关键调控因子的mRNA转录水平升高(P<0.05)。结论补肾壮筋汤可通过上调SDF-1/CXCR4轴促进小鼠BMSCs归巢保护关节软骨。

NLRP3/SDF-1信号通路在布地奈德治疗哮喘过程的作用

目的探讨NLRP3/SDF-1信号通路在哮喘气道炎症过程的作用机制。方法36只4周龄雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和布地奈德(BUD)组,每组12只。采用腹腔注射卵清蛋白(OVA)构建小鼠哮喘模型,H-E染色观察肺组织病变,计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的数量,Western-blot检测肺组织NLRP3、SDF-1和CXCR4蛋白的表达水平;采用慢病毒构建BEAS-2B/sh NLRP3细胞系,CCK-8检测细胞增殖活力,使用不同浓度(0、200、400、800 U/mL)的屋尘螨(HDM)干预细胞,模拟体外哮喘模型,比较单独使用NLRP3抑制剂(MCC950)和联合BUD治疗时,NLRP3、p-NF-κB和SDF-1蛋白的表达水平。结果(1)炎性细胞数:哮喘组较对照组增加(P<0.001),而BUD组较哮喘组降低(P<0.001)。(2)小鼠肺组织的NLRP3、SDF-1和CXCR4蛋白的表达水平:哮喘组3个指标均较对照组升高(P<0.001、P<0.01和P<0.001),BUD组则均较哮喘组降低(均为P<0.001)。(3)细胞的NLRP3、p-NF-κB和SDF-1蛋白的表达水平:400、800 U/mL HDM组的p-NF-κB表达水平均较对照组升高(P<0.05和P<0.01)。经HDM干预后,BEAS-2B/sh NLRP3组细胞的p-NF-κB水平降低(P<0.01、P<0.01和P<0.001),且SDF-1蛋白的变化趋势同p-NF-κB蛋白。与单独使用MCC950组比较,联合使用MCC950和BUD治疗组的3个指标的表达水平均降低(P<0.05、P<0.05和P<0.01)。结论BUD可通过限制NLRP3/SDF-1信号抑制哮喘的发生,联合使用BUD和NLRP3抑制剂可能成为哮喘的治疗策略。

CXCR4及其配体SDF-1在宫颈癌转移中的作用及其机制研究

背景与目的:趋化因子CXCR4[chemokine(C-X-C)receptor 4]受体及其配体基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)可能与某些恶性肿瘤的迁移、侵袭和转移有关。本研究拟探讨CXCR4受体及其配体SDF-1(CXCR4/SDF-1轴)通过激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路在宫颈癌转移中的作用及其机制。方法:采用激光共聚焦显微镜检测宫颈癌HeLa细胞内钙离子波动,Western blot法分析CXCR4/SDF-1对宫颈癌HeLa细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)(包括ERK1和ERK2)磷酸化的影响;分别通过粘附实验、明胶酶谱法检测CXCR4/SDF-1对宫颈癌细胞粘附能力、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)分泌的影响。结果:SDF-1α与CXCR4相互结合后诱导了HeLa细胞胞内钙的迅速动员,其荧光强度(fluorescent intensity,FI)平均基础值与峰值差异有统计学意义(P<0.01);诱导了HeLa细胞ERK1/2快速磷酸化,作用后30min时磷酸化程度最强;增加了HeLa细胞粘附能力,不同浓度的SDF-1α与CXCR4结合后不同程度地增加了HeLa细胞粘附于纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)的粘附细胞数,与对照组比较其差异均有统计学意义(P<0.05);加入ERK1/2信号通路抑制剂PD98059后,粘附于FN和LN的细胞数下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);促进宫颈癌HeLa细胞分泌活性的MMP-2,这一作用随SDF-1α浓度升高而增强,SDF-1α在800ng/mL浓度处分泌达高峰,以后开始下降。结论:CXCR4/SDF-1通过激活MAPK通路调控宫颈癌细胞的粘附能力,促进活性MMP-2分泌,进而参与宫颈癌侵袭和转移。

SDF-1及其受体CXCR4在急性白血病与淋巴瘤表达的初步研究

为了探讨血液肿瘤患者外周血基质细胞源因子-1(SDF-1)及其骨髓细胞表面特异性受体CXCR4的表达 及其临床意义,对28例血液肿瘤患者及12例正常人的骨髓及外周血指标进行了检测,采取流式细胞术检测骨髓 细胞表面CXCR4的表达,用ELISA法检测血清中的SDF-1表达。结果显示:28例血液肿瘤患者外周血SDF-1和 骨髓细胞表面CXCR4的表达均高于正常对照组(P<0.01),且SDF-1和CXCR4两因子之间的表达有相关性(r= 0.831,P<0.01)。部分存在明显的髓外转移和多个淋巴结浸润的血液肿瘤患者CXCR4的表达较高。不同类型 的血液肿瘤之间CXCR4的表达可能存在差异(P<0.01)。结论:骨髓细胞与外周血清CXCR4和SDF-1的高表达 可能作为一种特异性的血液肿瘤标志,CXCR4的高表达可能与血液肿瘤的浸润程度相关。

大肠癌中SDF-1与CXCR4的表达及临床意义

目的观察基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)及其受体CXCR4蛋白和mRNA在大肠腺癌、大肠管状腺瘤、非肿瘤性大肠黏膜组织中的表达,探讨二者在大肠腺癌的发生、发展、浸润转移中的作用。方法采用免疫组化SP两步法和RT-PCR法检测上述3组中SDF-1和CXCR4蛋白、mRNA的表达。结果 (1)免疫组化SP两步法检测SDF-1、CX-CR4的蛋白在非肿瘤性大肠黏膜、大肠管状腺瘤、大肠腺癌中的阳性表达量呈明显递增,组间差异均有统计学意义(P<0.05);(2)RT-PCR检测SDF-1和CXCR4的mRNA在大肠腺癌组中的表达高于非肿瘤性大肠黏膜组(P<0.01);(3)大肠腺癌组SDF-1、CXCR4的蛋白与mRNA的表达均与癌组织的浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05,P<0.01);(4)大肠腺癌组织中SDF-1和CXCR4二者间的蛋白、mRNA表达均呈正相关(r=0.436,P<0.01;r=0.949,P<0.01)。结论 SDF-1和CXCR4在大肠腺癌组织中高表达,可能与大肠腺癌的发生、浸润、转移密切相关。

SDF-1和及其受体CXCR4的结构与功能

近年基质细胞衍生因子 1(SDF 1)及其受体CXCR4的构效关系与相互作用机制研究进展很快 .研究证实 ,SDF 1N末端 (Nt)氨基酸残基是与CXCR4相互作用的关键区域 .SDF 1的 β链与蛋白聚糖 (GAG)作用而调节SDF 1的功能 ,C端α螺旋有助于维持SDF 1的活性构象 ;CXCR4Nt、ECL2和 (或 )ECL3对于SDF 1和HIVgp12 0对CXCR4的识别和激活都很重要 ,但在识别序列上存在部分交叉重叠 .SDF 1 CXCR4与肿瘤转移密切相关 ,本文还就SDF 1与CXCR4在肿瘤治疗方面的应用进行了讨论 .

SDF-1、CXCR4、MMP-9及VEGF在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体-4(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中的表达情况及意义。方法取50例子宫肌瘤患者正常子宫内膜组织标本作为正常组,50例子宫内膜异位症患者在位内膜组织和异位内膜组织标本分别作为在位组和异位组。采用免疫组化法及PCR技术检测SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在各组的表达情况。结果 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在子宫内膜异位症患者异位内膜组织、在位内膜组织及正常子宫内膜组织腺上皮细胞和间质细胞中均有表达,以腺上皮表达为著。异位组SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF平均光密度值和SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA、MMP-9 mRNA、VEGF mRNA表达量均明显高于在位组和正常组(P均<0.05),而在位组高于正常组(P均<0.05)。结论 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF的高表达与子宫内膜异位症发病相关,推测SDF-1、CXCR4高表达可能直接或通过其他相关通路影响MMP-9及VEGF的表达而参与子宫内膜异位症的侵袭和血管形成过程,为子宫内膜异位症的发病机制及诊治提供了更深入的靶点。

麝香对颅骨骨缺损模型大鼠SDF-1表达的影响

目的观察不同剂量麝香对颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达的影响,探讨麝香促进外源性rBMSCs向骨缺损处迁移的机制。方法采用贴壁筛选法培养rBMSCs,大鼠颅骨骨缺损模型的建立后回植rBMSCs,将模型组大鼠完全随机分为四组,高、中、低剂量组及空白对照组,并向高、中、低剂量组灌服麝香,空白对照组灌服生理盐水。14天后处死大鼠取出缺损部位的颅骨,并对其脱钙、制作切片。免疫组化染色,光学显微镜下观察,每个切片随机选取3个视野,进行统计学分析。结果麝香能促进颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达,给药各浓度组和空白组比较有显著统计学差异(P<0.01),以低浓度效果最佳(P<0.05)。结论麝香均促进外源性rBMSCs在大鼠体内向损伤部位迁移的机制与麝香促进颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达有关。

T140体外阻断SDF-1/CXCR4信号通路对人关节软骨细胞分泌MMP-3、MMP-9和MMP-13水平的影响

目的:探讨T140体外阻断基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor 1,SDF-1)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)信号通路对人关节软骨细胞分泌基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMP)-3、MMP-9、MMP-13水平的影响,明确T140的作用机制。方法:取144块膝关节置换OA患者软骨(OA软骨组)和144块创伤性截肢患者正常软骨(正常软骨组)组织,Mankin评分均为0或1,加入SDF-1(100 ng/ml)。每组再分为A、B、C三个亚组,分别加入浓度为1000 nmol/L的T140、MAB310和SDF-1,分别于体外培养2、4天后,采用ELISA法测定培养液MMP-3、MMP-9、MMP-13含量,采用RT-PCR检测软骨组织MMP-3、MMP-9、MMP-13 mRNA表达。结果:相同软骨组在相同时间点,A组MMP-3、MMP-9、MMP-13含量及mRNA表达均显著低于B组和C组(P<0.05)。相同时间点,OA软骨组同一亚组MMP-3、MMP-9、MMP-13含量及mRNA表达均显著高于正常软骨组(P<0.05)。结论:SDF-1通过SDF-1/CXCR4信号通路诱导人关节软骨MMP-3、MMP-9、MMP-13表达和释放;T140阻断SDF-1/CXCR4信号通路,降低软骨细胞MMP-3、MMP-9、MMP-13 mRNA表达及分泌量。

SDF-1／CXCR7对胃癌SGC-7901细胞合成及分泌炎症因子的影响

目的探讨SDF-1/CXCR7对胃癌SGC-7901细胞合成及分泌炎症因子的影响及其机制。方法采用CXCR7的shRNA慢病毒表达载体感染人胃癌SGC-7901细胞,Real-time PCR及Western blot检测CXCR7mRNA和蛋白表达;应用SDF-1干预,分为4组:阴性对照组(LV-shRNA-NC),LV-shRNA-NC+SDF-1组,CXCR7沉默组(LV-shRNACXCR7),LV-shRNA-CXCR7+SDF-1组。采用Real-time PCR检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的mRNA表达;采用ELISA检测细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的蛋白含量;采用Western blot检测NF-κB通路的变化。结果 1Real-time PCR及Western blot结果提示,CXCR7沉默组SGC-7901细胞CXCR7mRNA及蛋白的表达水平较阴性对照组显著降低(P均<0.01),阴性对照组与空白对照组间无明显差异。2与LV-shRNA-NC组相比,LV-shRNANC+SDF-1组IL-6及IL-8的mRNA表达及分泌明显增加(P<0.01),LV-shRNA-CXCR7组IL-6及IL-8mRNA表达及分泌减少(P<0.05);与LV-shRNA-NC+SDF-1组相比,LV-shRNA-CXCR7+SDF-1组IL-6及IL-8mRNA表达及分泌明显减少(P<0.01)。而TNF-α及IL-1β的mRNA表达及分泌在4组间无明显差异。3NF-κB p65核内表达、t-IκBα及p-IκBα表达在4组间均无明显差异。结论 SDF-1可能通过CXCR7促进SGC-7901细胞合成及分泌炎症因子IL-6及IL-8,但不依赖于NF-κB通路。

抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响

本研究通过观察抑制SDF 1活性对HL 6 0细胞增殖活性的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL 6 0细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞 ,并与HL 6 0细胞共培养 ,采用SDF 1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,用MTT法检测HL 6 0细胞活力、用流式细胞术观察HL 6 0细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达 ,同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL 6 0细胞内钙离子浓度变化。结果显示 ,抗CXCR4单克隆抗体可下调HL 6 0细胞膜表面CXCR4的表达 ,同时处于G0 /G1期的细胞增多 ,处于S期的细胞减少 ,而白血病细胞存活率下调 ,细胞内钙离子浓度降低。结论 :抑制SDF

胞外HMGB1调控SDF-1/CXCR-4轴介导脐血CD34^+细胞的迁移作用研究

本研究探究高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)和/或基质细胞衍化因子(SDF-1)对脐血CD34+细胞的迁移作用,并进一步探讨HMGB1是否通过调控SDF-1/CXCR-4轴介导脐血CD34+细胞的迁移。分离脐血单个核细胞,应用免疫磁珠分选CD34+细胞,流式细胞仪检测脐血CD34+细胞的纯度。利用趋化迁移实验(Transwell)测定HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34+细胞的迁移作用。1.0×105细胞/孔脐血CD34+细胞加入上孔中,应用不同浓度梯度的HMGB1和/或SDF-1(0、10、25、50、100、200 ng/ml)检测HMGB1和/或SDF-1促进脐血CD34+细胞迁移的最适作用浓度。新鲜分离的脐血CD34+细胞表达SDF-1受体CXCR-4和HMGB1受体TLR2,TLR4和RAGE。为进一步探讨何种受体在HMGB1和SDF-1介导的细胞迁移中起作用,应用抗SDF-1抗体,抗CXCR-4抗体,抗RAGE抗体,抗TLR2抗体和抗TLR4抗体阻断研究HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34+细胞的迁移作用。结果表明,磁珠分选脐血CD34+细胞纯度为97.40±1.26%。25 ng/ml的SDF-1不能介导脐血CD34+细胞的迁移,最佳作用浓度为100 ng/ml。HMGB1的最低作用浓度为100 ng/ml。通过剂量研究实验发现,细胞迁移最佳联合作用浓度为HMGB1 100 ng/ml+SDF-1 50 ng/ml。抗体阻断实验结果表明,抗SDF-1(4μg/ml)和抗CXCR-4(5μg/ml)抗体均可以阻断HMGB1单独或联合SDF-1介导的细胞迁移运动,而抗RAGE抗体,抗TLR2抗体及抗TLR4抗体并不能阻断HMGB1和/或SDF-1对脐血CD34+细胞的迁移作用。结论:HMGB1和SDF-1均可以促进脐血CD34+细胞的迁移,HMGB1可能通过CXCR-4而非RAGE和TLR受体加强SDF-1诱导的细胞迁移作用。具体的作用机制还需进一步探讨。