灯盏花乙素调节SDF⁃1/CXCR4轴保护脓毒症大鼠心肌损伤

目的探讨灯盏花乙素调节SDF⁃1/CXCR4信号通路对脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法将SD大鼠分为假手术组、模型组、低剂量灯盏花乙素组、高剂量灯盏花乙素组、高剂量灯盏花乙素+AMD3100(CXCR4抑制剂)组,每组12只。采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型;血液生化分析仪检测心肌损伤标志物血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白(cTnI)水平;ELISA法检测大鼠血清IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化;商品化试剂盒检测GSH、SOD、MDA水平;Western blot检测大鼠心肌组织中Bcl⁃2、Bax、SDF⁃1、CXCR4蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织有严重损伤,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著升高,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,低、高剂量灯盏花乙素组大鼠心肌组织损伤显著减轻,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著降低,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著升高(P<0.05);与高剂量灯盏花乙素组相比,高剂量灯盏花乙素+AMD3100组大鼠心肌组织损伤显著加重,血清CK、LDH、cTnI、IL⁃6、IL⁃1β和TNF⁃α水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织MDA水平、Bax蛋白水平显著升高,心肌组织GSH、SOD水平、Bcl⁃2、SDF⁃1、CXCR4蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论灯盏花乙素通过激活SDF⁃1/CXCR4信号通路可降低脓毒症大鼠炎症反应和氧化应激,减轻脓毒症大鼠心肌损伤。

奥拉西坦通过SDF-1α/CXCR4通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移

[目的]探究奥拉西坦通过基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)/C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移的机制。[方法]100只SD大鼠随机分为对照组、脑缺血(CI)组、奥拉西坦(200 mg/kg)组和奥拉西坦(200 mg/kg)+AMD3100(5 mg/kg)组,每组25只。采用电凝法制作局部永久性脑缺血大鼠模型。造模后1、7、14天进行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死体积,尼氏染色检测梗死区细胞存活,Western blot检测缺血区SDF-1α、CXCR4蛋白水平。造模后1~7天,连续腹腔注射BrdU(50 mg/kg),14天后,免疫荧光双标染色检测SVZ区BrdU^(+)Nestin^(+)、BrdU^(+)DCX^(+)细胞数量。造模前5天,大鼠SVZ区注射携带GFP的反转录病毒,14天后,免疫荧光双标染色检测梗死区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量。将C17.2细胞分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、奥拉西坦组(终浓度为200 mg/L)和奥拉西坦(终浓度为200 mg/L)+AMD3100(终浓度为100μmol/L)组。采用OGD制作细胞缺血模型,12 h后,免疫荧光双标染色检测BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)细胞数量,Transwell实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平。[结果]动物实验结果显示,与对照组相比,CI组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多(P<0.05);与CI组相比,奥拉西坦组大鼠mNSS评分降低,脑梗死体积减小,梗死区细胞存活数量增多,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多,梗死区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多(P<0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦+AMD3100组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,CXCR4蛋白水平降低,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量减少(P<0.05)。细胞实验结果显示,与对照组相比,OGD组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P<0.05);与OGD组相比,奥拉西坦组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P<0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦+AMD3100组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数减少,细胞培养上清液中CXCR4蛋白水平降低(P<0.05)。[结论]奥拉西坦可能通过激活SDF-1α/CXCR4通路,促进SVZ区神经干细胞迁移至缺血区,以促进脑梗死大鼠神经新生和神经功能恢复。

柚皮苷联合Ad-SDF-1α对极度低氧环境下MSC成骨分化及迁移的影响

目的观察柚皮苷联合基质细胞衍生因子1腺病毒(Ad-SDF-1α)对极度低氧环境下间充质干细胞(MSC)成骨分化及迁移的影响。方法用Percoll密度梯度离心法分离提取兔MSC,常规培养并传代。将不同浓度柚皮苷培养基加入MSC,常氧条件培养3 d,筛选柚皮苷最佳实验浓度。取传三代的MSC,随机分为5组,阴性对照Ad-GFP组转染阴性对照腺病毒Ad-GFP,Ad-SDF-1α组、柚皮苷+Ad-SDF-1α组转染Ad-SDF-1α,空白组、柚皮苷组加入空白MSCM培养基,在常氧环境下培养6 h。取各组细胞,柚皮苷组、柚皮苷+Ad-SDF-1α组均加入1×10^(-4) mol/L柚皮苷培养基,空白组、阴性对照Ad-GFP组、Ad-SDF-1α组加入空白MSCM培养基,在极度低氧环境下继续培养3 d。用qPCR法检测成骨基因(BMP-2、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osterix)、迁移基因(CXCR4)表达,用Western bloting法检测BMP-2、Smads、Runx2、Osterix、CXCR4蛋白表达,ELISA法检测细胞上清液中SDF-1α,用茜素红S染色法检测细胞成骨能力,用Transwell实验检测细胞迁移能力。结果不同浓度柚皮苷干预后MSC中BMP-2 mRNA表达较0 mol/L高(P均<0.05);柚皮苷浓度越高,BMP-2 mRNA表达越高。柚皮苷浓度高于1×10^(-4) mol/L时,SDF-1α、CXCR4 mRNA表达降低(P均<0.05);柚皮苷浓度低于1×10^(-4) mol/L时,SDF-1α、CXCR4 mRNA表达与0 mol/L比较差异无统计学意义(P均>0.05)。因此,选取1×10^(-4) mol/L为柚皮苷最佳实验浓度。与空白组、阴性对照Ad-GFP组、柚皮苷组比较,柚皮苷+Ad-SDF-1α组成骨基因(BMP-2、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osterix)、迁移基因(CXCR4)表达均高(P均<0.05)。与空白组、阴性对照Ad-GFP组比较,柚皮苷组BMP-2、Smads、Runx2、Osterix蛋白表达高(P均<0.05);与柚皮苷组比较,柚皮苷+Ad-SDF-1α组BMP-2、Smads、Runx2、Osterix、CXCR4蛋白表达及SDF-1α水平高(P均<0.05)。与空白组、阴性对照Ad-GFP组、Ad-SDF-1α组比较,柚皮苷组、柚皮苷+Ad-SDF-1α组矿化结节钙盐沉积吸光度值高(P均<0.05)。与空白组、阴性对照Ad-GFP组、柚皮苷组比较,Ad-SDF-1α组、柚皮苷+Ad-SDF-1α组迁移细胞吸光度值高(P均<0.05)。结论极度低氧环境下,柚皮苷与Ad-SDF-1α可协同促进MSC的成骨分化,同时不影响Ad-SDF-1α促MSC迁移的作用。

IL-6、SDF-1、ET与急性脑梗死患者rt-PA静脉溶栓后预后的关系

目的分析白介素⁃6(IL⁃6)、基质细胞衍生因子⁃1(SDF⁃1)、血浆内皮素(ET)与急性脑梗死(ACI)患者重组组织型纤溶酶原激活剂(rt⁃PA)静脉溶栓后预后的关系。方法选取武汉市红十字会医院自2020年3月至2022年3月期间接收的151例行rt⁃PA静脉溶栓后的ACI患者,将其设置为观察组,选取同期体检的健康人群162名作为对照组,比较两组IL⁃6、ET、SDF⁃1水平。根据治疗后1个月的改良Rankin量表结果将观察组患者分为预后良好组和预后不良组,使用Logistic回归分析影响患者rt⁃PA静脉溶栓后预后危险因素。结果观察组IL⁃6、SDF⁃1、ET水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后良好组的患者112例,预后不良组的患者39例,两组的年龄、性别、吸烟饮酒史、高血压、冠心病、TOAST分型、Fib水平比较差异无统计意义(P>0.05),NIHSS、GCS评分及IL⁃6、SDF⁃1、ET、HbAlc、D⁃D指标比较差异具有统计学意义(P<0.05)。多元Logistic回归分析结果显示,血清IL⁃6、SDF⁃1、ET水平及NIHSS、GCS评分是ACI患者静脉溶栓后预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论IL⁃6、ET、SDF⁃1的异常表达与ACI患者静脉溶栓后预后不良密切相关,对三者进行有效检测,可为选择合理治疗方案提供可靠依据,从而改善患者预后情况。

LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力

目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derivedfactor-1α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验,研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响。结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调。用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力。SDF-1α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力。结论:SDF-1α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力。

蝎毒多肽提取物对白血病小鼠Bcl-2 SDF-1α与TGF-β1表达的影响

目的:探讨蝎毒多肽提取物(PESV)对白血病小鼠Bcl-2、SDF-1α与TGF-β1表达的影响,探究PESV对白血病细胞增殖和浸润的影响与机制。方法:NOD-SCID小鼠60只,按本课题前期研究方法,建立人白血病NOD-SCID小鼠髓外浸润模型。选取造模成功的小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为高、中、低剂量组和模型组,另设同周龄正常NOD-SCID小鼠10只为空白对照组。高、中、低剂量组每只分别尾静脉注射PESV 1.2mg/(kg·d)、0.6mg/(kg·d)、0.3mg/(kg·d),模型组和空白组每只均尾静脉注射0.9%的生理盐水0.3mL/d,35d后全部处死,取血清和骨髓细胞培养液上清,用ELISA法进行Bcl-2、SDF-1α与TGF-β1的检测。结果:高、中、低剂量组存活率均高于模型组,高、中、低剂量组小鼠血清以及骨髓的Bcl-2、SDF-1α均明显低于模型组(P<0.05),而TGF-β1均高于模型组,均以高剂量组效果最为明显(P<0.05)。结论:蝎毒多肽提取物可以有效的降低白血病小鼠血清及骨髓中Bcl-2、SDF-1α的表达,提高TGF-β1的表达,具有较好的阻抑白血病细胞增殖和浸润的作用。

SDF-1α改善高糖对骨髓间充质干细胞存活及迁移能力的抑制作用与分子机制的研究

目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对高糖环境(25 mmol/L)下大鼠骨髓间充质干细胞(r MSCs)存活及迁移能力的影响及相关分子机制.方法:采用全髓贴壁法纯化培养r MSCs,通过MTT法检测细胞增殖率、Hoechst 33258染色从形态学角度观察细胞凋亡评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs存活的影响,同时通过transwell实验评估SDF-1α对高糖环境下r MSCs细胞迁移能力的影响.结果:实验结果发现,与低糖培养液(5.6mmol/L)比较,高糖培养液可明显抑制r MSCs增殖、促进细胞凋亡(P<0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可减轻高糖培养液对细胞增殖的抑制及诱导细胞凋亡的作用(P<0.05),CXCR4受体特异性拮抗剂AMD3100(10μg/m L)虽能进一步抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,但差异无显著性(P>0.05).Transwell实验发现高糖培养液可明显抑制r MSCs的迁移作用(P<0.05),SDF-1α(50 ng/m L)可逆转高糖培养液对细胞迁移的抑制作用(P<0.05),AMD3100(10μg/m L)可进一步抑制细胞迁移,且差异有显著性(P<0.05).结论:SDF-1α可能通过CXCR4受体改善高糖对骨髓间充质干细胞迁移能力的抑制,而其改善高糖对骨髓间充质干细胞存活的抑制则可能通过非CXCR4受体介导,为改善MSCs用于治疗冠心病合并糖代谢异常患者心梗后心力衰竭疗效进一步提供理论依据.

AMD3100促进动脉粥样硬化病变与上调炎性因子表达及下调SDF-1α/CXCR4轴有关

探索CXCR4阻断剂AMD3100促进apoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变的分子机制.36只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为三组:普食组、高脂组和AMD3100组.ELISA法测血清基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)水平,采用氧化酶法测定apoE-/-小鼠血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量.HE染色检测apoE-/-小鼠主动脉根部横切面动脉粥样硬化病变.免疫组织化学检测小鼠胸主动脉CXCR4表达.RT-PCR和Western blot分别检测小鼠动脉组织TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白质表达.AMD3100组小鼠主动脉根部横截面的动脉粥样硬化病变较高脂组严重,AMD3100组小鼠胸腹主动脉炎症因子TNF-α、NF-κB的mRNA水平和蛋白质表达增高,但血脂TG、TC、HDL-C和LDL-C含量与高脂组均无显著性差异.AMD3100组小鼠外周血SDF-1α水平和动脉壁CXCR4表达低于高脂组.结果表明:AMD3100通过上调炎性因子表达及下调SDF-1/CXCR4轴促进apoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变.

CXCR4/SDF-1α对宫颈癌HeLa细胞定向迁移及增殖的影响

目的了解CXCR4在HeLa细胞的表达情况，并借助细胞培养评价CXCR4／SDF-1α对HeLa细胞定向迁移及增殖的影响。方法CXCR4mAb免疫染色HeLa细胞。用Transwell侵袭转移模型评价HeLa细胞的迁移情况，其中，上室中加入预先用（或不用）CXCR4单抗预孵育的HeLa细胞，下室中加入含0～100ng／ml SDF-1α的培养基。为评价CXCR4、SDF-1α对HeLa细胞增殖的影响，将HeLa细胞接种于有（无）SDD-1α和（或）CXCR4的低血清环境72h。结果CXCR4在所有HeLa细胞上均有表达。HeLa细胞能顺SDF-1α浓度差定向迁移，且这一作用可被CXCR4mAb拮抗。SDF-1α能促进HeLa细胞在低血清环境中增殖。结论CXCR4／SDF-1α参与了HeLa细胞定向迁移的过程并影响其增殖．

四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中SDF-1/αCXCR_4的表达及其意义

目的检测四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化小鼠模型肝脏SDF-1/αCXCR4的表达,评价SDF-1/αCXCR4轴与肝纤维化的关系,为研究肝纤维化肝损伤发生及损伤修复机制研究提供基础。方法选用6周龄雌性纯系C57小鼠,采用40%的CCl4/橄榄油溶液腹腔注射,剂量为1 mL/kg,每周2次,共4周,制成肝纤维化模型,取肝纤维化及正常对照组小鼠肝脏标本,采用RT-PCR及免疫组化检测SDF-1α的表达,采用RT-PCR及Western检测CXCR4受体的表达。结果与对照组相比,SDF-1α及CXCR4在肝纤维化模型小鼠肝脏组织中的表达较对照组明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝纤维小鼠肝组织的SDF-1/αCXCR4受体表达上调,为研究肝纤维化肝损伤机制及干细胞移植治疗提供理论基础。

CXCR4/SDF-1α信号对乳腺癌细胞的体外增殖和迁移的促进作用

目的探讨CXCR4/SDF-1α信号在乳腺癌细胞体外增殖和迁移中的作用。方法免疫组织化学染色法检测CXCR4在乳腺癌组织中的表达;采用免疫荧光标记法和RT-PCR方法检测CXCR4在乳腺癌细胞株上的表达;MTT法研究SDF-1α细胞因子对乳腺癌细胞株体外增殖的影响及抗体12G5的阻断作用;体外微孔隔离室迁移技术研究CXCR4/SDF-1α信号对乳腺癌细胞株体外迁移能力的影响和抗体12G5的阻断作用。结果 CXCR4表达于乳腺癌组织,也在乳腺癌细胞株表达。SDF-1α细胞因子可有效促进乳腺癌细胞株MDA-M231的体外增殖和迁移,而阻断型CXCR4单抗12G5可有效抑制其增殖和迁移,并呈浓度依赖性。结论 CXCR4/SDF-1α信号参与了乳腺癌细胞株的体外生长和转移,与乳腺癌的侵袭和转移有关。

急性白血病患者血清及脑脊液中SDF-1α的检测及其临床意义

目的探讨急性白血病(acute leukemia,AL)患者血清及脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-lα,SDF-1α)的水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测26例初诊未治及经标准方案化疗2疗程后AL患者和10例非恶性血液病患者(对照组)的血清及CSF中SDF-1α的水平。结果①初诊未治及经标准方案化疗2疗程后急性淋巴细胞白血病(ALL)组、急性髓细胞白血病(AML)组血清及CSF中SDF-1α浓度明显高于对照组(P<0.01);ALL组明显高于AML组(P<0.01)。②初诊未治及经标准方案化疗2疗程后中枢神经系统白血病(CNSL)组、非中枢神经系统白血病(N-CNSL)组血清及CSF中SDF-1α浓度明显高于对照组(P<0.01);CNSL组明显高于N-CNSL组(P<0.01)。结论①AL患者初诊时及化疗后血清及CSF中SDF-1α水平呈高水平表达,提示它可以作为AL特别是CNSL的一种病情变化检测指标,可能与AL耐药及复发相关。②CNSL患者血清及CSF中SDF-1α浓度有一定的相关性,提示在CNSL患者仅检测血清SDF-1α水平就可能有助于判断病情变化,避免反复腰穿给患者带来痛苦。

SD大鼠SDF-1α基因克隆与序列分析

目的克隆SD大鼠SDF-1α基因,并进行生物信息学分析。方法采用RT-PCR扩增SDF-1α基因,对扩增产物进行序列的测定,利用Internet和GenBank数据库对测序结果正确的SDF-1α基因进行生物信息学分析。结果克隆了SDF-1α基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,SDF-1α基因开放读码为270bp,编码89个氨基酸;同源性分析表明,与人、猫、狗的SDF-1α基因同源性最大。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其中脾脏、胰脏表达较高。结论成功克隆SDF-1α基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。

SDF-1α基因真核表达载体的构建与鉴定

目的构建SDF-1α真核表达载体,为研究SDF-1α基因功能提供工具。方法从大鼠平滑肌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增SDF-1α的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定。结果PCR和限制性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pcDNA3.1/SDF-1α。通过对SDF-1α基因编码区cDNA序列测序证实其与GenBank中的已知序列一致。结论成功构建了SDF-1α真核表达载体,为SDF-1α基因功能研究奠定基础。

SDF-1α及其受体CXCR4在类风湿关节炎患者外周血中的表达

目的探讨基质细胞衍生因子SDF-1α及其受体CXCR4在类风湿关节炎(RA)发生、发展中的作用及意义。方法用流式细胞术对50例RA患者和25例健康志愿者外周血CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞表面CXCR4的表达水平进行检测,用ELISA法检测SDF-1α、IL-6在上述两组外周血中的表达情况。结果 RA患者组外周血中CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞表面CXCR4表达水平和SDF-1α、IL-6的表达均明显高于健康对照组(P<0.05)。直线相关性分析显示,外周血CXCR4及SDF-1α表达水平与IL-6均存在正相关性(P<0.05)。结论 SDF-1α/CXCR4轴及IL-6在RA患者的发病过程中可能起到了重要作用,并且二者有协同作用。

SDF-1α和CXCR4在低氧缺糖海马脑片中的表达变化

目的研究海马脑片低氧缺糖损伤后SDF-1α和CX-CR4蛋白的表达变化情况。方法运用脑片培养技术建立低氧缺糖海马脑片模型,用免疫组化法和Western blot法检测SDF-1α和CXCR4的表达变化。结果低氧缺糖损伤前后海马脑片中均可见SDF-1α和CXCR4表达的阳性细胞,其胞膜和胞质呈棕黄色着色,其中部分轴丘可见CXCR4阳性蛋白表达。Western blot发现,损伤后在分子量为11 ku和43ku处分别检测到SDF-1α、CXCR4阳性条带;与正常对照组相比,OGD组SDF-1α和CXCR4表达均增加,其中SDF-1α表达增加差异有统计学意义(P<0.01)。结论海马脑片缺氧缺糖损伤后SDF-1α蛋白表达增加,提示SDF-1α可能与海马脑片低氧缺糖损伤密切相关。

SDF-1α/CXCR4轴在心血管系统疾病中的研究进展

心血管疾病中多存在内皮细胞损伤病理基础,在以此为基础的心血管疾病治疗中,内皮祖细胞(EPCs)的应用起关键作用,作为血管新生的主要细胞成分,将EPCs移植到局部损伤部位能有效促进血管修复和再内皮化。SDF-1α/CXCER4轴是指基质细胞衍生因子1及其受体CXCR4构成的可影响细胞增殖、运动、生长、归巢等生物学行为的偶联分子对,根据不同SDF-1α的浓度梯度,可有效调控EPCs的增殖、黏附功能从而达到治疗效果。本文总结目前的研究成果,对SDF-1α/CXCR4轴在心血管疾病的研究进展进行综述。

解毒通脉方联合湿润烧伤膏治疗糖尿病足患者的疗效观察及对血清VEGF、bFGF、SDF-1α的影响

目的:观察解毒通脉方联合湿润烧伤膏治疗糖尿病足的临床疗效及对血清血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)表达水平的影响。方法:选取78例糖尿病足患者,随机分为观察组和对照组,每组各39例。对照组给予降糖、改善局部微循环、抗生素治疗,并外用湿润烧伤膏治疗;观察组在对照组治疗的基础上给予解毒通脉方内服治疗,7 d为1个疗程;治疗3疗程后,评定2组患者的临床疗效,比较2组患者治疗前后创面评分以及血清VEGF、b FGF、SDF-1α表达水平的变化情况。结果:观察组临床总有效率为97.4%,高于对照组的87.1%;治疗后,2组患者的创面评分均明显低于治疗前(P<0.05),观察组低于对照组(P<0.05);治疗后2组患者血清VEGF、b FGF、SDF-1α水平较治疗前均升高(均P<0.05),观察组高于对照组(均P<0.05)。结论:解毒通脉方联合湿润烧伤膏治疗糖尿病足患者具有确切的疗效,能够促进糖尿病溃疡创面修复,提高患者血清VEGF、b FGF、SDF-1α水平是其部分作用机制。

GST-SDF-1α融合蛋白的原核表达及纯化

构建融合重组表达载体并对其进行诱导表达蛋白以获得大量重组融合蛋白。通过PCR方法扩增出小鼠SDF-1α基因,克隆入pMD18T载体中,进行测序分析。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T11中GST的下游构建重组质粒pGEX-4T1-SDF-1α,转化受态细胞BL21中,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳检测分析。在约Mr36×103处出现一新生的蛋白条带。经灰度扫描检测,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后得到了目的蛋白。成功克隆了小鼠的SDF-1α基因,并纯化融合基因GST-SDF-1α的原核表达产物。

趋化因子SDF-1α及其受体介导涎腺腺样囊性癌细胞的趋化与侵袭

探讨趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4对涎腺腺样囊性癌细胞趋化与侵袭活性的促进作用。采用RT-PCR法检测涎腺腺样囊性癌肺高、低转移细胞株ACC-M和ACC-2中CXCR4 mRNA的表达;Boyden趋化小室法检测在SDF-1α作用下ACC-M细胞和ACC-2细胞的趋化与侵袭活性;检测CXCR4 mAb对ACC-M细胞和ACC-2细胞趋化活性和侵袭活性的抑制作用。结果显示:2株涎腺腺样囊性癌细胞中均存在不同程度CXCR4 mRNA的表达,其在肺高转移细胞株ACC-M中的表达显著高于肺低转移细胞株ACC-2;SDF-1α对2种细胞均具有趋化活性和侵袭活性,且对ACC-M细胞的趋化活性和侵袭活性显著强于ACC-2细胞;CXCR4 mAb能够抑制涎腺腺样囊性癌细胞的这种趋化活性和侵袭活性。趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4能够介导涎腺腺样囊性癌细胞的趋化与侵袭。