丹红注射液促进心梗模型大鼠缺血心肌血管新生

目的探讨丹红注射液(丹参和红花)对心梗(MI)模型大鼠缺血心肌血管新生的影响及其作用机制。方法利用Sprague-Dawley(SD)大鼠左前降支冠状动脉结扎法造成急性心梗模型,实验分为假手术组,模型组,丹红注射液低、中、高剂量组(0.5、1、2 m L/kg),静脉给药7 d后处死,检测心梗面积,心肌损伤血清学指标,微血管面密度,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质细胞衍生因子-l(stromal cell-derived factor-1,SDF-l)及其受体CXCR4的表达。结果丹红注射液可显著减小大鼠心肌梗死面积,降低LDH、CK-MB、c Tn I血清水平,增加微血管面密度,上调VEGF、SDF-l、CXCR4的表达。结论丹红注射液具有缺血心肌的保护作用,其机制可能与VEGF的高表达及SDF-l/CXCR4生物轴有关。

CXCR4和CXCR7在甲状腺癌中的表达及病理意义

研究甲状腺癌组织中趋化因子4受体(CXCR4)和趋化因子7受体(CXCR7)的表达情况及临床病理意义。应用免疫组织化学PV-6000法及Western blot法检测CXCR4与CXCR7在甲状腺癌中的表达。二者在甲状腺癌与甲状腺良性疾病组织的差异均具有统计学意义(P<0.05),在甲状腺癌中表达仅与淋巴结转移有关(P<0.05),CXCR4与CXCR7之间呈正相关。Western blot结果提示二者在甲状腺癌中的表达率高于癌旁及甲状腺腺瘤。CXCR4和CXCR7的表达水平与淋巴结转移相关,可作为甲状腺癌预后的判断指标。

RNAi沉默SDF-1基因对新诱导建立的人胃癌耐药细胞系SGC7901/L-OHP的影响

目的诱导构建人胃癌奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药细胞系SGC7901/L-OHP,探讨RNAi沉默基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)表达对SGC7901/L-OHP增殖、凋亡、耐药的影响。方法L-OHP高浓度间歇冲击法诱导构建耐药细胞系SGC7901/L-OHP,观察其生物学行为变化,RT-PCR及Western blot法检测SDF-1 mRNA和蛋白表达情况;RNAi沉默SGC7901/L-OHP细胞SDF-1基因,从mRNA和蛋白水平验证沉默效果,MTT法及流式细胞术检测SGC7901/L-OHP细胞增殖、凋亡及细胞周期变化。结果成功建立耐药细胞系SGC7901/L-OHP,L-OHP对其增殖抑制率明显低于SGC7901细胞,其G 0/G 1期细胞增多、S期细胞减少,且SDF-1 mRNA和蛋白表达量明显高于SGC7901细胞(P均<0.05)。成功沉默SDF-1基因表达后,与空白及阴性对照组比较,SDF-1-RNAi组细胞增殖抑制率明显升高,对L-OHP药物敏感度明显升高,且其细胞凋亡也明显升高,G 0/G 1期细胞明显减少,S期细胞明显增多(P均<0.05)。结论本实验成功建立人胃癌L-OHP耐药细胞系SGC7901/L-OHP,并发现SDF-1参与胃癌细胞SGC7901对L-OHP获得性耐药过程;RNAi沉默SDF-1基因表达后抑制SGC7901/L-OHP细胞增殖、促进凋亡并部分逆转其对L-OHP的耐药性。

改良青龙摆尾针法对膝关节骨性关节炎SDF-1含量改善的研究

目的比较改良青龙摆尾针法与普通针刺手法对膝关节骨性关节炎患者SDF-1含量改善情况的差异,明确改良青龙摆尾针法治疗膝关节骨性关节炎的优势。方法将95例膝关节骨性关节炎患者随机分为两组,治疗组48例采用改良青龙摆尾针法治疗;对照组47例采用普通针刺法治疗。采用膝骨关节病情严重指数(ISOA)评定临床疗效。结果治疗组临床总有效率为97.92%,对照组临床总有效率为85.10%,两组临床总有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.01);两组患者治疗后SDF-1含量均有所下降,与治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);且治疗组改善情况优于对照组(P<0.01)。结论改良青龙摆尾针法和普通针刺法均能改善患者SDF-1含量,但改良青龙摆尾针法明显优于普通针刺法,临床疗效确切,值得推广应用。

SDF-1/NELL-1双基因转染促进脂肪干细胞体外成骨

[目的]观察腺病毒载体转染基质细胞衍生因子-1 (stromal cell-derived factor-1, SDF-1)和尼尔样-1型分子(Nellike molecule-l, NELL-1)基因对兔脂肪干细胞(adipose stem cells, ADSCs)体外成骨分化能力的影响。[方法]自兔分离培养ADSCs,分为单纯细胞组(original cell control, OCC)、空质粒转染组(empty vector control, EVC)、SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组,给予相应体外处理。成骨诱导14 d后,茜素红染色检测钙结节形成及碱性磷酸酶活性,Western blot检测和RT-PCR检测相应蛋白与m RNA表达水平。[结果]单纯SDF-1或NELL-1转染,或SDF-1/NELL-1两者共同转染均显著增加目标基因的蛋白表达水平(P<0.05),特别是共同转染同时增加两种基因标目蛋白的表达。茜素红染色钙结节计数和ALP活性检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组均显著高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中,SDF-1/NELL-1组最高。RT-PCR检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平最高。[结论] SDF-1、NELL-1单独转染,或两者共转染ADSCs均可获得目标蛋白的高表达,以上两种基因单独转染,特别是两种基因共同转染,可显著增强ADSCs的体外成骨。

SDF-1过表达对人胃癌耐药细胞株SGC7901/L-OHP增殖、凋亡、耐药的影响

目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)过表达对人胃癌耐药细胞株SGC7901/L-OHP增殖、凋亡、耐药的影响。方法通过脂质体将真核表达载体pcDNA3.1-SDF-1转染至人胃癌耐药细胞株SGC7901/L-OHP中,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及In-cell Western验证转染效率。噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测SDF-1过表达对人胃癌耐药细胞株SGC7901/L-OHP增殖、细胞周期、凋亡及奥沙利铂耐药的影响。In-cell Western检测SDF-1过表达对survivin、Bcl-xl、cyclinD1、caspase-3蛋白表达的影响。结果在pcDNA3.1-SDF-1转染后的SGC7901/L-OHP细胞中,SDF-1 mRNA和蛋白表达显著增加(均P<0.01)。与空白对照组及阴性对照组相比,SDF-1过表达的人胃癌耐药细胞株SGC7901/L-OHP细胞增殖加速,其G 0/G 1期细胞减少、G 2/M期细胞增多,细胞凋亡率降低,且细胞对奥沙利铂的耐药性明显增加。SDF-1过表达能够明显上调survivin、Bcl-xl、cyclinD1蛋白表达水平,同时下调caspase-3蛋白表达水平。结论SDF-1过表达能够促进胃癌SGC7901/L-OHP细胞增殖,抑制其凋亡,提高其对奥沙利铂的耐药性,机制可能与上调凋亡抑制基因survivin、Bcl-xl、cyclinD1的表达,同时下调凋亡促进基因caspase-3的表达有关。

响应面优化苣荬菜中水溶性膳食纤维提取及其理化性质

为优化超声波法提取苣荬菜中的水溶性膳食纤维工艺,考察提取液pH、料液比、超声功率、提取时间和温度等单因素对水溶性膳食纤维素得率的影响,并通过三因素三水平Box-Benhnken试验设计及响应面分析优化工艺参数。结果表明,最佳提取条件为:pH 3,料液比1:25 g/mL,超声波功率320 W,超声时间22 min,提取温度70℃。在此条件下苣荬菜中水溶性膳食纤维的得率为3.65%±0.02%。水溶性膳食纤维的持水力为465%,溶胀力为5.53mL/g。