用SDS(十二烷基磺酸钠)凝胶电泳法测定水解丝蛋白的分子量

用改进的ＳＤＳ凝胶电泳法对实验室生产的水解丝蛋白产品的分子量进行了测定。测定表明该产品分子量分布在４３０００～２９００的范围，分子量在１００００以下的低分子蛋白成分含量高于５０％。

用SDS凝胶电泳法测定水解丝蛋白的分子量

低分子量水解丝蛋白对皮肤有良好的保湿作用和保香效果，是高级洗发、护肤化妆品的优质添加剂．本文作者用改进的ＳＤＳ凝胶电泳法对丝素课题组实验室生产的水解丝蛋白产品的分子量进行了测定，测定表明该产品分子量分布在４３０００－２９００范围，分子量在１００００以下的低分子蛋白成份含量高于５０％，品质上好，可用于工业产品生产．

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物肌肉蛋白热变性的研究

分别对鸡、牛、猪、羊、鱼等五种新鲜动物肌肉组织进行不同温度的热处理,对处理前后的样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示五种动物肌肉组织经不同温度处理,所得电泳图谱具有显著差异,反映蛋白质变性与温度存在密切相关性。因此,可采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定动物组织蛋白的热变性程度,从而应用于肉制品加工过程中热熟程度的判定。该方法特异性和敏感性较强,操作简单,结果判定直观可靠。

肉苁蓉属4种肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳分析

目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。

SDS—PAGE分析辽宁法库叶茂台出土辽代丝绸的老化特征

为了解辽宁法库叶茂台出土辽代丝绸的老化程度,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(简称SDS-PAGE)分析辽代丝绸蛋白质的相对分子量,并依据与现代蚕丝蛋白质组成分子量的对比结果来探讨辽代丝绸的老化特征。SDS-PAGE结果表明辽代丝绸蚕丝蛋白质残留着相对分子量为65kD和56kD两条肽链,而蚕丝蛋白质通常含有的25kD轻链蛋白却并不存在,其丝绸组成已经发生了明显变化,说明辽代丝绸糟朽严重,并经进一步分析认为65kD和56kD两条肽链是蚕丝蛋白质重链(390kD)断裂的产物,而25kD蛋白的消失则推测辽丝绸蛋白非结晶区域肽链或已分解,或已降解为更小分子量的的肽链。X射线衍射结果分析表明由于蚕丝蛋白非结晶区域肽段降解速度明显快于结晶区域,致使埋藏于地下多年的辽代蚕丝蛋白结晶度反而大于现代蚕丝。

SDS—PAGE的蛋白质染色方法

在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中,常用考马斯亮蓝或硝酸银给凝胶中的蛋白质条带染色,这两种方法是当前电泳染色中的主要方法,应用广泛.最近几年,又出现了新的染色方法—曙红Y染色法和尼罗红染色法.四种染色法各有特点.现把四种染色法介绍如下,以供同行们染色时参考与选择.1 考马斯亮蓝染色法考马斯亮蓝染色法是SDS-PAGE中蛋白质带染色的常规方法.该法重复性好,但灵敏度不高,检出下限约为0.1μg的蛋白质,样品中每种蛋白质的浓度应为20～30ng/μl.考马斯亮蓝染色法的染色强度依赖于蛋白质的特性.碱性蛋白质、低分子量蛋白质在醇、酸固定时容易从凝胶中洗脱下来.用此染色法不能使糖蛋白染色.

蛋白质肽的微管SDS-聚丙烯酰胺微管凝胶电泳

电泳是一种广泛而有效地在生物化学研究中的分离手段,其主要应用是通过SDS-PAGE 来分离及测定蛋白质和多肽的分子量,这已经是一种较成熟的实验室方法。近几年,高效SDS-PAGE 微管凝胶电泳用来分离及测定蛋白质和多肽的分子量已经发展成为一门新的技术,从微管内径为6mm。

SDSC-TAB和高盐沉淀法提取香蕉枯萎病菌基因组DNA的比较

以香蕉枯萎病菌菌株为试验材料 ,采用SDS- CTAB法和高盐沉淀法提纯香蕉枯萎病菌基因组DNA。结果表明 :高盐沉淀法是适合于香蕉枯萎病菌基因组DNA提取的方法。该方法提取的DNAOD2 60 2 80值显示产物纯度较高 ;经琼脂糖凝胶电泳得到一条带型较宽且清晰的DNA谱带 ,DNA浓度较高 ,基本无DNA碎带 ;不用RNase处理 ,已无RNA的干扰 ,无需任何纯化处理即可用于PCR扩增和RAPD分析。同时对DNA提取过程中的细节问题进行了探讨与分析。

尿素改善SDS-PAGE分离小分子肽的效果

目的 :探讨尿素对Tricine-SDS -PAGE系统分离小分子蛋白的影响。方法 :利用常规SDS -PAGE和Tricine -SDS - PAGE分离小分子肽 ,比较不同组成的分离胶的分离效果。结果 :调整聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的交联度为 5 .0 5 % ,能够改善小分子肽的分离效果。加入 36 %的尿素比加入甘油可以更有效分离 1kD的小肽。但尿素胶聚合太快影响分离效果。结论 :尿素改善SDS -PAGE分离小分子肽的效果 ,制作尿素胶时 ,宜采用低浓度的AP和TEMED使凝胶慢速聚合。

脱脂松仁粕中球蛋白的提取工艺及其SDS–PAGE分析

以脱脂松仁粕为原料,采用Osborne法提取松仁粕中的球蛋白,设NaCl质量分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)、料(质量,g)液(体积,m L)比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35)、提取时间(30、60、90、120、150、180 min)和提取温度(40、45、50、55、60、65℃)4个单因素试验,再用响应面法优化松仁粕中球蛋白的提取工艺,并对其分子量进行分析。结果表明:当NaCl质量分数为2.5%,料液比为1∶15,提取时间为150 min,提取温度为56℃时,松仁粕中球蛋白的提取率较高,为15.32%;SDS–PAGE分析结果表明,脱脂松仁粕球蛋白的分子量为41 320、27 520、21 690、16 310、15 180。

RPLC-SDS-PAGE整体蛋白质分离与纳升毛细管液相色谱-串联质谱联用技术的研究及应用

采用RPLC-SDS-PAGE与纳升毛细管液相色谱-串联质谱联用技术对国际人类蛋白质组织(HUPO)提供的法国人肝脏蛋白质组表达谱的构建及其理化性质的统计分析,鉴定了2552条肽段,归结于402种蛋白质和240个蛋白质簇。蛋白质的pI分布范围为:4.29～11.57,分子量范围为:8,593～3,816,218Da,其中大于100kDa的蛋白质占到所鉴定蛋白质的10%,二者皆高于两维凝胶电泳的等电点和分子量范围(一般等电点3～10;分子量10～100kDa)。另外,蛋白质组中不同蛋白质的疏水性分布显示大部分蛋白质为可溶性蛋白质,其中疏水性蛋白质占15%(GRAVY>0的蛋白质)。实验结果表明该技术路线兼顾了反相色谱分离度高和SAS-PAGE兼容性好的优点,可用于复杂组织或细胞中蛋白质组表达谱的构建或比较蛋白质组的研究,为蛋白质组学的方法学研究奠定了基础。

用一种改进的电泳方法测定抗冻蛋白的分子量

针对抗冻蛋白分子量较小的特点，该文采用了一种改进的Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测定其分子量。采用三层胶系统并在电极缓冲液中以Ｔｒｉｃｉｎｅ代替Ｇｌｙｃｉｎｅ。

改良PAGE法用于人类珠蛋白多态性研究

目的 :探讨人类新生儿HbF中珠蛋白链简便、快速、准确的分离方法。方法 :对传统的含TritonX 10 0的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳法的凝胶系统作了进一步的改进 ,其中TritonX 10 0和TEMED等主要物质的浓度作了调整 ,不同于其它文献报导的。结果 :该改良法能使凝胶聚合时间缩短、一次电泳时间从 6h缩短为 2h ,HbF中各珠蛋白链得到良好分离 ,电泳条带清晰 ,无拖尾现象 ;结论 :该方法操作简便 ,分离效果好 ,电泳时间缩短 ,极大地提高了研究效率。

牛羊乳酪蛋白制备及电泳分析比较

采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为86.75%,羊乳酪蛋白得率为90.55%,高含量的酪蛋白主要集中在电泳图谱的中分子量组,可分为αs1-CN、αs2-CN、β-CN和κ-CN,牛羊乳αs2-CN分子量羊乳大于牛乳,牛乳α-CN含量比较多,羊乳β-CN含量比较多,鲜乳与复原乳全蛋白主要组分在电泳图谱中除酪蛋白差别外,上端的高分子量组清蛋白区羊乳IgG重链的分子量比牛乳小。应用蛋白质电泳分析技术可以区分羊乳和牛乳的蛋白质组分,等电点沉淀法制备酪蛋白的方法简单,易于操作。

发酵法制备生物活性肽及其产物的初步分析

以4株蛋白水解能力较强的瑞士乳杆菌作为出发菌株,分别测定其36h内的蛋白水解动力曲线、产酸曲线,经比较分析选出一株产肽能力强、速率快的瑞士乳杆菌作为后续实验用株。采用响应面分析法优化发酵条件,TricineSDS-PAGE电泳法对发酵产物进行初步分析。结果表明:所选瑞士乳杆菌在接种量为3.5%,底物浓度13%,发酵温度37℃,发酵时间18h的条件下,水解度可达5.60%,可将乳蛋白水解成大量的生物活性肽,其中包括很多小分子肽段,表明该菌可作为水解乳蛋白制备生物活性肽的优良菌株。

水稻根系蛋白质提取方法的改良

提取出高纯度的根系蛋白质是获得分离效果好、清晰度高的水稻根系蛋白质双向电泳图像的关键。本研究以水稻六叶期幼苗根系为材料,运用改良的TCA/丙酮/SDS法和TCA/丙酮法、TCA/丙酮/Tris-HCl对水稻根系蛋白质进行抽提,进行蛋白质双向凝胶电泳。结果表明:改良的TCA/丙酮/SDS法适用于水稻根系蛋白质组研究,并且350μg上样量获得的双向凝胶电泳图像更为清晰、重现性好,具有较好蛋白质分离效果。

醇浓度对醇法大豆浓缩蛋白浸提液中溶出蛋白的影响

利用不同浓度乙醇对低变性脱脂大豆粕进行醇法浸提,制取大豆浓缩蛋白。对浸提液采用SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量,并对蛋白质溶出率进行测定,探索不同醇浓度对浸提液中蛋白溶出率及分子量的影响,为醇法制取大豆浓缩蛋白浸提液再加工、回收蛋白提供了一定的理论基础。

均匀试验设计优化酶法提取燕麦全粉蛋白质研究

采用酶法从燕麦全粉中提取燕麦蛋白。先对提取所用的酶进行筛选,选定提取率最高的碱性蛋白酶为提取酶类,在单因素试验基础上用五因素十水平均匀试验设计对酶法提取燕麦蛋白的工艺进行优化。结果表明:碱性蛋白酶提取燕麦蛋白的最佳工艺为:加酶量(E/S)100.358 U/g,pH 10.5,温度53.49℃,液料比18∶1,时间60 min,在此条件下,提取率为84.09%,纯度达89.16%,得到的燕麦蛋白的等电点为4.4,分离率达93.33%。SDS-PAGE电泳分析显示,酶法制备的燕麦蛋白在65.2～12.5 ku上都有条带分布,其中74.3%的条带集中在31.3～40.0 ku和21.0～21.9 ku两个区间,与碱法相比,有条带缺失。

两种茄科植物基因组提取方法的比较

以番茄和马铃薯的幼叶、嫩茎组织作为实验材料,使用CTAB提取DNA法、SDS法和尿素提取法提取基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳法检测基因组提取效果,筛选出适合不同组织的最优基因组提取方法。结果表明,采用不同的方法提取植物基因组DNA的质量不同而差异很大,CTAB法提取植物叶片基因组效果较好,SDS法提取植物嫩茎基因组效果较好,而尿素法提取效果均不佳。基因组提取方法的筛选与改良为这两种茄科作物的分子研究奠定了基础。

猪源ETEC F18黏附素三种提取方法比较的研究

为探索更为有效的黏附素提取技术,本试验以猪源ETEC F18ab菌株为材料,通过三种方法(切割法、热洗脱法及联合热洗脱与切割法)各提取200 mL菌悬液中的黏附素,应用紫外可见分光光度计测定浓度并进行SDS-PAGE分析。结果显示,应用切割法、热洗脱法和联合热洗脱与切割法所得黏附素量分别为5.94、8.84和22.47 mg,即应用联合热洗脱与切割法提取的黏附素量明显高于单纯应用热洗脱法和切割法;SDS-PAGE分析表明,联合热洗脱与切割法提取的黏附素蛋白纯度稍低于单纯应用热洗脱法和切割法。综合分析上述结果可知,联合热洗脱与切割法更适用于大量黏附素抗原的提取。