聚乙二醇(PEG)化尿酸氧化酶中游离PEG的含量测定

目的：比较并建立PEG化尿酸氧化酶中游离PEG的测定方法。方法：采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器（ELSD）联用法和SDS—PAGE碘染的方法。RP—I-IPLC法的色谱柱为C。柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相A为0．1％（v／v）的三氟乙酸-水，流动相B为0．1％（v／v）的三氟乙酸-乙腈，梯度洗脱；流速为1．0mL·man～；柱温30℃；SDS—PAGE碘染采用氯化钡固定，碘-碘化钾染色。结果：RP—HPLC法中，PEG的检测灵敏度为0．2μg，PEG在1～6μ范围内呈良好的二项式回归关系（R^2=0．9993）。低、中、高3个浓度的加样回收率分别为96．2％、97．4％、96．8％。SDS—PAGE碘染法灵敏度为0．1μg。结论：建立的高效液相色谱一蒸发光散射检测器联用法与SDS—PAGE碘染法均可对游离PEG进行测定。前者测定结果准确，重复性好，可用于PEG的精确定量分析，后者操作简单，不需要特殊仪器。但只可用于限度检查。