百合总RNA提取方法的比较和分析

以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花的花蕾为材料,比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法和SDS改进法提取总RNA的效果,结果表明,SDS改进法能有效去除多糖,提取的RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进一步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎的RNA,同样可以获得完整的纯度高的RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA的提取。经RT-PCR获得了花发育基因的特异性条带,说明用SDS改进法从百合中提取的RNA质量好、产率高、完整性强,完全适合于百合进一步的分子生物学研究。

山丹百合花蕾总RNA提取方法的比较

以SDS改进法、CTAB改进法及EASYAPIN试剂盒法3种方法提取山丹百合花蕾的总RNA,并通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测对其提取效果进行分析比较。结果表明:SDS改进法提取的RNA效果不显著,CTAB改进法提取的RNA产量高,但有大量的DNA污染,需进一步纯化;EASYAPIN试剂盒法提取的RNA质量好,纯度高,完整性强,可直接进行下一步的分子生物学研究。

分蘖洋葱叶片RNA提取方法的比较和分析

以新鲜的分蘖洋葱叶片为材料，比较了Trizol法、Triz01改进法、SDS法、SDS改进法以及柱式植物RNA提取法提取总RNA的效果。结果表明：Trizol法和Trizol改进法所提取的RNA得率很低，且不能有效除去叶片中的多糖成分；SDS改进法能够有效的去除分蘖洋葱叶片中的多糖，提取的RNA中28S RNA亮度约为18SRNA的2倍，OD260／OD280值介于1．7～2．2之间，但RNA的得率偏低，约为56．32／μg／g；柱式植物RNA提取法提取的RNA28S、18S、5S条带清晰，完整性好，RNA的得率最高，为123，58／2μg／g，完全适合于分蘖洋葱进一步的分子生物学研究。