SDS-PAGE凝胶电泳法对不同种鹿茸蛋白质差异化研究

目的:利用电泳方法研究市场上药典规定品种的鹿茸饮片及其混淆品中蛋白质的差异,为鹿茸的免疫鉴定技术研究提供研究依据。方法:采用蛋白溶解液法提取各鹿茸蛋白,以牛血清蛋白为对照,利用Bradford法测定鹿茸水溶性蛋白的浓度,利用SDS-PAGE凝胶电泳法分析花鹿茸、马鹿、新西兰赤鹿及驯鹿的蛋白差异。结果:用7.5%分离胶系统分离花鹿茸、新西兰马鹿、马鹿及驯鹿的水溶性蛋白,四者蛋白条带有差异。结论:利用SDSPAGE凝胶电泳法考察不同品种鹿茸的蛋白差异,为不同品种鹿茸的定性研究提供依据和研究基础。

SDS-PAGE凝胶电泳法与田间种植法鉴定辣椒种子纯度的相关性研究

以"奥新早帅"辣椒种子为试材,采用SDS-PADE凝胶电泳与田间种植鉴定2种方法鉴定24份样品纯度。结果表明:SDS-PAGE凝胶电泳与田间种植鉴定的回归方程为:y=7.2818+0.946x,相关系数r=0.851,二者结果显著相关。说明SDS-PAGE凝胶电泳法鉴定"奥新早帅"辣椒种子纯度是可行的,而且是可靠的。

SDS-PAGE凝胶电泳对驴皮胶及常见伪品胶中的蛋白分析研究

目的:研究驴皮胶及常见伪品胶马皮胶和牛皮胶的蛋白凝胶电泳行为。方法:自制3种皮胶,计算出胶率,BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白含量,计算上样量,使上样量为20~30μg。垂直电泳仪进行SDS-PAGE凝胶电泳,采用考马斯亮蓝及银染法显色。结果:3种皮胶的凝胶电泳行为相似,蛋白成分主要集中在分子量大于25 kDa段上,银染法灵敏度更高,可显示较多条带。结论:3种皮胶分子量分布宽泛,具有共同的条带,进一步可用多肽蛋白质谱鉴定技术对各混合物组分进行更深入分析。

几种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法的比较

[目的]对几种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法进行比较。[方法]从凝胶背景颜色、染色时间及灵敏度的角度对6种SDS-PAGE凝胶电泳快速染脱色方法进行比较研究,并对适用于椰子和油棕总蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳的实用方法进行总结。[结果]方法 F最快速,条带清晰,染料及试剂都较少,是一种经济、快速、安全、实用的染色方法,整个过程仅需1 h左右。[结论]试验比较了几种SDSPAGE凝胶电泳染色方法,对进一步开展椰子和油棕蛋白质组学研究具有重要意义。

凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中β-乳球蛋白的含量

建立一种快速、准确测定乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的SDS-PAGE方法。β-乳球蛋白标准溶液在0.238-7.128mg/L范围内呈线性相关(r=0.99),具有良好的重复性(RSD<10%),液态奶及奶粉的检出限分别为24mg/100mL、240mg/100g。通过对β-乳球蛋白的重复性和灵敏度实验,表明SDS-PAGE方法具有操作简单、准确可靠的特点,适用于乳与乳制品中β-乳球蛋白含量的测定。

凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定饲料添加剂溶菌酶二聚体的含量

溶菌酶二聚体标准溶液在0.1~1.0 mg/mL范围内具有良好的线性,线性方程:Y=1.99×10~(-5)X-0.0708,R>0.99。精密度试验结果显示,采用凝胶电泳法对饲料添加剂中溶菌酶二聚体的含量进行测定,其含量为32.19%~34.91%,日内相对标准偏差为1.35%~1.73%,日间相对标准偏差为1.82%,结果表明SDS-PAGE方法测定溶菌酶二聚体具有试验操作简单、结果稳定可靠的特点,适用于饲料添加剂溶菌酶二聚体含量的测定。

聚丙烯酰胺凝胶电泳的快速脱色方法

以牛血清白蛋白为材料进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶固定后,用考马斯亮蓝R-250染色后比较传统脱色液(冰乙酸-甲醇溶液)和不同盐溶液(NACL、KCL、CUCL2)的脱色效果的结果表明:PAGE和SDS-PAGE胶,0.25和0.5MOL·L-1NACL,在70℃(PAGE)、50℃(SDS-PAGE)下脱色,约2￣4H,效果好,灵敏度高,背景低。

SDS-PAGE凝胶电泳在鉴别水解蛋白掺假液态乳中的应用

将不同水解度的水解蛋白按不同比例添加到液态乳中,总蛋白质量分数保持不变,其SDS-PAGE凝胶电泳图中相应电泳条带颜色较空白液态乳浅,宽度较空白液态乳窄,表明SDS-PAGE凝胶电泳法能对以水解蛋白代替乳蛋白进行有效鉴别。将水解蛋白按不同比例添加到合格液态乳中以提高其蛋白质量分数,其电泳图的相应电泳条带颜色深浅与宽度均与空白液态乳一致,表明SDS-PAGE凝胶电泳法能对添加水解蛋白以提高乳蛋白质量分数进行有效鉴别。

变性梯度凝胶电泳法研究我国不同土壤氨氧化细菌群落组成及活性

实验选用了我国3种不同土壤研究土壤硝化活性、硝化细菌数量,并使用变性梯度凝胶电泳(DGGE)的方法研究了不同土壤中氨氧化细菌(AOB)区系变化。通过28d的土壤培养实验研究发现,潮土具有最强的硝化势,几乎100%的铵态氮转化为硝态氮;而红壤中的硝化势最弱,只有4.9%的铵态氮转化为硝态氮。对这3种土壤硝化细菌进行计数发现,3种土壤氨氧化菌数量差异显著,而3种土壤亚硝酸氧化菌(NOB)处于一个数量级。采用氨氧化菌功能基因amoA(氨单加氧酶ammoniamonooxygenase)特异PCR结合DGGE的方法对土壤氨氧化菌区系进行分析。红壤有4个氨氧化菌种属,与潮土和黄泥土没有共同的氨氧化菌种属。4个种属中两个是与潮土和黄泥土亲源性比较远的,特有的氨氧化菌种属,这两个种属与已知的Nitrosospira属的cluster3bz97838和Nitrosospira属的cluster3aAF353263亲源性比较近。潮土有5个氨氧化菌种属,潮土与黄泥土有两个共同的氨氧化菌种属,这两个种属中的一个是潮土和黄泥土特有的,与其他氨氧化菌种属亲源性比较远的氨氧化菌种属,这个种属与已知的Nitrosospira属的cluster3bZ97849亲源性比较近。黄泥土有4个氨氧化菌种属,除了与潮土共有的一个种属是两种土壤特有的氨氧化菌种属外,黄泥土还有一个与其他氨氧化菌种属亲源性比较远的,黄泥土特有的种属,与Nitrosospira属的cluster3aAF353263亲源性很近。3种土壤中分离到的硝化细菌表现出不同的硝化能力。实验结果表明,以amoA基因为目标的PCR-DGGE是比以16SrDNA为目标的PCR-DGGE更有效的研究氨氧化菌种群的方法;3种土壤的氨氧化菌种群差异显著,尤其是红壤的氨氧化菌种群与另外两种土壤差异明显,这种差异可能与红壤的低pH条件对氨氧化菌种群的长期选择有关;3种土壤中的硝化活性与土壤中的硝化细菌数量没有显著相关,可能由于3种土壤差异显著的土壤环境对硝化活性的影响造成。因此在对不同土壤硝化细菌进行研究时不仅需要对硝化细菌数量进行研究,还需要研究不同土壤中硝化细菌的种属及不同土壤环境条件对硝化细菌硝化活性的影响。

燕窝的聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别

燕窝为雨燕科动物金丝燕ＣｏｌｏｃａｌｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａＬ．及同属多种动物用唾液与羽绒等混合凝结所筑成的干燥巢窝。随着需求量的日益增加，纯天然燕窝供不应求，用毛燕或用猪皮、白木耳、蛋清、动物骨胶以及海藻等伪制而成的加工品也不少。这些加工品已不是天...

免疫胶体金法与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测儿童腹泻A组轮状病毒

目的及早发现腹泻患儿中轮状病毒感染状况,为合理选用轮状病毒检测方法及其预防控制提供参考依据。方法采用胶体金法对武汉市儿童医院部分腹泻患儿进行轮状病毒检测,与聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)进行比较研究。结果对280份儿童腹泻患儿检测,胶体金法和PAGE法阳性检出率各为79.64%和48.93%,两者比较差异有显著性(P<0.05);以聚合酶链反应(PCR)为检测最终标准,胶体金法敏感性和PAGE特异性分别达95.2%和95.8%。结论胶体金法检测儿童腹泻轮状病毒敏感性高,在临床中可作为简便快速的重要筛检手段,PAGE能明显提高其鉴别诊断能力。

琼脂糖凝胶电泳法测定血清中各种脂蛋白胆固醇

对琼脂糖凝胶电泳法同时测定血清极低密度脂蛋白（ VLDL）、低密度脂蛋白（ LDL）、高密度脂蛋白（ HDL）和脂蛋白 (a)[Lp(a)]的胆固醇 [即 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C]含量的方法进行评价。方法采用 Helena REP全自动快速电泳系统分离血清 VLDL、 LDL、 HDL和 Lp(a)，然后结合胆固醇酶染色法同时测定 VLDL- C、 LDL- C、 HDL- C和 Lp(a)- C的含量。分析了该法的精密度、准确度和干扰因素，并将该法与传统方法如测定 HDL- C的磷钨酸-镁沉淀法（ PTA- Mg2＋法）、测定 LDL- C的聚乙烯硫酸沉淀法（ PVS法）及测定 Lp(a)的免疫透射比浊法（ ITA法）进行比较。结果电泳法测定 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的批内 CV分别为 5.16％～ 7.46％、 1.26％～ 3.28％、 3.78％～ 5.86％；批间 CV分别为 8.35％～ 11.25％、 2.78％～ 4.08％、 4.23％～ 6.36％。检测线性范围总胆固醇为 1.04～ 10.35 mmol/L，基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。 VLDL- C、 LDL- C和 HDL- C的平均回收率分别为 90.3％、 94.3％和 89.6％。电泳法与传统法测定 LDL- C、 HDL- C的相关系数（ r）分别为 0.9609、 0.9557。电泳法测定 Lp(a)- C与 ITA法测定 Lp(a)的 r为 0.9235。以该法检测北京地区 98例健康人， HDL- C、 VLDL- C、

用SDS(十二烷基磺酸钠)凝胶电泳法测定水解丝蛋白的分子量

用改进的ＳＤＳ凝胶电泳法对实验室生产的水解丝蛋白产品的分子量进行了测定。测定表明该产品分子量分布在４３０００～２９００的范围，分子量在１００００以下的低分子蛋白成分含量高于５０％。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法对猪皮水解胶原蛋白的分离

胶原由于其独特的结构、化学及生物学性质 ,被人们广泛用于食品、化妆品、医药等工业领域。因此 ,人们对胶原和胶原蛋白的水解产物进行了广泛深入的研究。其中胶原蛋白的水解产物的分离、分析 ,对进一步揭示水解作用机理、控制水解产物分子量的大小及对水解产物中不同分子量大小的各个组分的分离纯化具有重要意义。本文利用SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳法对猪皮水解胶原蛋白进行分离 ,在选择恰当的缓冲溶液体系、凝胶体系的基础上 ,对凝胶浓度、样品的浓度、进样量和染色的方法进行了大量的实验。结果表明采用SDS -聚丙烯酰胺电泳对胶原蛋白水解产物进行分离分析 ,在浓缩胶浓度3 % ,分离胶浓度 10 %的条件下 。

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的 采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法 取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果 对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x+1.815。结论 该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb

TRICINE-SDS-PAGE电泳法用于野生全蝎粉鉴定的研究

目的:探索不同产地野生全蝎粉通过TRICINE-SDS-PAGE电泳法鉴别的可行性。方法:用TRICINE-SDS-PAGE系统对全蝎蛋白提取液进行电泳,用Quantity One软件确定各谱带对应的蛋白质分子量。结果:四种产地的全蝎粉用TRICINE-SDS-PAGE法可获得数条分辨率较高且大体位置相当的蛋白质谱带,其对应分子量大体为:42.000,33.515,27.509,25.524,21.615,17.640,15.839,13.994,11.318,10.000,8.357 kDa。结论:TRICINE-SDS-PAGE电泳法可用于不同产地全蝎粉的真伪鉴别。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法的改进

针对常规的SDS-PAGE染色脱色耗时长,还需使用甲醇的缺点,对传统的SDS-PAGE染色脱色进行了改进,用无毒的乙醇替代有毒的甲醇.改进后的SDS-PAGE染色脱色具有耗时短,且不需要使用甲醇的优点.

猪6种血清蛋白质多态型一次淀粉凝胶电泳测定法

通过对江西１２个地方猪种７３９头猪的血清样品进行试验，摸索出一种简便、可靠，而且能同时测定血清淀粉酶（Ａｍ）、血液结合素（Ｈｐｘ）、铜蓝蛋白（Ｃｐ）、转铁蛋白（Ｔｆ）、前白蛋白（Ｐａ）和后白蛋白（Ｐｏ）等６种蛋白质多态型的淀粉凝胶电泳法。