非连续型垂直板SDS-PAGE电泳技术分析蛋白质的方法

电泳技术已广泛应用于蛋白质、核n酸等生物分子的分析检测,电泳技术的类型很多,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术是分析蛋白质的常用方法之一。文章主要对非连续型垂直板SDS-PAGE电泳技术在分析蛋白质的研究中所涉及的原理、影响电泳效果的主要因素进行综述。

SDS-PAGE蛋白电泳技术在F_1代杂交种纯度鉴定中的应用

随着市场的需要 ,商品种子量越来越大 ,而对杂交种质量问题不容忽视 ,我们在实际工作中对中椒四号 ,中椒五号 ,京欣一号 ,金花宝四个杂交种纯度鉴定尝试了大量的同工酶电泳方法 ,包括 POX,EST,ADH,MDH,ISH,PGM,PGI等同工酶电泳图谱中均未找到父母本与一代杂种的鉴别标记。而在种子蛋白质 SDS- PAGE电泳图谱中找到了一代杂种与父母本的鉴别带 ,并利用这个鉴别带进行了杂交种纯度鉴定。这种鉴定方法的准确性在田间对照纯度鉴定中得到确认 。

SDS-PAGE凝胶电泳技术与蛋白质组学在体育科学中的应用

随着生物基因组序列的研究不断深入,研究人员基本完成了人类的基因测定图序列,同时也基本掌握了基因编码过程,与此同时多数蛋白质组学研究提出观点,即基因作为生物遗传信息的携带者,它并不能充分地展现人体以及组织或细胞的完全功能,最终生命的执行者则是基因表达产物——蛋白质,诚然生物体蛋白质的合成是受多种因素影响的,从蛋白质水平研究生物功能够更准确地反映细胞、组织亦或是有机体的动态改变,所以,蛋白质组学把基因组学作为基础向后基因组时代迈进。

种子贮藏蛋白电泳技术在棉花品种鉴定中的应用

实验采用了50个经过长期大面积种植的棉花种质材料,利用改良的种子贮藏蛋白电泳技术进行棉花品种的鉴定研究。改良后的种子蛋白提取方案,克服了棉花种子中含油脂较多影响电泳结果的问题;采用连续体系的阴极电泳,使电泳周期缩短为2.5h,简化了操作步骤,重复性好,谱带清晰,有较高的多样性。

基于电泳技术的电子纸研究进展

简要介绍了基于电泳技术的电子纸在世界各国的发展状况和工作原理,并在此基础上分析了目前所存在的两种电泳显示各自的优缺点,阐述了影响电泳显示的因素,并展望了电子纸广泛的应用前景。

显微镜电泳技术研究聚磷氯化铝的混凝特性

采用显微电泳技术和混凝实验研究聚磷氯化铝对１００ｍｇ／Ｌ蒙脱土悬浊水的混凝过程。描述了聚磷氯化铝的电泳特征及其混凝作用特性，并在较低的、相同的碱磷化度Ｂ＿ｐ（Ｂ＿ｐ＜１．５）基础上比较聚磷氯化铝与普通聚合氯化铝的混凝特征过程。结果表明，聚磷氯化铝的混凝效能优于聚合氯化铝。

蛋白质电泳技术的改良及其应用效果

以玉米杂交种及部分自交系为材料，利用改良的蛋白质电泳技术进行纯度鉴定。改进后的技术，鉴定周期缩短近一倍，成本显著降低，技术操作可行性强，重复性好。检测数据经田间种植鉴定、相关性和一致性分析证明，蛋白质电泳和田间种植鉴定两种检测方法结果一致，电泳技术可以作为品种纯度鉴定的可靠方法。

山黧豆叶片蛋白质双向电泳技术的建立

以山黧豆叶片为材料,比较分析了蛋白质的不同提取方法,在此基础上着重于样品制备.对IPG胶条的选择,第一向等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电泳程序及参数、染色方法等相关技术进行了比较和条件优化.结果显示:采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质,裂解液中加入Tris-base作为蛋白酶抑制剂,等电聚焦电泳时延长低电压的电泳时间(30 V1、2 h,500 V1、h,1 000 V2、h)以促进盐离子泳出的方法对山黧豆叶片蛋白质进行双向电泳,并用考马斯亮蓝和银染复合染色法进行凝胶染色,能够获得蛋白点清晰的双向电泳图谱,说明用优化后的方法建立起的山黧豆叶片蛋白质双向电泳技术,蛋白质样品制备质量好,电泳分辨率高,完全适合于进一步的蛋白质组学研究.

毛细管电泳技术及其在作物贮藏蛋白研究中的应用

毛细管电泳 (Capillary Electrophoresis,CE)是近年发展起来的一种新的分离技术 ,已在蛋白质、氨基酸、核酸等的分离分析方面显示出极大的优越性。目前 ,国内外都开展了毛细管电泳技术用于作物贮藏蛋白分离分析的研究 ,并取得了很大的进展。本文介绍了毛细管电泳技术的发展概况、分离原理及其主要模式 ,总结了目前国内外在小麦、大麦、燕麦等麦类作物贮藏蛋白毛细管电泳分离中的研究进展 ,并展望了其应用前景。

人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳技术研究

目的 :利用人类精子蛋白质组分析的双向蛋白电泳技术 (2 DE)建立正常精子的蛋白质图谱。方法 :比较不同蛋白质提取方法和上样量、不同的第一向等点聚焦方法所得图谱的差别 ,并初步建立人类正常精子的蛋白质图谱。结果 :用蛋白质提取方法一制得的样本电泳后有 6 70～ 70 3个蛋白质斑点 ;方法二所得样本电泳后仅有 194～ 2 10个蛋白质斑点。蛋白质提取方法一所制样本进行载体两性电解质pH梯度 SDS电泳技术 (ISO DALT)得到约 2 80～ 30 0个蛋白质斑点 ,用固相pH梯度 SDS电泳技术 (IPG DALT)得到多达 70 0个蛋白质斑点。结论 :采用蛋白质提取方法一制备精子蛋白质进行IPG DALT电泳的方法适用于建立精子全细胞蛋白质谱。

多通道流动电泳技术及其在蛋白质、酶和抗体纯化中的应用研究

提出一种新型制备电泳方法即多通道流动电动电泳技术,建立了微机控制的电泳设备,考查了操作条件对设备分离效率的影响。应用该技术进行牛血清清蛋白（BSA）-牛血红蛋白（HBB）混合物的连续分离,每小时从含BSA、HBB各37.0mg的蛋白质混合物中分离出13.6mg的BSA和20.0mg的HBB。应用该技术进行尿激酶粗品的纯化,可将其比活力由4000IU/mg提高到4×104IU/mg以上,产量在10×104IU/h以上。将该技术与（NH4）SO4沉淀方法结合,从15ml免疫鼠血清中分离出12.5mg高纯度尿激酶抗体IgG,产量为2.1mg/h。上述结果证明多通道流动电泳技术具有分离速度快、精度高和可操作性好等优点,在生物产品分离领域中具有广阔的应用前景。

全自动毛细管电泳技术在筛查地中海贫血中的临床诊断价值

目的探讨全自动毛细管电泳技术在地中海贫血筛查中的临床诊断价值。方法选取2008年9月—2012年4月我院筛查的380例患者作为研究对象,分别采用琼脂糖凝胶电泳技术和全自动毛细管电泳技术对地中海贫血进行筛查,以通过PCR基因诊断技术进行确诊的结果为参照,比较两种筛查技术的检出率和血常规检查结果,以明确其临床价值。结果采用PCR基因诊断技术在380例患者中共有108例确诊为地中海贫血。对于α-地中海贫血,全自动毛细管电泳技术的检出率为90.91%,明显高于凝胶电泳技术的检出率65.91%;对于β-地中海贫血,毛细管电泳技术和凝胶电泳技术的检出率分别为94.23%和71.15%,全自动毛细管电泳技术检出率明显高于凝胶电泳技术;地中海贫血的MCV、CH均值相对于异常血红蛋白病HbE、HbCS值稍低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论全自动毛细管电泳技术在地中海贫血筛查中检出率高,具有显著的优越性,能够为我国地中海贫血诊断工作提供更有力的技术保障。

同工酶电泳技术在品种纯度检验中的应用研究

本文将同工酶电泳技术,从样品制备到图谱分析的设备和技术进行全面改进,并以北京市正在推广和将要推广的玉米杂交种子及其亲本,为品种纯度检验的主要对象,进行酯酶同工酶酶谱纯度检验,达到了准确、简便、快速和经济的实用目的。

毛细管电泳技术及其在农药残留检测上的应用

简要介绍了毛细管电泳技术的原理、特点以及检测方法,探讨了毛细管电泳在残留农药检测领域的应用,并对该技术的发展前景进行了展望。

毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变

目的 探讨利用毛细管电泳技术快速检测 p5 3基因点突变的临床应用价值。方法 采用毛细管电泳作 SSCP分析 ,检测 2 0例结肠癌肿瘤标本 p5 3基因第 7外显子 PCR扩增产物 ,并与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果进行比较 ,最后用 DNA序列测定判断其准确性。结果 2 0例结肠癌标本中 ,毛细管电泳技术检测出 5例标本( Ca4,Ca6,Ca7,Ca8,Ca14)有突变 ,而凝胶电泳结合银染技术仅检出 4例标本 ( Ca4,Ca6,Ca7,Ca14)有突变 ,测序证实经毛细管电泳所检出的 5例标本均存在点突变。结论 对于 PCR产物的单链构象多态性分析 ,毛细管电泳技术是一种更加快速、简便、敏感的方法 。

等位酶淀粉凝胶电泳技术中的几个应引起重视的问题

本文总结了我们在用淀粉凝胶电泳技术进行等位酶分析的实验过程中的一些经验和教训，主要结论是：１）尽管材料不同，对于不同的酶系统，用特定的缓冲液系统常能获得比较理想的效果，如ＤＩＡ，ＧＰＩ，ＨＥＸ，ＳＯＤ和ＴＰＩ用Ｓ６（Ｓｏｌｔｉｓ等，１９８３）；ＡＭＰ用Ｓ８；ＭＤＨ用Ｓ９和ＳＫＤ用Ｗ２（Ｗｅｎｄｅｌ和Ｗｅｅｄｅｎ，１９８９）等。２）用磷酸缓冲液配制ＡＭＰ的染色配方较其它配方效果好。３）当胶染时，使用琼脂替代琼脂糖，染色效果不变而成本更低，谱带扩散更慢。４）不同的提取液可能适用于不同的酶系统，如磷酸ＰＶＰ提取液（Ｓｏｌｔｉｓ等，１９８３）不适用于石荠苎的ＧＰＩ的提取。５）正确选择凝胶和电极缓冲液，Ｓ１虽然适用面广，但效果不一定好，对于位点多和等位基因丰富的材料尤其应警惕，因Ｓ１可能掩盖样品之间的差异。