荨麻疹患者过敏原及其心肌酶谱联合检测的临床研究

目的探究荨麻疹患者过敏原与心肌酶谱的关系,明确荨麻疹患者的心肌损害情况。方法选择本院皮肤科荨麻疹患者244例作为研究对象,同时选择本院健康体检者及幼儿入托查体者共225例作为对照,采用免疫印迹法进行过敏原检测,采用速率法进行心肌酶谱检测。结果244例荨麻疹患者中过敏原阳性率为69.7%,心肌酶谱升高率为31.1%。在过敏原阳性等级中,1~4级心肌酶谱升高率分别为27.3%、40.0%、53.8%、70.0%,5级以上升高率为100%。对照组225例中,过敏原阳性仅4例,并且分级都在1级以下;心肌酶谱升高率为7.1%,仅AST、CK轻度升高,禁酒或适当休息后正常。荨麻疹患者心肌酶谱中AST、CK、CK-MB较对照组升高不明显,差异无统计学意义(P>0.05),LDH、HBDH明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论荨麻疹患者心肌酶谱升高率随过敏原等级升高而递增,LDH和HBDH数值升高明显,这说明荨麻疹患者过敏原等级越高,对心肌的损害程度越高。通过对过敏原与心肌酶谱的联合检测,为临床诊治提供实验室依据,意义重大。

利用酶谱法测定基质金属蛋白酶-2判断肝癌侵袭转移性的研究

通过酶谱法对肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织、癌旁肝组织及血浆中基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）含量进行研究，并与反应ＨＣＣ侵袭转移性的病理指标间进行统计学分析。结果显示ＨＣＣ癌组织、癌旁肝组织及血浆中均存在ＭＭＰ－２；ＨＣＣ癌组织及血浆中ＭＭＰ－２含量升高与ＨＣＣ侵袭转移性有关；ＨＣＣ癌组织ＭＭＰ－２含量高于其癌旁肝组织含量可作为通过ＭＭＰ－２判断ＨＣＣ侵袭转移的指标。

DNA酶裂解-纳米金共振瑞利散射光谱法测定痕量Cu^(2+)

在pH 7.0HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)缓冲溶液中和0.19mol.L-1 NaCl存在下,单链底物DNA(SS)和酶链DNA(ES)在80℃杂交形成双链DNA(dsDNA)。Cu2+可切割dsDNA中的底物链释放出单链DNA(ssDNA),此ssDNA与金纳米粒子(NG)作用形成NGssDNA结合物不被NaCl聚集,而未保护的NG聚集形成较大粒径的聚集体(NGA),在627nm处有一个较强的共振瑞利散射峰。随着Cu2+浓度的增大,该共振瑞利散射峰降低,其降低值ΔI与Cu2+浓度在15～1 250nmol.L-1范围呈线性关系,其回归方程为ΔI=0.17c-2.3,线性相关系数为0.989 5,检出限为8nmol.L-1。据此建立了一个高灵敏、高选择性、简便测定Cu2+的共振瑞利散射光谱分析法。该法用于水样中Cu2+的检测,结果满意。

高效液相色谱法与酶免疫法快速测定鲫鱼中残留显/隐色孔雀石绿的比较

采用高效液相色谱（HPLC）法与酶免疫法（EIA）两种方法检测鲫鱼中残留显／隐色孔雀石绿的含量，对这两种分析方法所得的回收率进行了比较，当添加浓度在5．0～50．0μg·kg^-1时，其中HPLC法所测得的回收率为68．2％-90．0％，相对标准偏差小于7．0％，检出限为2μg·kg^-1；EIA法所测得的回收率为72．4％～92．3％，相对标准偏差小于6．8％，检出限为1μg·kg^-1；两种方法均具有高效、快速、稳定的特点，能满足日常检验工作的需要。

酶谱法测定肝星状细胞合成的基质金属蛋白酶活性

目的 :建立检测肝星状细胞 (HSC)合成的基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的方法。方法 :用含SDS 明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳为基础的酶谱法 ,检测体外培养的HSC所合成的MMPs活性。结果 :酶谱法能灵敏地检测到HSC细胞内和分泌到培养基中的MMP 2和MMP 9,培养基中MMP 2活性高于MMP 9,并观察到药物作用以后酶活性的改变。结论 :酶谱法是研究HSC调节肝纤维化过程中细胞外基质 (ECM )代谢的有效手段。

荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测

目的:建立荧光原位明胶酶谱法,观察纤维化和急性损伤肝组织明胶酶活性表达特点.方法:复制二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型与N-乙酰半乳糖胺/脂多糖急性肝损伤模型,取其肝组织冰冻切片,将绿色荧光明胶底物附着于肝组织冰冻切片上,置于酶反应缓冲液中避光孵育8-24h;再以Hoechst液复染细胞核,在荧光显微镜下分别以蓝光激发拍摄明胶酶绿色荧光和紫光激发拍摄细胞核蓝色荧光,并将图像重叠.结果:成功建立荧光原位明胶酶谱法.正常大鼠肝组织仅在肝窦周围少量明胶酶表达,纤维化及急性肝损伤肝组织肝窦处明胶酶活性增强,纤维化肝组织纤维间隔处明胶酶活性也较强.结论:荧光原位明胶酶谱法具有灵敏,直观,简便的优点,可较好分析肝组织明胶酶活性水平与表达位置,对研究肝脏病理与药理具有重要意义.

液相色谱-质谱联用和酶增强免疫分析法测定人全血环孢素A浓度比较

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人全血环孢素A(CsA)浓度,并与酶增强免疫分析(EMIT)法进行相关性分析。方法以乙腈为沉淀剂,环孢素D(CsD)为内标,Waters Atlantisd C18(3.9 mm×150 mm,3μm)色谱柱为分析柱,10 mmol·L^(-1)醋酸铵乙腈-10 mmol·L^(-1)醋酸铵为流动相进行梯度洗脱,质谱方法应用电喷雾电离源(ESI源),采用多反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应为CsA m/z 1 220.0→m/z 1 202.8,内标CsD m/z1 216.8→m/z 119.4。分别采用LC-MS/MS法和EMIT法测定124例患者服用CsA后的全血药物浓度,比较两种方法测定结果的相关性。结果以LC-MS/MS法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)作线性回归方程,Y=0.999 3X+20.387(r=0.983,n=124,P<0.05),EMIT法测全血CsA的浓度较LC-MS/MS法偏高。结论 LC-MS/MS法和EMIT法测定人全血CsA的浓度相关性良好,在CsA药物浓度监测中,对不同测定方法的测定差异,应予以关注并作相应调整。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法检测天然牛黄与酶促牛黄中胆固醇含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,测定并比较天然牛黄与酶促牛黄中胆固醇的含量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-异丙醇(1∶1)为流动相,流速1.0 mL.min-1;漂移管温度67.5℃,气体流速1.7 L.min-1。结果胆固醇浓度在4.0～20.0μg.mL-1范围,浓度对数(logC)与峰面积对数(logA)呈良好的线性关系logA=1.541 2logC-2.525(r=0.999 2);低、中、高浓度平均回收率分别为98.41%,100.04%,96.46%,RSD分别为0.63%,1.67%,1.03%。结论该法简便、准确,专属强,可用于牛黄、牛黄替代品及其制剂的质量控制。

微分脉冲极谱法研究稀土离子对乳酸脱氢酶活性的影响

根据前文黄瓜根系伤流液（经Ｌａ３＋，Ｅｕ３＋处理）中微量Ｌａ３＋，Ｅｕ３＋明显影响氨基酸代谢的结果，用记时电流法研究了稀土对氮同化过程中硝酸还原酶（ＮＲ）和谷氨酸脱氢酶（ＧＤＨ）活性的影响，酶活性的变化以辅酶ＮＡＤＨ氧化电流在反应中的衰减速度来表示。用微分脉冲极谱法研究稀土离子对丙酮酸转化为乳酸反应中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的影响，以反应产物ＮＡＤ＋的还原电流的大小表示酶活性的变化。研究结果表明Ｌａ３＋在低浓度（＜５μｍｏｌ／Ｌ）下对酶活性有微弱的促进作用，其他稀土离子Ｃｅ３＋，Ｅｕ３＋，Ｄｙ３＋，Ｙｂ３＋在浓度稍高时（≥５μｍｏｌ／Ｌ）都显示抑制作用。对比光度法的结果以及反应动力学参数Ｖｍａｘ和Ｋｍ均证明稀土离子对此体系中ＬＤＨ活性有抑制作用。

高效弱阳离子交换色谱法对脲还原变性溶菌酶的折叠研究

用高效弱阳离子交换色谱(HPWCX)对脲还原变性溶菌酶(Lys)进行了复性研究.在流动相中脲浓度固定为4.0mol?L-1和选用对天然态蛋白有稳定作用的硫酸铵为盐或置换剂时,在蛋白浓度为15.0～50.0mg?mL-1时,HPWCX法比稀释法活性回收率高.为了提高Lys的质量及活性回收率对所用色谱条件进行了优化研究,当蛋白起始浓度为20.0mg?mL-1时,Lys的质量回收率和活性收率分别为97.8%和95.4%.表明此种方法简便且有可能对其他还原变性蛋白的复性具有通用性.

紫外光谱法研究7-羟基香豆素与溶菌酶的相互作用

目的:采用紫外光谱法研究在模拟人体生理条件下7-羟基香豆素与溶菌酶(LYSO)之间的相互作用。方法:采用紫外光谱法研究7-羟基香豆素与溶菌酶的相互作用。结果:7-羟基香豆素与溶菌酶的结合常数K=1.12×104L.mol-1,共存金属离子(Zn2+、Cu2+等)7-羟基香豆素对与LYSO的相互作用有一定的影响。结论:Zn2+、Cu2+的存在使7-羟基香豆素与溶菌酶的结合常数增加;而Mg2+、Fe3+、Al3+的存在使7-羟基香豆素与溶菌酶的结合常数减少。

化学发光法与免疫比浊法在急性心肌梗死患者心肌酶谱检测中的比较

目前临床上有多种检测心肌酶谱的方法,但比较不同方法检测急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)心肌酶谱准确率、敏感度和特异度研究较少见。

利用酶谱法测定Ⅳ型胶原酶判断大熊猫自发脂肪肉瘤侵袭转移性的研究

为探讨Ⅳ型胶原酶含量及活性比值判定大熊猫自发脂肪肉瘤侵袭、转移性的意义 ,用明胶酶谱法和英国产UVP的GelwordsIDintermeditaesversion 3 .0 1软件对 1例熊猫脂肪肉瘤组织和肿瘤旁组织进行酶活性分析。发现肿瘤组织中MMP 2的 72ku和 62ku均显著高于肿瘤旁组织 ,MMP 9在 2种组织中的差异性不大 ;肿瘤旁组织中MMP 2的活性比值可作为脂肪肉瘤侵袭、转移的有效指标 ;明胶酶谱法作为Ⅳ型原酶的检测手段是可行的。

样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响

目的研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响。方法采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性。结果酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg。统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05)。结论酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究。

酶谱法测定肝星状细胞合成的明胶酶活性

目的建立检测肝星状细胞(HSC)合成的明胶酶(MMP-2,MMP-9)活性的方法。方法用含SDS-明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳为基础的酶谱法,检测体外培养的HSC所合成的明胶酶活性。结果酶谱法能灵敏地检测到HSC分泌到培养基中的MMP-2和MMP-9,培养基中MMP-2活性高于MMP-9,并观察到药物作用以后酶活性的改变。结论酶谱法是研究HSC调节肝纤维化过程中细胞外基质(ECM)代谢的有效手段。

反相高效液相色谱法测定酶促转化法制备的S-腺苷甲硫氨酸

反相高效液相色谱法测定酶促转化法制备的S-腺苷甲硫氨酸，采用Luna C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为100％0．02mol／L乙酸铵，用乙酸调pH值至4．0；流速为1．0mL／min，用二极管阵列检测器检测，检测波长为254nm，在200～800μg,／mL范围内线性良好（r=0．9997），检出限为2．3ng。

极谱氧电极法测定过氧化氢酶的活性

过氧化氢酶的活性国内主要采用分光光度法测定。用极谱氧电极法测定酶活性操作简便,测试快速,灵敏度高。此法测的是溶液中氧的变化,故不受被测液物理状态如澄明度、粘度、颜色等干扰,可用于临床分析。

单纯疱疹病毒抗体的酶联免疫吸附——单扫描示波极谱法测定

报道了用辣根过氧化物酶为标记酶的ELISA—LSP法测定单纯疱疹病毒抗体(HSV—Ab).研究了测定的最适条件;测定了型共同性单克隆抗体,其灵敏度为ELISA的2倍,线性范围比ELISA宽2个滴度;对40个杂交瘤细胞系进行单克隆筛选,测出的阳性克隆率(75%)高于ELISA所测值(72.5%);对阳性克隆的分型结果与ELISA一致,此法灵敏、可靠、易实现.