SEMA3B-AS1在食管鳞状细胞癌中的诊断价值

目的 探讨SEMA3B-AS1在食管鳞状细胞癌鉴别诊断中的价值及其临床意义。方法 收集2018年9月至2019年6月徐州医科大学附属医院入院确诊的42例食管鳞状细胞癌和31例食管良性疾病患者的血清标本。使用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测食管鳞状细胞癌和食管良性疾病患者血清SEMA3B-AS1相对表达水平,分析其与患者临床病理参数的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清SEMA3B-AS1在食管鳞状细胞癌的鉴别诊断价值。结果 食管鳞状细胞癌患者血清SEMA3B-AS1相对表达水平明显高于食管良性疾病患者(P<0.05);血清SEMA3B-AS1鉴别食管鳞状细胞癌和食管良性疾病的曲线下面积为0.899(95%CI 0.832~0.967,P<0.001),灵敏度为76.47%,特异度为93.55%。高表达组与低表达组肿瘤最大径、淋巴结转移情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血清SEMA3B-AS1是一项潜在的鉴别食管鳞状细胞癌与食管良性疾病患者的标志物,血清SEMA3B-AS1对食管鳞状细胞癌的鉴别诊断具有较高的临床价值。

lncRNA RAB11B-AS1上调miR-628-3p抑制人胃癌细胞系增殖和迁移

目的探讨lncRNA RAB11B-AS1对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂敏感性的影响及分子机制。方法建立顺铂耐药胃癌细胞系(HGC-27/DDP),将其分为对照组、si-NC组和si-RAB11B-AS1组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RAB11B-AS1和miR-628-3p的表达;流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测RAB11B-AS1和miR-628-3p的靶向关系。结果0.2、0.4 mg/L顺铂处理后HGC-27细胞存活率显著降低(P<0.05),而0~0.4 mg/L的顺铂处理后HGC-27/DDP细胞存活率无统计学意义。HGC-27和HGC-27/DDP细胞中RAB11B-AS1表达水平显著升高(P<0.05),且HGC-27/DDP细胞中RAB11B-AS1表达水平显著高于HGC-27细胞(P<0.05)。lncRNA RAB11B-AS1干扰表达,G0-G1期细胞所占比例显著升高,S期细胞所占比例显著降低(P<0.05);细胞存活率显著降低,迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。RAB11B-AS1靶向调控miR-628-3p。结论LncRNA RAB11B-AS1可通过上调miR-628-3p表达抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭,并提高癌细胞对顺铂的敏感性。

人参皂苷Rg3调控LncRNA CDKN2B-AS1对胃癌细胞抑制作用的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3调控长链非编码RNA(LncRNA)CDKN2B-AS1对胃癌细胞的抑制作用。方法:选用胃癌细胞系SGC-7901,在培养液中加入人参皂苷Rg3的胃癌细胞确定为研究组,同时未加药物培养的胃癌细胞为对照组。培养72 h后用RT-PCR法检测细胞中LncRNA CDKN2B-AS1、神经钙粘蛋白(N-cadherin)、上皮钙粘蛋白(E-cadherin)、血管内皮生长因子(VEGF)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达水平;用免疫印迹法检测细胞中细胞外调节蛋白激酶1/2 (ERK1/2)、磷酸化激活的ERK1/2 (p-ERK1/2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平;用MTT试剂盒检测2组细胞的增殖抑制率;用CCK-8试剂盒检测2组细胞增殖水平。结果:与对照组比较,研究组细胞LncRNA CDKN2B-AS1、VEGF、N-cadherin、Bcl-2 mRNA及ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-9表达降低(P<0.05);Bax及E-cadherin m RNA表达升高(P<0.05);细胞增长抑制率升高(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05)。结论:在胃癌细胞的培养过程中加入人参皂苷Rg3能够有效抑制癌细胞的增殖与上皮间充质转化(EMT),为进一步临床试验提供可靠的理论基础。

LncRNA PCED1B-AS1调控NLRP3促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌的机制研究

目的研究长链非编码RNA PCED1B-AS1调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLR family pyrindomain containing 3,NLRP3)对巨噬细胞清除结核分枝杆菌和分泌炎症因子的影响。方法在巨噬细胞RAW264.7中转染pcDNAPCED1B-AS1,并用结核分枝杆菌感染,qRT-PCR方法检测PCED1B-AS1和TNF-α、IL-6 mRNA水平,用菌落形成实验检测巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除作用,Western blot方法检测细胞中NLRP3蛋白表达水平。将NLRP3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和pcDNA-PCED1B-AS1共转染到巨噬细胞中,用结核分枝杆菌感染,同样检测细胞中TNF-α、IL-6 mRNA水平和菌落量。结果结核分枝杆菌感染后的巨噬细胞中PCED1B-AS1水平降低,TNF-α、IL-6 mRNA水平升高。转染pcDNA-PCED1B-AS1后的巨噬细胞经过结核分枝杆菌感染以后,细胞中PCED1B-AS1、TNF-α、IL-6 mRNA水平升高,形成的菌落量减少,细胞中NLRP3蛋白表达水平升高。NLRP3 siRNA可以逆转过表达PCED1B-AS1对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中TNF-α、IL-6 mRNA表达和菌落量形成的影响。结论上调PCED1B-AS1促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌,诱导细胞表达TNF-α、IL-6 mRNA的机制与上调NLRP3表达有关。

Nrp1、Nrp2及SEMA3F在口腔癌组织及TCa、ACC细胞系中的表达及其可能的作用

目的研究SEMA3F及其受体Nrp1和Nrp2在口腔癌组织和细胞(ACC2,ACCM和TCa)中的表达情况,并推测其在口腔癌生成中的可能意义。方法应用RT-PCR和Western bloting以及免疫组化法检测SEMA3F、Nrp1及Nrp2在口腔癌(ACC2,ACCMand TCa)组织和细胞中的表达情况。结果在所有口腔癌组织和癌细胞中均可检测到Nrp1和Nrp2的表达,但Nrp2相对表达较弱。Western bolting、RT-PCR提示Nrp1呈高表达,Nrp2及SEMA3F均表达较低。在免疫组织化学中显示癌及癌周组织中Nrp1均呈高表达,且癌巢中的表达明显高于癌间隙组织,Nrp2及SEMA3F呈较弱表达。结论提示在肿瘤的发展进程中,Nrp1可能对肿瘤本身的发生,增殖及肿瘤的血管生成均可能起到了重要的作用。

SEMA 3A及其受体NRP-1及Plexin A1在口腔癌中的表达及其可能的作用

目的研究Semaphorin3A(SEMA3A)及其受体Neuropilin1(NRP1)和PlexinA1在口腔癌组织和细胞(ACC2,ACCM和TCa)中的表达情况,并推测其在口腔癌生成中的可能意义。方法应用RT-PCR和Western bloting以及免疫组织化学方法检测SEMA3A、NRP-1及Plexin A1在口腔癌(ACC2,ACCM和TCa)组织和细胞中的表达情况。结果在所有口腔癌组织和癌细胞中均可检测到NRP-1和Plexin A1的表达,但SEMA3A相对表达较弱。Western bloting、RT-PCR提示NRP-1,Plexin A1呈高表达,而SEMA3A表达较低。在免疫组织化学中显示癌及癌周组织中NRP-1均呈高表达,且癌巢中的表达明显高于癌间隙组织,SEMA3A呈较弱表达。结论三种不同头颈肿瘤及细胞系中NRP-1,Plexin A1表达均较高,提示在肿瘤的发展进程中,Plexin A1可能对肿瘤本身的发生,增殖及肿瘤的血管生成均可能起到了重要的作用,这种作用通过其它的Semaphorin家族成员实现。

大鼠海马突起坍塌蛋白Sema3A及其受体neuropilin-1 mRNA的表达

目的探讨大鼠海马Sema3A及其受体neuropilin-1(NP-1)mRNA在发育过程中表达的规律。方法采用RT-PCR方法检测大鼠海马发育不同阶段Sema3A及其受体NP-1 mRNA的表达。结果Sema3A电泳条带灰度呈下降趋势,在胚胎期、新生期有较高的表达,幼年期、成年期和老年期表达较弱。NP-1电泳条带在大鼠海马发育的各个时期均有较高的表达,以胚胎期最高,新生期表达相对其他时期弱,但在幼年期、成年期和老年维持较高表达水平。结论大鼠海马在胚胎期和新生期是非目的性突起坍塌的活跃期,幼年、成年和老年期处于相对休眠期;NP-1始终处于高表达状态,可能参与神经退行性疾病的发生。

Sema3A/Nrp1信号轴在慢性牙周炎牙周组织中的表达及在牙周骨质破坏中的作用

目的:研究轴突导向蛋白3A(semaphorins3A,Sema3A)及其受体神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,Nrp1)在慢性牙周炎发生发展中的作用。方法:20只SD大鼠随机分为2组(n=10),实验组建立慢性牙周炎模型,对照组常规饲养,8周后处死。micro-CT测量大鼠釉牙骨质界到牙槽嵴顶距离(CEJ-ABC),免疫组化染色计算Sema3A/Nrp1阳性染色积分光密度,并进行相关性分析。门诊收集慢性牙周炎样本及正常样本各10例,进行免疫荧光和qRT-PCR检测。结果:实验组釉CEJ-ABC明显高于对照组(P<0.05),Sema3A/Nrp表达强度明显低于对照组(P<0.05),CEJ-ABC与Sema3A/NrP呈负相关(p<0.05)。人牙周炎样本Sema3A/Nrp1荧光强度及mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论:Sema3A/Nrp1表达量的减少参与了慢性牙周炎骨破坏进程。

Sema7A干预钛微粒诱导鼠MC3T3-E1成骨细胞的凋亡

背景:Sema7A是一种细胞表面蛋白,它可以促进破骨细胞的融合同时促进成骨细胞的迁移,从而影响骨的动态平衡。推测,Sema7A siR NA可能减弱钛微粒成骨细胞分化。目的:分析信号素7A(Sema7A)对钛颗粒抑制鼠MC3T3-E1前成骨细胞活性过程的影响。方法:取第六七代生长状态良好的小鼠颅骨前成骨细胞(MC3T3-E1),分为4组培养。其中空白对照组为单独培养的细胞;标准对照组加入了钛微粒共培养;实验1组加入Sema7A过表达质粒,实验2组加入Sema7AsiR NA进行干扰。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Q-PCR检测骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的mR NA表达情况;Western-blot检测骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达情况;茜素红钙结节染色检测成骨细胞的矿化程度。结果与结论:结果提示标准对照组、实验1组检测到骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白表达明显减少而实验2组骨涎蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白则比标准对照组表达增加(P<0.05)。流式细胞仪结果提示实验1组成骨细胞凋亡率明显高于其他组(P<0.05),而实验2组则比标准对照组凋亡率降低(P<0.05)。茜素红染色检测结果显示实验1组未见明显的矿化结节,实验2组有矿化结节形成。结果表明通过基因干扰技术抑制Sema7A活性可以对钛颗粒抑制鼠MC3T3-E1成骨细胞分化的过程进行干扰,进而为临床上用生物技术治疗磨损微粒诱导的骨溶解问题提供了一条可行的思路。

部分去背根猫Sema3A及其受体NP-1在脊髓和背根节的表达

目的研究部分去背根对神经生长抑制因子Sema3A在脊髓及其受体NP-1在备用背根节内表达的影响。方法建立猫的单侧备用背根模型,分别在术后7d、14d取L3、L5、L6脊髓节段及手术侧L6背根节进行免疫组织化学ABC法染色,同时设置正常对照组。脊髓背角内检测Sema3A免疫阳性产物的平均光密度值(OD值),背根节内计数NP-1阳性中小神经元数。结果在L3脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.25±0.14)、14d(0.27±0.09)较正常对照组(0.37±0.87)减弱(P<0.05);在L5脊髓节段,Sema3A的表达术后7d(0.26±0.11)较正常组减弱(P<0.05),术后14d(0.33±0.09)时有所恢复;L6脊髓节段各组Sema3A的表达无明显变化。背根节内,术后7dNP-1阳性中小神经元数(30.85±10.26)较正常组(45.06±12.47)减少(P<0.05),14d时阳性中小神经元数(40.73±12.25)较7d时有所增加(P<0.05)。结论脊髓部分去背根后,Sema3A及其受体NP-1表达的时空变化可能与脊髓损伤后可塑性有关。

颞叶癫痫大鼠海马CA_1区Sema 3C、Np1的表达变化研究

目的探讨颞叶癫痫的发病机制。方法取健康雄性SD大鼠制成颞叶癫痫模型,用免疫组织化学和原位杂交技术对匹罗卡品致痫后不同时间点CA_1区的Sema3C mRNA、Np1 mRNA和蛋白表达进行分析。结果在匹罗卡品致痫后7d,实验组CA_1区Sema3C、Np1的表达明显低于对照组(P＜0．01)。结论CA_1区Sema3C、Np1的表达下调可能参与了海马CA_1区内的轴突出芽机制。

嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠Sema3A及其受体NP-1基因的表达

背景:嗅鞘细胞移植促进脊髓损伤修复机制中对神经生长抑制导向因子的研究较少。目的:观察嗅鞘细胞移植对脊髓半横断损伤后神经生长抑制导向因子Sema3A及其受体NP-1在RNA水平表达的变化。方法:17只SD大鼠随机分为嗅鞘细胞移植组、DMEM/F12培养液移植组和正常对照组。制作T11～T12水平大鼠脊髓左侧半横断损伤模型,立刻分别注射嗅鞘细胞悬液或等量的DMEM/F12培养液。结果与结论:6周后取横断水平前后两个脊髓节段,用RT-PCR的方法对Sema3A、NP-1的mRNA进行半定量分析。①嗅鞘细胞在大鼠脊髓内仍有大量存活。②Sema3A及NP-1mRNA的量,DMEM/F12培养液移植组明显多于正常对照组(P<0.05),嗅鞘细胞移植组与培养液移植组比较明显下调,且与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。③提示嗅鞘细胞移植有效减少了神经生长抑制导向因子Sema3A及其受体NP-1mRNA的表达。

Sema3A及其受体NP-1分别在成年猫脊髓及背根节中的表达

目的探讨正常状态下smea3A在成年猫脊髓,其受体neuropilin-1(NP-1)在背根节(DRG)的分布。方法选取成年雄猫5只,用免疫组织化学方法检测脊髓中sema3A,DRG中NP-1的分布。结果脊髓中sema3A的阳性反应物主要分布于腹角的绝大部分运动神经元的胞浆;背根节中NP-1阳性产物主要分布在部分中小神经元及少量大神经元的胞浆中。结论脊髓中的sema3A可能抑制了背根节神经元在脊髓中的错误出芽,从而保持了脊髓中正常突触联系的稳定性。

SEMA 3A及其受体NRP-1在大鼠切牙中的表达和意义

目的:研究脑信号蛋白3A(Semaphorin3A,SEMA3A)及其受体神经毡蛋白-1(Neuropilin-1,NRP-1)在大鼠切牙的成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜中的定位表达,并探究其在大鼠牙齿发育中的可能意义。方法:取6周龄Wistar大鼠的下颌骨常规脱钙、梯度乙醇脱水、石蜡包埋,沿颊舌向切片后分别进行HE和免疫组化染色;显微镜下观察Sema3a、Nrp-1在各组成细胞中的表达、分布。结果:在分泌期成釉细胞和成牙本质细胞中Sema3a、Nrp-1均呈阳性表达;在牙周膜细胞中Sema3a呈阳性表达,而Nrp-1的表达为阴性。结论:SEMA3A、NRP-1可能在牙齿硬组织发育中具有重要的意义。

温阳化浊通络方对系统性硬化病小鼠Sema3A/Nrp1信号通路的影响

目的研究温阳化浊通络方(WYHZTLF)对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)小鼠信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)/神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,Nrp1)信号通路的影响,探讨其治疗SSc的作用机制。方法构建SSc小鼠模型,分为对照组、模型组、温阳化浊通络方低(21 g·kg^(-1))、中(42 g·kg^(-1))、高(84 g·kg^(-1))剂量组和Sema3A抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯组(epigallocatechol gallate,EGCG),连续灌胃给药4周,对照组和模型组给予生理盐水处理。HE染色观察皮肤病理损伤及真皮厚度;免疫组织化学法检测皮肤组织血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达水平;Western blot检测皮肤组织Sema3A、Nrp1及VEGFA的表达水平;ELISA法检测小鼠血清Sema3A表达水平。结果与模型组相比,温阳化浊通络方明显缓解了SSc小鼠的皮肤病变,对真皮厚度有明显的抑制作用,降低了皮肤组织VEGFA的蛋白表达水平,同时抑制了皮肤组织及血清中Sema3A/Nrp1信号通路的蛋白表达水平。结论温阳化浊通络方可能通过抑制Sema3A/Nrp1信号通路蛋白表达水平,降低VEGFA的表达,改善SSc血管损伤。

基于Sema3E/PlexinD1和Sema4D/PlexinB1途径探讨黄芪甲苷促进脑梗死大鼠血管新生及改善血脑屏障受损的机制

目的研究黄芪甲苷促进脑梗死后血管新生及改善血脑屏障受损的作用,并探讨其内在机制。方法采用线栓法制造大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,假手术组只穿线不结扎,将模型复制成功的大鼠随机分为模型组、依达拉奉组及黄芪甲苷低、中、高剂量组,依达拉奉组给予依达拉奉3.2 mg·kg^(-1),黄芪甲苷组分别灌胃给予黄芪甲苷20、40、100 mg·kg^(-1),连续用药2周。用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)法评价行为学变化,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死体积;HE染色法观察病理变化;免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)的表达及微血管计数(MVC);伊文思蓝法评估血脑屏障破坏水平;RT-PCR法检测Sema3E、PlexinD1、Sema4D、PlexinB1 mRNA的表达。结果黄芪甲苷中、高剂量可明显降低大脑中动脉闭塞大鼠神经功能缺损评分(P<0.05,P<0.01),减少脑梗死体积(P<0.01),改善脑组织病理改变,增加脑组织MVC及VEGF、Ang-2的表达(P<0.01),降低血脑屏障的通透性(P<0.01),降低脑组织Sema3E、PlexinD1、Sema4D、PlexinB1 mRNA表达(P<0.01)。结论黄芪甲苷可以明显促进大脑中动脉闭塞大鼠血管新生及改善血脑屏障受损,其可能是通过调控Sema3E/PlexinD1和Sema4D/PlexinB1途径相关基因表达实现的。

Sema3A/Nrp1信号轴在慢性牙周炎牙周组织中的表达及在牙周骨质破坏中的作用

目的探究Sema3A/Nrp1信号轴在慢性牙周炎牙周组织中的表达及在牙周骨质破坏中的作用。方法选择2015年4月-2016年12月收治的已确诊慢性牙周炎患者53例作为研究组,另选同期来我院进行健康体检无口腔疾病的健康志愿者41例作为对照组。采用聚合酶链式反应法检测牙周组织中Sema3A和Nrp1的m RNA相对表达量,采用酶联免疫吸附法测定两组研究对象牙周组织中脑信号蛋白3A(Sema3A)、神经纤毛蛋白1(Nrp1)、炎性分子、骨代谢分子、骨代谢产物的含量。结果研究组中Sema3A,Nrp1,β-连环蛋白(β-catenin),破骨细胞形成抑制因子(OPG)含量明显低于对照组(P<0.05);几丁质酶3样蛋白1(YKL-40),CXC趋化因子配体16(CXCL16),相关粘附分子1(ICAM1),高迁移率蛋白1(HMGB1),核因子κB受体活化因子配体(RANKL),5-脂氧合酶(5-LOX),白三烯B4(LTB4),Ⅰ型原胶原羧基末端前肽(PICP),Ⅰ型胶原交联C端肽(CTX),Ⅰ型胶原交联N端肽(NTX)的含量明显高于对照组(P<0.05)。YKL-40、CXCL16、ICAM1、HMGB1、RANKL、5-LOX、LTB4、ICTP、NTX、CTX在CP患者牙周组织中的含量与Sema3A和Nrp1表达量呈负相关,β-catenin、OPG、PICP含量与Sema3A和Nrp1表达量呈正相关。结论 Sema3A/Nrp1信号轴在慢性牙周炎牙周组织中的表达受到抑制,进而对牙周骨质破坏有抑制作用。

LncRNA CDKN2B-AS1对胶质母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制

目的探讨LncRNA CDKN2B-AS1靶向miR-627-3p对胶质母细胞瘤细胞生物学行为和炎症反应的影响。方法采用RT-qPCR检测人正常星形胶质细胞(NHA)和胶质母细胞瘤细胞(U87、U251、LN229)中LncRNA CDKN2B-AS1和miR627-3p表达情况。分别转染si-NC、si-LncRNA CDKN2B-AS1、miR-NC、miR-627-3p模拟物、pcDNA、pcDNA-LncRNA CDKN2B-AS1、si-LncRNA CDKN2B-AS1+anti-miR-NC、si-LncRNA CDKN2B-AS1+anti-miR-627-3p至U251细胞,运用CCK-8法、克隆形成实验、Transwell实验研究U251细胞活力以及克隆形成、迁移及侵袭能力。双荧光素酶报告实验分析LncRNA CDKN2B-AS1和miR-627-3p的关系。结果与NHA细胞比较,U87、U251、LN229细胞中LncRNA CDKN2B-AS1表达量显著升高(P<0.05),miR-627-3p表达量显著降低(P<0.05)。沉默LncRNA CDKN2B-AS1或过表达miR-627-3p后U251细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数以及培养液中TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05)。LncRNA CDKN2B-AS1与miR-627-3p直接结合。抑制miR-627-3p表达显著减弱沉默LncRNA CDKN2B-AS1对U251细胞活力、克隆形成、迁移、侵袭以及炎症反应的影响。结论沉默LncRNA CDKN2B-AS1通过靶向上调miR-627-3p表达能够抑制胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭以及细胞炎症反应。

强化训练对局灶性脑缺血大鼠信号素3a及其受体神经纤毛蛋白-1 mRNA表达的影响

目的:观察不同强度的游泳训练对局灶性脑缺血大鼠Sema3a及其受体神经纤毛蛋白(NRP-1)mRNA表达的影响;探讨强化游泳训练对局灶性脑缺血大鼠的神经保护机制。方法:采用线栓法建立左侧大脑中动脉阻塞2h再灌注动物模型。60只造模成功的雄性SD大鼠随机分为训练1组、训练2组、训练3组和对照组,每组15只。训练1组大鼠每天游泳1次,每次5min;训练2组大鼠每天游泳1次,每次10min;训练3组大鼠每天游泳2次,每次10min;对照组大鼠不做任何训练。另取15只大鼠为假手术组,不阻塞大脑中动脉血流,不做任何训练。以上5组大鼠又随机分为术后3d、7d、14d3个时相点,每个时相点5只大鼠。采用Za-usinger评分法评价神经功能缺损情况。应用RT-PCR测定缺血侧大脑皮质Sema3a和NRP-1的mRNA表达量。结果:假手术组神经功能正常。对照组各时相点的神经功能评分与假手术组同时相点相比,差异均有显著性意义(P<0.05);各训练组训练3d、7d、14d后的神经功能改善情况优于同时相点对照组(P<0.05),训练3组受损神经功能改善最明显,其训练3、7、14d后Zausinger神经功能评分分别为(2.40±0.55)、(3.40±0.55)和(4.20±0.84)。训练1、2、3组各时相点Sema3a和NRP-1的mRNA表达量明显低于对照组同时相点(P<0.05),且训练3组Sema3a和NRP-1的mRNA表达量降低较其他各训练组更明显,其训练3、7、14d后,Sema3a与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.62±0.06)、(0.53±0.10)和(0.42±0.06),NRP-1与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.64±0.13)、(0.53±0.08)和(0.38±0.10)。结论:运动训练可以减少脑缺血再灌注大鼠Sema3a和NRP-1的mRNA表达量,从而恢复受损神经功能;强化运动训练能够取得更好的效果。

房水Sema3A、Klotho、SDF-1与增生型糖尿病视网膜病变患者术后新生血管性青光眼的关系研究

目的:探讨房水信号素3A(Sema3A)、克洛索(Klotho)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)与增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患者术后新生血管性青光眼(NVG)的关系。方法:选取2021年1月~2022年1月成都市第六人民医院收治的145例接受玻璃体切割术PDR患者,根据术后1年是否发生NVG分为NVG组和非NVG组。酶联免疫吸附法检测房水Sema3A、Klotho、SDF-1水平。采用多因素Logistic回归分析影响PDR患者术后NVG的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析房水Sema3A、Klotho、SDF-1对PDR患者术后NVG的预测价值。结果:PDR患者随访1年,术后NVG发生率为17.24%。与非NVG组比较,NVG组房水Sema3A、SDF-1水平升高,Klotho水平降低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术前虹膜新生血管和Sema3A、SDF-1升高为影响PDR患者术后NVG的独立危险因素,Klotho升高为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,房水Sema3A、Klotho、SDF-1联合预测PDR患者术后NVG的曲线下面积(AUC)为0.913,大于房水Sema3A、Klotho、SDF-1单独预测的0.796、0.794、0.800。结论:房水Sema3A、SDF-1升高和Klotho降低与PDR患者术后NVG发生密切相关,房水Sema3A、Klotho、SDF-1联合检测对PDR患者术后NVG具有较高的预测价值。