聚合酶链反应检测SEN病毒D型和H型方法的建立及初步应用

目的:建立检测SEN病毒(SENV)D和H基因型的聚合酶链反应(PCR)方法,并将其应用到流行调查。方法:从GeneBank下载SENV序列,在SENV开放读码框Ⅰ的高度保守序列内自行设计外引物,参考文献报道合成SENV D型和H型的型特异性引物作为内引物,建立检测SENV D型和H型的巢式PCR方法,并对深圳地区192名健康体检人群、48例急性甲肝患者、176例慢性乙肝患者、98例慢性丙肝患者和38例非甲-戊型肝炎患者的血清进行检测。部分阳性PCR产物进行克隆和DNA序列分析。结果:巢式PCR方法的敏感性及特异性均好。SENV D和/或H型在健康成人、急性甲肝、慢性乙肝、慢性丙肝和非甲-戊型肝炎患者中的总感染率分别为30.7％、37.5％、64.8％、57.1％和 44.7％。SENV D和/或H型在健康人群中的感染率低于慢性乙肝患者和慢性丙肝患者(P<0.001)。非甲-戊型肝炎及急性甲肝患者中的感染率略高于健康人群,但无显著性差异(P>0.05)。结论:巢式PCR方法可用于检测SENV感染,深圳地区健康人群和急、慢性肝炎患者中存在SENV感染。SENV可能与HBV和HCV有相似的传播途径,其致病性有待进一步研究阐明。