期刊文献+
共找到79篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
中国与加拿大服装专业课程设置对比——以加拿大Seneca学院和北京服装学院为例
1
作者 王德庆 王宁宁 史毅 《山西师大学报(社会科学版)》 北大核心 2012年第S1期114-115,共2页
本文在对加拿大的Seneca学院服装专业的课程设置进行调查的基础上,从其课程描述、课程种类、所需课时、授课手段等4个方面与北京服装学院所设的服装专业的课程进行对比,分析中加两所高校在课程安排上的区别与优势,总结了对我国服装教育... 本文在对加拿大的Seneca学院服装专业的课程设置进行调查的基础上,从其课程描述、课程种类、所需课时、授课手段等4个方面与北京服装学院所设的服装专业的课程进行对比,分析中加两所高校在课程安排上的区别与优势,总结了对我国服装教育的启示。 展开更多
关键词 服装课程 seneca学院 北京服装学院 对比
下载PDF
加拿大职业教育衔接分析及启示——以Seneca学院采购与供应链管理专业为例
2
作者 王宁 《物流技术》 2015年第9期304-306,共3页
以加拿大Seneca学院采购与供应链管理专业为例,分析其职业教育衔接现状、衔接机制、衔接途径以及课程体系衔接的做法,总结其成功之处,希望我国的职业教育可以在机制上更加灵活,课程设置上更贴近市场,更注重校企合作和学生技能的培养。
关键词 职业教育衔接 seneca学院 采购与供应链管理
下载PDF
SENECA学院人才培养体系的借鉴与启示
3
作者 李强 范慧芳 《市场论坛》 2014年第11期85-86,共2页
在加拿大SENECA学院研修中,通过学院教授开办专题讲座、与师生座谈和听课学习等形式,对其教育教学理念、师资队伍建设、校企合作、学生学习能力培养和专业课程体系等几方面都有了深入的了解,为我国高职院校提高人才培养质量提供了借鉴... 在加拿大SENECA学院研修中,通过学院教授开办专题讲座、与师生座谈和听课学习等形式,对其教育教学理念、师资队伍建设、校企合作、学生学习能力培养和专业课程体系等几方面都有了深入的了解,为我国高职院校提高人才培养质量提供了借鉴的可能。 展开更多
关键词 seneca学院 人才培养体系 借鉴 启示
下载PDF
中加两国职业教育的比较与启示——以加拿大Seneca学院为例
4
作者 刘春梅 《天津中德职业技术学院学报》 2015年第1期45-47,共3页
与职业教育发达的加拿大相比,我国的职业教育在形式和内容上都存在着较大不同。本文以Seneca学院为例从宏观与微观两个角度对比中加职业教育的差异并指出其对我国职业教育的启示。
关键词 加拿大 seneca学院 职业教育 差异 启示
下载PDF
国内首株猪塞内加谷病毒(Seneca Valley virus)的分离鉴定 被引量:21
5
作者 赵晓亚 伍绮文 +3 位作者 伍子娴 陈桂华 白杨 马静云 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期839-843,共5页
猪塞内加谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)是一种新出现的可感染仔猪及母猪并导致仔猪死亡的病毒。2015年3月份至今年在我国、巴西及美国出现了几起塞内加谷病毒感染猪群并伴随严重的临床症状及发病死亡的疫情,造成严重的经济损失。为... 猪塞内加谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)是一种新出现的可感染仔猪及母猪并导致仔猪死亡的病毒。2015年3月份至今年在我国、巴西及美国出现了几起塞内加谷病毒感染猪群并伴随严重的临床症状及发病死亡的疫情,造成严重的经济损失。为分离鉴定SVV,本研究将RT-PCR检测为SVV阳性的猪临床样品无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养。通过细胞病变、RT-PCR扩增、电镜观察和基因序列测定对细胞培养物进行鉴定。结果表明我们成功分离到国内首株SVV,并将其命名为SVV CH-01-2015。全基因组的系统发育分析表明SVV CH-01-2015位于Senecavirus病毒属,与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,由此可以确定本研究所分离到的SVV属于Senecavirus病毒属。本研究为进一步研究SVV的致病性和致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪塞内加谷病毒 细胞培养 分离 鉴定 序列分析
下载PDF
以服务学生为中心的后勤管理模式探究——加拿大Seneca学院后勤管理摸式对我校的借鉴
6
作者 全健 《长沙民政职业技术学院学报》 2016年第4期81-83,共3页
高校后勤作为服务教学工作的重要组成部分,以服务学生为中心,理顺机制,提升服务效能,拓展社会合作深度、广度,加大学生参与,接受社会监督,大胆创新,才能有力促进学院后勤有序发展,提升服务学生的能力。
关键词 加拿大seneca学院 后勤管理模式 服务学生 理顺机制 提升效能 促管理
下载PDF
The Distribution of Different Clades of Seneca Valley Viruses in Guangdong Province,China 被引量:7
7
作者 Pan Chen Fan Yang +6 位作者 Weijun Cao Huanan Liu Keshan Zhang Xiangtao Liu Zhiwen Xu Zixiang Zhu Haixue Zheng 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期394-401,共8页
Seneca Valley virus (SVV), a newly determined etiological agent of vesicular disease in swine, causes porcine idiopathic disease and occasional acute death in piglets. Recently, an increased number of SVV infection ca... Seneca Valley virus (SVV), a newly determined etiological agent of vesicular disease in swine, causes porcine idiopathic disease and occasional acute death in piglets. Recently, an increased number of SVV infection cases have been reported in the United States (US) and China, resulting in significant economic losses to the swine industry. The first identification of SVV in China was reported in Guangdong Province, a major swine producing province. The cases of SVV were continuously reported in Guangdong in 2015 and 2016. However, the spread of SVV in Guangdong in 2017 remains unknown.In this study, we determined two new SVV strains, CH-GD-2017-1 and CH-GD-2017-2, from Guangdong. The genetic analysis suggested that the two Guangdong strains showed different characteristics to previous Guangdong strains. They showed lower nucleotide similarity with strains isolated in 2015 and 2016, and were more similar to the US strains.Phylogenetic analyses indicated that the new strains were clustered in a different clade with previous Guangdong strains.We found 28 mutated amino acids in the new strains, compared with the first Guangdong strain, SVV CH-01-2015. In the geographic analysis, we found that the US and China reported more SVV cases than other countries, and most of the SVV cases were reported in east and central China—of which, Guangdong Province is one of the major epidemic regions. In conclusion, our findings indicate that SVV continued to spread in Guangdong Province in 2017, and two different clades of SVVs have emerged in this region. 展开更多
关键词 seneca VALLEY virus (SVV) GENOMIC sequence PHYLOGENETIC tree EPIDEMIOLOGICAL analysis
原文传递
Cholesterol-25-Hydroxylase Suppresses Seneca Valley Virus Infection via Producing 25-Hydroxycholesterol to Block Adsorption Procedure
8
作者 Hui Li Zekai Zhao +4 位作者 Xiangmin Li Liuxing Qin Wei Wen Huanchun Chen Ping Qian 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期1210-1219,共10页
Cholesterol-25-hydroxylase(CH25 H)is a membrane protein associated with endoplasmic reticulum,and it is an interferon-stimulated factor regulated by interferon.CH25 H catalyzes cholesterol to produce 25-hydroxycholest... Cholesterol-25-hydroxylase(CH25 H)is a membrane protein associated with endoplasmic reticulum,and it is an interferon-stimulated factor regulated by interferon.CH25 H catalyzes cholesterol to produce 25-hydroxycholesterol(25 HC)by adding a second hydroxyl to the 25 th carbon atom of cholesterol.Recent studies have shown that both CH25 H and 25 HC could inhibit the replication of many viruses.In this study,we found that ectopic expression of CH25 H in HEK-293 T and BHK-21 cell lines could inhibit the replication of Seneca Valley virus(SVV)and that there was no species difference.On the other hand,the knockdown of CH25 H could enhance the replication of SVV in HEK-293 T and BHK-21 cells,indicating the importance of CH25 H.To some extent,the CH25 H mutant without hydroxylase activity also lost its ability to inhibit SVV amplification.Further studies demonstrated that 25 HC was involved in the entire life cycle of SVV,especially in repressing its adsorption process.This study reveals that CH25 H exerts the advantage of innate immunity mainly by producing 25 HC to block virion adsorption. 展开更多
关键词 seneca Valley virus(SVV) Cholesterol-25-hydroxylase(CH25H) 25-hydroxycholesterol(25HC)
原文传递
SVA及α-干扰素对PK-15细胞microRNA转录谱影响的分析 被引量:2
9
作者 王晨 罗愿 +4 位作者 陈彦希 彭远义 周远成 徐志文 刘骁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期346-357,共12页
为探究猪塞内卡病毒A(SVA)感染、干扰素(IFN-α)处理对猪肾细胞(PK-15)微RNA(microRNA,miRNA)转录谱的影响,本研究分别构建SVA感染的PK-15(PK-15/SVA)、IFN-α处理的PK-15(PK-15/IFN),SVA感染再经IFN-α处理的PK-15细胞(PK-15/SVA/IFN)... 为探究猪塞内卡病毒A(SVA)感染、干扰素(IFN-α)处理对猪肾细胞(PK-15)微RNA(microRNA,miRNA)转录谱的影响,本研究分别构建SVA感染的PK-15(PK-15/SVA)、IFN-α处理的PK-15(PK-15/IFN),SVA感染再经IFN-α处理的PK-15细胞(PK-15/SVA/IFN),通过荧光定量PCR(qPCR)分别检测各组细胞中SVA VP1及IFN-αmRNA的转录水平。结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA及PK-15/SVA/IFN细胞中SVA VP1基因的转录水平极显著升高(P<0.001),PK-15/SVA/IFN中IFN-α的转录水平显著或极显著升高(P<0.05、P<0.01)。通过转录组测序技术(RNA-Seq)分析各组细胞miRNA的转录谱,采用Spss软件统计各组细胞中转录差异miRNA的数量;利用基于负二项分布的DESeq2筛选各组细胞中转录显著差异miRNA;采用miRanda、PITA和RNAhybrid 3个软件预测各组细胞转录显著差异miRNA的靶基因,通过miREvo和mirdeep2软件预测各组细胞中的新miRNA并通过与猪miRNA序列比对得到已知miRNA;分别采用GO功能和KEGG富集分析各组细胞转录显著差异miRNA涉及的生物学功能及信号通路。统计分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/IFN、PK-15/SVA和PK-15/SVA/IFN中均存在转录显著差异miRNA,且在SVA感染后细胞中转录的miRNA数量增多,IFN-α刺激则会减少细胞中转录的miRNA数量,SVA感染后再经IFN-α处理则转录的miRNA数量又有所降低。筛选结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA中有167种转录显著差异miRNA,其中94种转录显著上调,73种转录显著下调;与PK-15相比,PK-15/IFN中有98种转录显著差异miRNA,其中55种转录显著上调,43种转录显著下调。预测结果显示,共有290种转录显著差异miRNA有对应靶基因,且共预测到292种新miRNA和345种已知miRNA。选取6种转录显著差异miRNA采用Graphpad prism6.0进行miRNA-mRNA的互作网络展示。结果显示,miR-221-5p的靶基因显著多于其他miRNA,且其靶基因主要与癌症、病毒感染的治疗及宿主的免疫反应有关。GO功能结果显示,在经IFN-α处理或SVA感染后,转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于细胞组分和生物过程等功能。KEGG分析结果显示,与PK-15相比,PK-15/SVA和PK-15/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1和NF-κB信号通路;与PK-15/IFN相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于PI3K-Akt、NF-κB和肿瘤坏死因子(TNF)等抗病毒免疫相关信号通路;与PK-15/SVA相比,PK-15/SVA/IFN细胞中转录显著差异miRNA的靶基因主要富集于Rap1、NF-κB、TNF和MAPK信号通路。16种转录显著差异miRNA的qPCR结果与RNA-Seq结果一致。综上所述,本研究首次证实IFN-α处理、SVA感染均显著影响PK-15细胞miRNA转录谱,前者促进miRNA的转录,后者则抑制miRNA的转录。其中转录显著差异miRNA的靶基因与宿主抗病毒及肿瘤免疫均等信号通路密切相关,该结果为阐明SVA感染宿主细胞后非编码RNA转录谱变化的分子机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 塞内卡病毒A Α-干扰素 MICRORNA 转录差异
下载PDF
A型塞内卡病毒VP2蛋白抗原区的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
10
作者 翟刚 顾文源 +6 位作者 王晶 刘莹 赵云环 刘涛 张帅 左玉柱 范京惠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1025-1031,共7页
为建立高效的A型塞内卡病毒(SVA)的血清学检测方法,本研究经PCR扩增SVA VP2基因的优势抗原区域(VP2-1基因)后构建重组质粒p ET-32a-VP2-1,将其转化大肠杆菌感受态细胞并经IPTG诱导表达重组VP2蛋白(rVP2),表达产物经镍柱亲和层析法纯化... 为建立高效的A型塞内卡病毒(SVA)的血清学检测方法,本研究经PCR扩增SVA VP2基因的优势抗原区域(VP2-1基因)后构建重组质粒p ET-32a-VP2-1,将其转化大肠杆菌感受态细胞并经IPTG诱导表达重组VP2蛋白(rVP2),表达产物经镍柱亲和层析法纯化后利用western blot鉴定,结果显示,在42 ku处出现特异性条带,表明r VP2可以与SVA阳性血清特异性反应。以r VP2为包被抗原,经反应条件的优化,建立了基于SVA VP2抗原区的间接ELISA抗体检测方法。本研究建立的间接ELISA检测方法的最适抗原包被浓度为2μg/mL,5%脱脂乳的PBST作为封闭液37℃孵育1 h,待检血清的最适稀释度为1∶500,兔抗猪Ig G-HRP稀释度为1∶10000,最佳显色时间为10 min。当检测样品的S/P值<0.201时,样品检测结果为阴性;当检测样品的S/P值≥0.201时,结果为阳性。利用该方法检测SVA,猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)等阳性血清,结果显示,除SVA检测为阳性外,其他病毒均为阴性,特异性较强。将SVA阳性血清2倍倍比稀释(1∶50,1∶100,1∶200,1∶400,1∶800,1∶1600)后经该间接ELISA方法检测,评估其敏感性,结果显示,SVA阳性小鼠血清在1∶800稀释后检测结果仍为阳性,敏感性较高。将同一批次和不同批次纯化的r VP2包被ELISA板,按照该ELISA方法检测8份猪SVA阳性血清,评估该方法的重复性。结果显示,批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%,该方法重复性好。利用本实验建立的间接ELISA方法与血清中和试验同时对266份临床血清样品检测,结果显示,本研究建立方法检测的样品阳性率为19.1%,中和试验检测的样品阳性率为19.55%,两种方法检测结果符合率为97.7%。本研究首次基于SVA r VP2建立的间接ELISA方法操作简单、特异性强、敏感性高、重复性好,为SVA的检测和其感染的防控提供了可靠的技术支持。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP2 间接ELISA
下载PDF
抗A型塞内卡病毒天然产物筛选及颉颃作用机制研究
11
作者 蒙英雯 李月华 +6 位作者 沙洲 李晨钰 巩有权 董雅琴 魏荣 邹丰才 尼博 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期734-744,共11页
【目的】从天然产物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)活性的天然产物并研究其颉颃作用机制。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)与BHK-21细胞,结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA药物体外筛选平台。从... 【目的】从天然产物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)活性的天然产物并研究其颉颃作用机制。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)与BHK-21细胞,结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA药物体外筛选平台。从天然产物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的天然产物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过细胞毒性试验确定其最大无毒浓度。选择病毒感染周期的吸附、入胞、复制、组装释放4个主要过程,利用实时荧光定量RT-PCR、50%组织细胞感染量(TCID 50)测定等进行天然产物分子颉颃机制研究。【结果】从包含560种天然产物的分子库中筛选出16种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出4种安全、有效的天然产物,分别为20S-原人参三醇((20S)-protopanaxatriol)、蕈青霉素(paxilline)、方胆碱(fangchinoline)、竹红菌乙素(hypocrellin B)。作用机制研究显示,20S-原人参三醇能抑制SVA感染过程中的吸附、复制阶段;蕈青霉素在SVA的吸附、入胞、复制、组装释放阶段即整个病毒感染周期均发挥抑制作用;方胆碱能抑制SVA的入胞、复制;竹红菌乙素能抑制SVA的吸附、入胞、复制及组装释放阶段。【结论】本试验从天然产物库中筛选出了4种具有抗SVA活性的天然产物,这些化合物抗病毒效果良好,且作用机制各有不同。本研究为抗SVA药物的进一步研发提供重要参考。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒(SVA) 天然产物 高通量筛选 颉颃机制
下载PDF
A型塞内卡病毒感染PK-15细胞环状RNA表达谱分析
12
作者 陈彦希 王晨 +5 位作者 罗愿 周远成 徐志文 彭远义 宋振辉 刘骁 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期280-289,共10页
【目的】分析A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)感染猪肾上皮细胞(PK-15)后环状RNA(circular RNA,circRNA)表达谱的变化,探究circRNAs在SVA感染过程中发挥的潜在调控作用。【方法】本研究基于Illumina HiSeq 2000平台对SVA感染及对照PK... 【目的】分析A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)感染猪肾上皮细胞(PK-15)后环状RNA(circular RNA,circRNA)表达谱的变化,探究circRNAs在SVA感染过程中发挥的潜在调控作用。【方法】本研究基于Illumina HiSeq 2000平台对SVA感染及对照PK-15细胞circRNAs转录组进行测序,并对差异表达circRNAs的来源基因进行GO功能及KEGG通路富集分析,通过实时荧光定量PCR对新发现的circRNAs进行表达水平鉴定。【结果】转录组测序结果显示,SVA感染组、PK-15细胞对照组中共有432种circRNAs被发现。在SVA感染PK-15细胞中,87种circRNAs表达水平相对对照组PK-15细胞显著上调,74种circRNAs表达水平显著下调。对差异表达circRNAs的来源基因进行GO功能注释分析表明,SVA感染组差异表达circRNAs来源基因主要富集于核仁、细胞器膜和细胞大分子代谢、发育等生理过程。KEGG通路富集结果显示,SVA感染组差异表达circRNAs来源基因主要富集于胞吞过程、cAMP信号通路、Rap1信号通路、Ras信号通路。对6种新发现的显著差异表达的circRNAs进行实时荧光定量PCR验证,结果显示,其表达水平与高通量测序结果趋势一致。【结论】本研究首次对SVA感染PK-15细胞的circRNAs表达谱进行差异分析,发现差异表达的circRNAs广泛参与动物机体大分子代谢、胞吞及细胞增殖、黏附、抗病毒过程,为进一步探究circRNAs在SVA感染过程中的分子机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 环状RNA(circRNA) A型塞内卡病毒(SVA) 高通量测序 PK-15细胞
下载PDF
猪塞内卡谷病毒VP1蛋白原核表达及多克隆抗体制备
13
作者 莫红芳 石宗承 +6 位作者 陆晶山 何东贤 杨延辉 梁淑芳 俸祥仁 钱平 韦巧燕 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2175-2183,共9页
【目的】原核表达猪塞内卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)VP1蛋白,制备SVV-CH-HB2016 VP1蛋白多克隆抗体并分析其抗原性,为进一步研发SVV病毒诊断试剂盒和亚单位疫苗提供参考依据。【方法】对SVV-CHHB2016 VP1基因序列进行密码子优化... 【目的】原核表达猪塞内卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)VP1蛋白,制备SVV-CH-HB2016 VP1蛋白多克隆抗体并分析其抗原性,为进一步研发SVV病毒诊断试剂盒和亚单位疫苗提供参考依据。【方法】对SVV-CHHB2016 VP1基因序列进行密码子优化,构建质粒pUCK/VP1-opt,双酶切后连接至pET-28a(+)载体,构建原核表达质粒pET-28a-VP1。将重组质粒pET-28a-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)分子伴侣感受态细胞,经IPTG诱导表达获得重组VP1蛋白。采用Western blotting方法分析VP1蛋白的反应原性,并以包涵体变性和复性方式纯化。随后将VP1蛋白免疫新西兰白兔,分离血清获得重组VP1蛋白的多克隆抗体。以间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗体的效价水平,以Protein A+G Agarose抗体纯化试剂盒纯化多克隆抗体。通过Western blotting和间接免疫荧光抗体试验(IFA)法验证多克隆抗体与SVV-CH-HB2016毒株反应的特异性。【结果】成功构建原核表达质粒pET-28a-VP1,在IPTG终浓度为0.1 mmol/L、37℃诱导4 h条件下,重组VP1蛋白成功表达并主要以包涵体形式存在;Western blotting分析结果显示,重组VP1蛋白可与His-Tag Mouse mAb发生特异性结合,具有良好的反应原性;经变性和复性纯化的重组包涵体蛋白纯度和浓度均较高;采用间接ELISA法检测多克隆抗体的效价为1∶32000;纯化后的抗体无明显杂带,纯度大于90.0%;Western blotting和IFA鉴定结果表明,多克隆抗体可特异性识别SVV-CH-HB2016毒株,重组VP1蛋白具有较好的免疫原性。【结论】通过原核表达SVV VP1蛋白获得的重组VP1蛋白具有较好的抗原性,制备的多克隆抗体特异性良好,可作为诊断试剂盒及亚单位疫苗研制的候选抗原。 展开更多
关键词 猪塞内卡谷病毒 VP1蛋白 原核表达 多克隆抗体
下载PDF
猪塞尼卡谷病毒病灭活疫苗免疫持续期测定
14
作者 孙瑶 吴珊珊 +2 位作者 王贵华 郭太宁 姜平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第8期73-78,共6页
旨在研究猪塞尼卡谷病毒病灭活疫苗的免疫持续期。将两批实验室制品颈部肌肉注射2~3月龄健康猪,2.0 mL/头,免疫后21 d加强免疫1次,首次免疫后7、14、21、28、35、50、80、110、140、170、200 d分别采血,测定塞尼卡谷病毒(SVV)中和抗体效... 旨在研究猪塞尼卡谷病毒病灭活疫苗的免疫持续期。将两批实验室制品颈部肌肉注射2~3月龄健康猪,2.0 mL/头,免疫后21 d加强免疫1次,首次免疫后7、14、21、28、35、50、80、110、140、170、200 d分别采血,测定塞尼卡谷病毒(SVV)中和抗体效价,并于170 d和200 d分别随机抽取5头猪进行攻毒,以攻毒保护率均高于80%的最长免疫时间确定为疫苗的免疫持续期。免疫时间从第一次免疫后开始计算。结果显示,两批实验室制品免疫后7 d血清SVV中和抗体效价平均达1∶10以上;免疫后21 d中和抗体平均达1∶82.5以上;免疫后50 d血清抗体达到顶峰,中和抗体平均达1∶938.4以上。之后抗体呈下降趋势。免疫后170 d中和抗体平均达1∶192.1以上,免疫后200 d中和抗体平均达1∶73.8以上。免疫后170和200 d攻毒,保护率均达100%。试验结果说明,猪塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫期至少可维持到200 d,具有重要研发前景。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 灭活疫苗 免疫持续期 中和抗体 攻毒保护
下载PDF
RIP3对A型塞内卡病毒复制影响的机制研究
15
作者 马潇雨 郭紫晶 +5 位作者 张瑞 王梦瑶 谭小雨 游青 李彦敏 张志东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期604-610,共7页
为探究细胞程序性坏死的关键蛋白受体相互作用蛋白激酶-3(RIP3)对A型塞内卡病毒(SVA)复制的影响及其潜在的作用机制,本研究采用SVA(MOI 1)感染PK-15细胞(PK-15+SVA),PK-15细胞作为对照组(Mock),采用western blot检测RIP3、磷酸化的RIP3(... 为探究细胞程序性坏死的关键蛋白受体相互作用蛋白激酶-3(RIP3)对A型塞内卡病毒(SVA)复制的影响及其潜在的作用机制,本研究采用SVA(MOI 1)感染PK-15细胞(PK-15+SVA),PK-15细胞作为对照组(Mock),采用western blot检测RIP3、磷酸化的RIP3(P-RIP3)、混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)与磷酸化MLKL(P-MLKL)蛋白表达。结果显示,SVA感染促进PK-15细胞中P-RIP3和P-MLKL蛋白表达量显著增多(P<0.05),表明SVA可激活程序性坏死相关蛋白RIP3和MLKL。利用RIP3特异性抑制剂GSK843处理PK-15细胞(PK-15+SVA+GSK843),在SVA(MOI 1)感染12 h、24 h和48 h后,利用western blot和qPCR检测SVA非结构蛋白3D的表达水平和SVA mRNA(24 h)的转录水平。结果显示,与Mock组相比,感染细胞中SVA 3D蛋白和SVA mRNA转录水平均显著增加(P<0.05)。利用western blot检测细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达;采用SVA感染敲低自噬蛋白5(ATG5)的PK-15细胞(ATG5 KD),利用western blot检测其中SVA 3D蛋白的表达;利用qPCR检测各组细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α和IFN-βmRNA转录水平。结果显示,与Mock组相比,PK-15+SVA细胞中LC3-I的变化不明显,LC3-II蛋白表达水平明显下调;与PK-15+SVA组相比,PK-15+SVA+GSK843细胞中LC3-I变化不明显,LC3-II蛋白表达水平则明显增加。与SVA感染的PK-15细胞相比,SVA感染ATG5 KD中3D蛋白表达水平明显下降。qPCR结果显示,与未感染SVA的对照组相比,PK-15+SVA中4种细胞因子mRNA转录水平均显著或极显著上调(P<0.05、P<0.001、P<0.0001),与PK-15+SVA组相比,PK-15+SVA+GSK843细胞中4种细胞因子mRNA转录水平均显著或极显著下调(P<0.05、P<0.001、P<0.0001)。本研究上述结果首次表明RIP3可调控细胞自噬,影响SVA的复制,并参与调控细胞自噬的发生与炎性细胞因子的转录,该结果为进一步阐明SVA的致病机制及其感染的防治提供重要的科学依据。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 受体相互作用蛋白激酶-3 病毒复制 自噬 程序性坏死
下载PDF
塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:22
16
作者 樊晓旭 赵永刚 +3 位作者 迟田英 哈登楚日亚 吴晓东 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期959-962,共4页
为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL^2.8&#... 为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL^2.8×10~1拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;该方法与口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达2.8拷贝/μL,灵敏度高于普通PCR;批内和批间的变异系数为1.73%~4.00%,具有良好的稳定性。本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法可以用于SVV的检测,还可以作为诊断技术储备,应对我国未来可能出现流行的猪原发性疱疹病。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 荧光定量PCR TAQMAN探针
下载PDF
塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立 被引量:15
17
作者 樊晓旭 宋翥远 +11 位作者 赵永刚 赵明 董雅琴 张永强 李园丽 迟田英 刘春菊 戈胜强 张志诚 吴晓东 王树双 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期406-410,共5页
为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病... 为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒无交叉反应;在40℃、20 min内可检测的最低浓度为56拷贝/μL质粒标准品;通过3次重复试验检测,LFD检测线灰度值变异系数范围在4.49%~9.73%。利用该方法对120份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究首次建立了检测SVV的等温、快速RPA-LFD方法,读取结果不依赖任何仪器设备,为猪群感染SVV的现场快速诊断、流行病学研究和根除方案的制定提供帮助。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 重组酶聚合酶扩增 侧向流试纸条
下载PDF
塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)实时荧光检测方法的建立 被引量:15
18
作者 樊晓旭 哈登楚日亚 +7 位作者 王英丽 王姣 刘春菊 迟田英 赵永刚 张志诚 吴晓东 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2017年第8期81-86,共6页
塞尼卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)可感染猪,引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变,新生仔猪病死率达30%~70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对SVV 3D基因设计了引物和探针,并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特... 塞尼卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)可感染猪,引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变,新生仔猪病死率达30%~70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对SVV 3D基因设计了引物和探针,并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特异性和重复性试验,建立了实时荧光RPA方法。结果显示,本方法在40℃、10 min内检测的最低浓度为28拷贝/μL;与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应;通过3次重复试验检测2.8×10~6~2.8×10~1拷贝/μL的6个稀释度样品,在荧光强度达1500 mV所需时间变异系数范围在2.44%~14.95%。该等温、快速扩增方法为猪群出现水疱性疾病的鉴别诊断提供了技术支持,对及时采取适当防控措施具有重要意义。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 实时 荧光 重组酶聚合酶扩增
下载PDF
猪塞尼卡谷病毒病现状与未来防控思考 被引量:8
19
作者 樊晓旭 迟田英 +1 位作者 吴晓东 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2018年第2期53-58,共6页
最近研究发现,塞尼卡谷病毒(SVV)是引起猪原发性水疱病(PIVD)的主要原因,可导致感染猪的鼻吻、蹄冠部出现水疱性病变,新生仔猪死亡。近年来,猪塞尼卡谷病毒病陆续波及加拿大、美国、巴西、中国、泰国和哥伦比亚等国,值得高度关注。本文... 最近研究发现,塞尼卡谷病毒(SVV)是引起猪原发性水疱病(PIVD)的主要原因,可导致感染猪的鼻吻、蹄冠部出现水疱性病变,新生仔猪死亡。近年来,猪塞尼卡谷病毒病陆续波及加拿大、美国、巴西、中国、泰国和哥伦比亚等国,值得高度关注。本文介绍了猪塞尼卡谷病毒病的发现、流行现状及临床表现。提示我国应重视该病的防控工作,具体措施包括:建立健全动物水疱性疫病诊断处置方案;做好追溯研究,加强主动监测;分析病毒基因分子进化规律,关注SVV演变;继续进行病毒致病机制及宿主抗感染免疫机制等基础研究;制定SVV诊断国家标准,同时开发快速、灵敏、方便的现场诊断方法及高通量鉴别诊断方法;研制新型安全有效的SVV疫苗;加强饲养管理,提高生物安全水平。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 流行现状 临床表现 防控
下载PDF
塞内加谷病毒3C蛋白生物信息学分析及真核质粒构建表达 被引量:3
20
作者 陈瑛琪 蔡瑶 +3 位作者 李雨濛 徐逸飞 徐志文 朱玲 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期32-39,共8页
3C蛋白是塞内加谷病毒重要的非结构蛋白之一,在病毒入侵机制及影响宿主抗病毒天然免疫方面发挥重要作用。试验应用Oligo 7.0和Primer 6.0软件,用BLAST对比SVV世界参考株,设计一对特异性引物。以SVV-SN株病毒液抽提RNA为模板,将序列连接p... 3C蛋白是塞内加谷病毒重要的非结构蛋白之一,在病毒入侵机制及影响宿主抗病毒天然免疫方面发挥重要作用。试验应用Oligo 7.0和Primer 6.0软件,用BLAST对比SVV世界参考株,设计一对特异性引物。以SVV-SN株病毒液抽提RNA为模板,将序列连接pMD19-T载体后测序,对正确片段作生物信息学分析可知SVV 3C可编码一个较稳定非分泌型蛋白,具有一个保守“催化三联体”。预测发现该蛋白具有16个磷酸化位点,证明其较高活性,预测其二级结构后得到再次证实。将pMD19-SVV-3C和真核表达载体pcDNA3.1(+)双酶切后连接,重组质粒经鉴定后命名为pcDNA3.1(+)-SVV-3C。将pcDNA3.1(+)-SVV-3C转染到BHK-21细胞24 h后制样作Western blotting,成功验证该重组质粒可在BHK-21中真核表达。相比其他同科病毒,当前SVV 3C蛋白研究存在空白。文章旨在为进一步研究SVV 3C蛋白结构提供理论依据,为后续探索SVV 3C蛋白对于宿主作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 塞内加谷病毒 3C蛋白 生物信息学分析 真核表达
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部