c-jun、SERCA-2a及cTnI基因与应激性高血压大鼠心脏功能的关系

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,c-Jun)、肌浆网的钙ATP酶(sarco/endoplasmicreticulum Ca2+-ATPase 2a,SERCA-2a)及心肌肌钙蛋白复合体I亚基(cardiac troponin I,cTnI)基因与应激性高血压大鼠心脏功能的关系。方法选取6~8周鼠龄的SPF级雄性Wistar大鼠28只,适应性喂养1周后,按照完全随机法分为应激性高血压(stress induce hypertension,SIH)模型组和正常组,每组14只。利用声光间断足底电、声光等复合应激因素,每天刺激2 h,持续12周构建SIH大鼠模型。采用RT-qPCR和免疫组织化学方法分别检测SIH模型组和正常组大鼠心脏组织c-jun、c-fos、SERCA-2a、 cTnI基因mRNA表达和SERCA-2a、cTnI蛋白表达,c-jun (ser63位点)、 AP-1、cTnI蛋白磷酸化水平的变化。结果与正常组相比,SIH模型组大鼠收缩压与舒张压均明显升高(P<0.05);在SIH模型组中c-jun、c-fos、SERCA-2a、 cTnI基因mRNA表达水平没有发生变化(P>0.05);SERCA-2a蛋白表达水平明显下调(P<0.05),cTnI蛋白表达和c-jun(ser63位点)、AP-1蛋白磷酸化水平明显上调(P<0.05), cTnI蛋白磷酸化水平无明显差异(P>0.05)。结论在SIH大鼠模型中,心肌舒张因子SERCA-2a蛋白表达量的下调可能是应激性高血压大鼠心脏舒张功能障碍、血压升高的原因之一。收缩因子cTnI蛋白表达量的上调,可能增强应激性高血压大鼠心脏的收缩功能。

睾酮对心力衰竭雄性大鼠心肌组织SERCA-2a转录水平的影响

目的:探讨睾酮改善心力衰竭可能的分子生物学机制。方法:建立心衰模型,将大鼠随机分为假手术组、心衰组和睾酮干预组(给予生理剂量的睾酮补充),3个月后处死动物,取心脏,2剥离左心室,用半定量RT-PCR检测心肌组织中SERCA-2 a mRNA含量的变化。结果:睾酮干预组SERCA-2 a mRNA相对表达量较心衰组升高(0.516±0.075 vs 0.428±0.062,P<0.05),但依然低于假术手组(0.516±0.075 vs 0.572±0.063,P<0.05)。结论:睾酮可使心肌组织SERCA-2 amRNA含量上升,睾酮补充疗法可能是改善心衰的分子机制之一。

睾酮对心力衰竭雄性大鼠心肌组织中Fas和SERCA-2a mRNA含量的影响

目的:探讨睾酮改善心力衰竭(心衰)可能的分子生物学机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、心衰组和心衰睾酮干预组(给予生理剂量的睾酮补充),后2组建立心衰模型,饲养观察3个月后处死动物,取心脏,剥离左心室,用半定量RT-PCR检测心肌组织中Fas、SERCA-2a mRNA含量的变化。结果:睾酮干预组FasmRNA相对表达量较心衰组显著降低(0.535±0.041 vs 0.570±0.060,P<0.05),但仍高于假手术组(0.431±0.056,P<0.05);睾酮干预组SERCA-2amRNA相对表达量较心衰组升高(0.516±0.075 vs 0.428±0.062P<0.05),但依然低于假术手组(0.572±0.063,P<0.05)。结论:睾酮可使心肌组织Fas含量下降、SERCA-2a mRNA含量上升,睾酮补充疗法可能是改善心衰的分子机制之一。

转SERCA 2a基因对急性心房颤动模型心房肌细胞L型钙通道影响的研究

目的:研究AAV9-SERCA 2a基因转染对急性心房颤动(房颤)动物模型心房肌细胞上L型钙通道表达的影响。方法:采用60只新西兰大白兔为实验对象,采用心包注射法转染AAV9-SERCA 2a基因;将实验对象随机分为4组:房颤组、转荧光蛋白房颤组、转SERCA 2a基因房颤组和对照组。转染后建立急性房颤模型,采用膜片钳及荧光免疫组织化学法检测心房肌细胞上L型钙通道的电流变化及其L型钙通道蛋白表达的情况。结果:转SERCA 2a基因房颤组心房肌细胞上LVDCCa1c蛋白表达明显高于房颤组(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义。转SERCA 2a基因房颤组心房肌细胞上L型钙通道电流密度高于房颤组,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义。结论:转SERCA 2a基因治疗可减少急性房颤模型心房肌细胞钙超载,减少房颤对L型钙通道电流密度的影响,对防止心脏电重构具有积极的意义。

黄芪甲苷介导SERCA 2a通路改善大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨黄芪甲苷(Astragaloside IV,AS-IV)对心肌缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)大鼠心肌损伤的保护作用及其可能作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(I/R)和AS-IV低、高剂量治疗组,每组10只;采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法制备心肌缺血再灌注模型,并给予黄芪甲苷治疗;HE染色检测大鼠心肌组织病理变化,ELISA法检测大鼠心肌中肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)的含量,TUNEL检测大鼠心肌细胞凋亡情况;qPCR和Western blot检测SERCA 2a通路相关蛋白的表达。结果成功制备大鼠心肌缺血在灌注模型;黄芪甲苷明显改善心肌缺血再灌注大鼠心肌组织病理变化,抑制大鼠细胞凋亡,下调心肌组织中肌酸激酶表达,同时上调SERCA 2a蛋白的表达,下调GRP78、ATF-6、PERK的表达,且呈剂量依赖性改变。结论黄芪甲苷改善心肌缺血再灌注大鼠心肌组织损伤,抑制细胞凋亡,与介导SERCA 2a信号通路抑制内质网应激相关。