巴西橡胶树HbSERK1启动子的克隆及功能鉴定

利用Genome Walker方法从巴西橡胶树中克隆了Hb SERK1起始密码子上游1 395 bp的5′调控序列,序列分析表明,该序列A/T含量高达66.2%,符合真核生物启动子序列的特征。Hb SERK1启动子序列中含有多个典型的真核生物启动子基本元件,如:TATA-box,CAAT-box等,同时存在其它应答元件,如:CAT-box、02-site、ERE、ARE、TCA-element、GCN4-motif、ACA-motif等。将Hb SERK1启动子进行5′缺失,并构建了5个植物缺失表达载体。利用真空渗透法和农杆菌介导法将植物缺失表达载体转化烟草,对烟草转化植株进行GUS活性定量分析结果表明,除了SP5外,其它缺失表达载体均可以驱动GUS蛋白的表达,说明在Hb SERK1启动子-1 395^-252 bp区域可以驱动GUS的表达,表明Hb SERK1启动子是具有生物活性的启动子。

日本落叶松体细胞胚胎发生相关基因LaSERK1的克隆与表达分析

本研究克隆了日本落叶松体细胞胚胎发生相关受体类蛋白激酶基因LaSERK1,并检测了在不同培养条件下LaSERK1的表达情况,发现LaSERK1与已发现的其他物种SERK1基因有高度相似性,qRT-PCR结果显示:LaSERK1在体胚发生早期高表达。结果表明:LaSERK1可能在落叶松体胚发育早期起重要作用,LaSERK1也可能成为早期胚性细胞的标记基因。

苹果属无融合生殖相关基因SERK1遗传转化的研究

本研究以p BI121为植物表达载体,在已构建的无融合生殖基因表达载体p BI121-Mh SERK1和p BI121-Mhd SERK1的基础上,利用根癌农杆菌介导法,将苹果属无融合生殖相关基因SERK1转入受体植株烟草中。研究结果表明:烟草叶片浸染后,经共培养和选择培养形成再生芽,分别获得7株p BI121-Mh SERK1和6株p BI121-Mhd SERK1转烟草抗性植株,PCR检测证明已成功获得Mh SERK1和Mhd SERK1烟草转化株系。本研究可为下一步无融合生殖相关基因功能验证研究奠定基础。