SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性

目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10µmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU的敏感性。结果:SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达(均P<0.01)。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA(P<0.01)。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)、相关蛋白(SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR蛋白)的表达(均P<0.01)、促进细胞凋亡(P<0.01),且提高其对5-FU的敏感性(P<0.01),这些作用均可被AKT激活剂SC79部分阻挡(P<0.05或P<0.01)。结论:SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。

组蛋白甲基转移酶SETD1A、SETD5在乳腺癌的表达及与临床病理特征的相关性分析

目的分析赖氨酸甲基转移酶(SET domain containing 1A,SETD1A)、SET结构域5(SET domain-containing 5,SETD5)在乳腺癌中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法收集2020年1月至2022年2月在东营市人民医院乳腺甲状腺外科就诊的80例乳腺癌患者,GSCA网站对SET结构域家族成员进行筛选,预测其在乳腺癌组织中的表达情况并借助免疫组化SP法进行验证。χ^(2)检验与Logistic回归模型分析SETD1A、SETD5与患者临床病理特征相关性。结果GSCA网站显示SET结构域家族的SETD1A、SETD5在乳腺癌组织中表达较正常组织上调(均P<0.05)。免疫组化SP法实验显示乳腺癌组织中SETD1A、SETD5阳性表达率分别为73.8%、68.8%,显著高于癌旁组织SETD1A、SETD5阳性表达率38.8%(χ^(2)=19.91,P<0.001)与32.5%(χ^(2)=21.03,P<0.001)。χ^(2)检验结果显示SETD1A的表达与与淋巴结转移、血管浸润显著相关,SETD5的表达与神经浸润显著相关(均P<0.05)。Logistic回归模型显示SETD1A表达与淋巴结转移(OR=0.07,95%CI:0.01~0.25,P<0.001)、分子分型(OR=0.04,95%CI:0.00~0.48,P=0.022)存在相关性,SETD5表达与神经浸润(OR=6.41,95%CI:1.45~46.65,P=0.029)存在相关性。结论组蛋白甲基转移酶SETD1A、SETD5在乳腺癌组织中表达上调,且与患者淋巴结转移、血管浸润、神经浸润等病理特征存在相关性。