SET8蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 :探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET8蛋白表达与肾透明细胞癌预后的关系。方法:选取2008年1月—2012年1月河北医科大学第四医院收治的行肾癌切除术且经病理证实为肾透明细胞癌患者100例。采用免疫组织化学方法,对肾透明细胞癌组织中SET8的表达情况进行检测,分析SET8表达率与患者临床病理特征(性别、年龄、肿瘤分期、肿瘤大小及淋巴结转移情况)及5年生存率之间的关系。结果:100例肾透明细胞癌组织中,SET8蛋白高表达者46例,高表达率为46%(46/100)。单因素分析结果显示,肿瘤分期、肿瘤直径、淋巴结转移及SET8蛋白表达与患者5年生存率相关,差异有统计学意义(P值均<0.05),且SET8蛋白表达与肾透明细胞癌患者的肿瘤直径和淋巴结转移相关(P值均<0.05)。COX风险比例回归模型多因素分析显示,肿瘤直径>5 cm及SET8蛋白高表达能够使肾透明细胞癌患者死亡风险分别增加6.122倍和4.762倍(P值均<0.05)。结论:SET8蛋白高表达与肾透明细胞癌肿瘤直径大小和淋巴结转移密切相关,且SET8蛋白高表达是影响肾透明细胞癌患者预后的独立危险因素。

敲减SET8表达通过上调p53/DRAM1信号通路促进大鼠血管平滑肌细胞自噬和凋亡

目的:探讨赖氨酸甲基转移酶SET8(SET domain-containing protein 8)低表达通过p53/DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator 1)通路调控大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)自噬和凋亡的作用及机制。方法:体外原代培养大鼠VSMCs,敲减SET8表达,将细胞分为3组:正常组、空载体对照组和SET8-shRNA组。流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,Western blot检测SET8、p53、DRAM1、LC3、Bax和Bcl-2的蛋白水平。过表达DRAM1,将大鼠VSMCs分为3组:正常组、空载体对照组和DRAM1组。检测各组细胞活力,凋亡及DRAM1、LC3、Bax和Bcl-2的蛋白水平。敲减SET8表达的同时敲减p53或DRAM1表达,观察LC3、Bax和Bcl-2的蛋白表达情况。结果:(1)敲减SET8表达后,大鼠VSMCs凋亡显著增多,活力显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示,敲减SET8表达后,SET8和Bcl-2表达显著降低(P<0.05),p53、DRAM1、LC3-II和Bax表达显著升高(P<0.05)。(2)过表达DRAM1后,大鼠VSMCs凋亡显著增多(P<0.05),活力显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示,过表达DRAM1后,DRAM1、LC3-II和Bax表达显著升高(P<0.05),Bcl-2表达显著降低(P<0.05)。(3)敲减p53或DRAM1表达后,LC3-II和Bax表达降低,Bcl-2表达升高(P<0.05)。结论:敲减SET8表达可促进大鼠血管平滑肌细胞发生自噬和凋亡,可能机制是通过上调p53和DRAM1表达,促进自噬蛋白LC3-II及凋亡蛋白Bax表达实现的。