长链非编码RNA SFTA1P在肺鳞状细胞癌中的表达及其对肺鳞状细胞癌细胞生物学功能的影响

目的探究长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(surfactant associated 1 pseudogene,SFTA1P)在肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)中的表达水平及其对肺鳞癌细胞生物学功能的影响。方法提取癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库数据,分析SFTA1P在肺鳞癌组织及正常肺组织中的表达差异;qRT-PCR检测SFTA1P在人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和肺鳞癌细胞系(H520和SK-MES-1)中的表达;通过转染SFTA1P过表达质粒及SFTA1P小干扰RNA分别构建SFTA1P过表达及干扰细胞模型;通过CCK-8及Transwell实验检测SFTA1P对肺鳞癌细胞生物学功能的影响;通过差异分析、相关性分析和功能富集分析探讨SFTA1P影响肺鳞癌细胞生物学功能的潜在机制。结果TCGA数据库肺鳞癌样本分析结果显示,SFTA1P在肺鳞癌组织中表达较正常肺组织低(P<0.05);SFTA1P在肺鳞癌细胞中表达也较人正常肺上皮细胞低(P<0.05);在肺鳞癌细胞系中,相比于H520细胞株,SFTA1P在SK-MES-1细胞株中相对低表达(P<0.05);细胞功能实验结果发现,过表达SFTA1P可抑制肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),敲低SFTA1P可增强肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05);差异分析、相关性分析和功能富集分析结果表明,SFTA1P在肺鳞癌中可能抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路。结论SFTA1P在肺鳞癌中具有抑癌功能,其可能通过抑制MYC、G2m检查点和E2f等信号通路影响肺鳞癌细胞的生物学功能。

外泌体LncRNA SFTA1P和miR-483-3p诊断乙型肝炎病毒相关性肝癌的价值研究

目的分析血浆外泌体长链非编码RNA(LncRNA)SFTA1P和miR-483-3p在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝癌(HCC)的表达水平,评估其诊断价值。方法选择2022年1月—2024年1月本院收治的58例HBV相关性HCC患者作为HCC组;将同期收治的55例HBV患者作为HBV组;另选同期50名体检健康者作为对照组。运用纳米颗粒跟踪分析系统和蛋白质印迹分析鉴定血浆外泌体,并采用RT-qPCR检测外泌体LncRNA SFTA1P和miR-483-3p水平,分析二者水平分别与HCC临床病理特征之间的关系,Pearson法分析LncRNA SFTA1P和miR-483-3p表达水平的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA SFTA1P和miR-483-3p对HCC患者诊断的敏感性和特异性。结果外泌体LncRNA SFTA1P与miR-483-3p表达水平呈负相关(r=-0.7277,P<0.001)。与对照组相比,HBV、HCC组LncRNA SFTA1P水平依次增高,而miR-483-3p水平依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LncRNA SFTA1P、miR-483-3p表达水平与TNM分期,肿瘤分化程度、淋巴结转移、AFP及AST有关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小、ALT、γ-GGT无关(P>0.05)。LncRNA SFTA1P和miR-483-3p单独诊断HCC时的曲线下面积(AUC)分别为0.886、0.851,敏感度分别为86.20%、89.70%,特异度分别为78.00%、70.00%;联合诊断的AUC为0.957,敏感度和特异度分别为94.80%、82.00%。结论血浆外泌体LncRNA SFTA1P和miR-483-3p的联合诊断可提高HBV相关性HCC的诊断率,为其诊断及后续治疗提供新的研究思路。

野芋提取物通过SFTA1P对肝癌细胞生物学行为的影响

目的探讨野芋提取物对肝癌细胞生物行为的影响及分子机制。方法用浓度分别为5、10、15、20 mg/L的野芋提取物处理HCC9204肝癌细胞,作为不同剂量野芋提取物组;正常培养的HCC9204细胞作为对照组;将pcDNA3.1、pcDNA3.1-SFTA1P转染至HCC9204细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-SFTA1P组;将si-NC、si-SFTA1P转染至HCC9204细胞后用20 mg/L的野芋提取物处理,记为野芋提取物+si-NC组,野芋提取物+si-SFTA1P组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SFTA1P和miR-665的表达水平;双荧光素酶报告实验检测SFTA1P和miR-665的靶向关系。结果野芋提取物处理的肝癌HCC9204细胞,细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,克隆形成数显著减少,迁移细胞数显著减少(均P<0.05)。过表达SFTA1P可抑制肝癌HCC9204细胞存活、迁移,促进细胞凋亡。SFTA1P靶向调控miR-665。抑制SFTA1P表达可逆转野芋提取物对HCC9204细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结论野芋提取物可通过调控SFTA1P/miR-665轴抑制肝癌HCC9204细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡。

长链非编码RNA SFTA1P在肺腺癌中的表达及预后预测研究

目的探讨长链非编码RNA SFTA1P表达水平的变化与临床预后的关联,构建和评价SFTA1P用于肺腺癌患者预后预测的模型。方法实时荧光定量PCR检测SFTA1P在62对NSCLC组织以及相应的癌旁正常肺组织中的表达,分析SFTA1P表达水平的变化与临床预后的关联。在TCGA数据库中下载确诊为肺腺癌患者的数据集,提取所需的变量数据,整理了471例肺腺癌患者的临床参数信息和SFTA1P的表达量,利用单因素和多因素Cox比例风险回归模型筛选变量,基于最终预后预测模型构建列线图模型。预测模型进行内部验证采用Bootstrap重抽样法,采用一致性指数(concordance index,C-index)评价预测模型的区分度(discrimination),校准曲线评价模型的校准度(calibration)。结果相比于癌旁正常肺组织(1.765±0.149),SFTA1P在肺癌组织中的表达(0.692±0.103)显著下调(P<0.05)。通过单因素和多因素Cox比例风险回归模型,共筛选出3个独立的临床变量与肺腺癌患者的生存率相关,分别是病理分期、放疗和SFTA1P表达量的水平。使用这3个变量,加上年龄变量共同构建列线图模型。在1年和3年生存率校准曲线中,其预测值与实际值显示了较好的一致性。列线图模型的一致性指数C-index为0.69,95%置信区间:0.63~0.75。结论长链非编码RNA SFTA1P的表达量可以作为肺腺癌的一个独立预后因素;采用上述4个独立变量构建的列线图模型可以预测肺腺癌患者的生存率。

肺腺癌患者血清中lncRNA SFTA1P的表达及其诊断价值

目的评价肺组织特异的lncRNA SFTA1P在肺腺癌患者血清中的表达情况及其对肺腺癌的诊断价值。方法收集本院132名肺腺癌患者术前血清标本,同时选取年龄、性别匹配的73名健康体检者作为对照。采用实时定量PCR方法检测血清中lncRNA SFTA1P的表达水平,并采用受试者工作曲线分析其对肺腺癌的诊断价值。结果肺腺癌患者血清中lncRNA SFTA1P的水平显著高于健康对照(P<0.001),ROC曲线下面积为0.627。结论lncRNA SFTA1P是潜在的肺腺癌诊断的血清学标志物。

长链非编码RNA SFTA1P在非小细胞肺癌组织中的表达和细胞功能研究

目的研究长链非编码RNA SFTA1P在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,以及对NSCLC细胞系生物学功能的影响。方法运用定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测SFTA1P在18对非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的表达情况;用qRT-PCR检测5株NSCLC细胞系(A549、SPCA1、H1975、H460和H1299)和1株肺正常上皮细胞系(human bronchial epithelial,HBE)中SFTA1P的表达情况;构建SFTA1P的过表达载体,通过转染构建过表达细胞模型;运用CCK-8、Transwell等实验方法检测SFTA1P过表达对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移的影响。结果SFTA1P在非小细胞肺癌组织中的表达低于癌旁组织(t=2.158,P=0.043);与HBE细胞相比较,SFTA1P在A549和H460细胞系中相对低表达(t=5.769,P=0.004;t=5.772,P=0.004),在H1299和H1975细胞系中相对高表达(t=22.248,P<0.001;t=11.814,P<0.001);SFTA1P过表达质粒转染A549和H460细胞系后,与空质粒的对照组比较,SFTA1P的表达均升高,且有统计学差异(均有P<0.05);过表达SFTA1P可以抑制非小细胞肺癌细胞H460、A549的增殖、侵袭、迁移,差异有统计学意义(均有P<0.05)。结论SFTA1P基因能够抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学功能,SFTA1P在肿瘤发生和发展中可能起着抑癌基因的作用。