洛铂与放疗联合治疗对SGC-7901胃癌细胞凋亡的影响

目的观察洛铂与放疗联合治疗对SGC-7901胃癌细胞凋亡的影响。方法实验分为正常对照组、单纯化疗组、单纯放疗组、放疗化疗联合组。倒置显微镜观察细胞生长状态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR方法检测p53 mRNA表达。结果倒置显微镜观察,正常对照组的细胞呈多角形,细胞大小均匀。加入洛铂与照射后,细胞生长相对减慢,细胞体积变小,出现明显的细胞生长抑制。流式细胞仪检测细胞凋亡率,单纯化疗组与单纯放疗组的细胞凋亡率均高于正常对照组(P<0.01),联合组细胞凋亡率明显高于单纯化疗与单纯放疗组,差异有统计学意义(P<0.01)。联合组p53 mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.01),联合组p53 mRNA表达均高于单纯化疗组与单纯放疗组(P<0.05)。结论化疗与放疗联合应用增加胃癌细胞的凋亡率。

胃复康对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达的影响

目的探讨中药胃复康对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达的影响。方法PRMI1640血清培养的人SGC-7901胃癌细胞株分为胃复康实验组、生理盐水对照组和顺铂(DDP)化疗组。利用血清药理学方法制备药物血清,作用48h后,应用免疫细胞化学方法和图像分析方法观察胃复康、DDP对人SGC-7901胃癌细胞株p53、bcl-2基因表达影响。结果免疫细胞化学法显示抑癌基因p53和癌基因bcl-2主要定位在细胞质内。胃复康、DDP药物血清作用后,p53表达明显增强,bcl-2表达明显降低;随着作用时间延长,两种基因表达改变更明显。胃复康、DDP药物血清组p53和bcl-2表达的光密度值(AOD)与对照组差异显著(P<0.01)。结论中药胃复康药物血清上调p53和下调bcl-2的表达可能是其抑制胃癌细胞株SGC-7901的作用机制之一。

金雀异黄素对SGC-7901胃癌细胞超微结构及极光激酶A基因表达的影响

应用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)技术、Real-time PCR及Western blotting方法,分别检测金雀异黄素(genistein)对SGC-7901胃癌细胞超微结构、Aurora-A基因mRNA和蛋白表达的影响。AFM扫描显示,经20μg/mLgenistein处理SGC-7901胃癌细胞48 h,细胞的超微结构呈现凋亡形态特征改变;Aurora-A表达分析,5μg/mL组、10μg/mL组和20μg/mL组与对照组比较,其mRNA表达量分别下降(31.6±0.02)%、(38.8±0.04)%和(59.9±0.02)%,其中5μg/mL组与10μg/mL组间比较无显著性差异(P>0.05),其余组间比较均有显著性差异(P<0.05);其蛋白表达量分别下降(26.8±0.04)%、(33.0±0.10)%和(48.5±0.09)%,组间比较均有显著性差异(P<0.05)。由此推断金雀异黄素诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的分子机制可能涉及极光激酶A mRNA及蛋白表达下调。

葫芦素D通过下调GATA6表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖迁移的作用机制研究

目的:探讨葫芦素D通过下调GATA转录因子6(GATA6)表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法:体外培养SGC-7901细胞,用MTT法检测葫芦素D对SGC-7901细胞抑制率并确定葫芦素D的干预剂量,将细胞分为对照组、顺铂组、葫芦素D低、中、高剂量组。对照组不进行处理,顺铂组给予终浓度为10.0μmoL/L的顺铂,葫芦素D低、中、高剂量组分别给予终浓度为2.0、4.0、8.0μmoL/L的葫芦素D,继续培养48h后进行检测SGC-7901细胞迁移能力、SGC-7901细胞中miRNA-143和GATA6 mRNA表达水平及细胞凋亡和细胞周期情况测定。结果:随着葫芦素D剂量增加,SGC-7901细胞抑制率增加(P<0.05)。在葫芦素剂量为8.0μmoL/L时,抑制率为53.07%,故选8.0μmoL/L作为最高干预剂量,并设2.0μmoL/L和4.0μmoL/L两个剂量。与对照组比较,顺铂组SGC-7901细胞迁移能力、GATA6 mRNA相对表达量和G0/G1期细胞比例降低,miRNA-143 mRNA的相对表达量、细胞凋亡率和S期细胞比例增加(P<0.05);给予葫芦素D处理后,SGC-7901细胞迁移能力、GATA6 mRNA相对表达量和G0/G1期细胞比例降低,miRNA-143 mRNA的相对表达量、细胞凋亡率和S期细胞比例增加,且呈剂量依赖性(P<0.05),但效果不如顺铂组。结论:葫芦素D能抑制SGC-7901胃癌细胞增殖和迁移,具有一定的抗癌活性,其机制可能与葫芦素D通过下调GATA6表达有关。

金边地鳖血淋巴的活性成分及其对SGC-7901胃癌细胞抑制作用

为药用昆虫金边地鳖的深入开发利用提供参考,采用荧光染色法与气相色谱-质谱(GC-MS)法相结合,探究金边地鳖血淋巴的活性成分及其对SGC-7901胃癌细胞活力的抑制作用。结果表明:金边地鳖血淋巴对SGC-7901胃癌细胞的增殖具有显著的抑制作用,且呈时间与浓度的依赖关系;金边地鳖血淋巴脂溶性成分主要为脂肪酸类物质,从中分离出21种化合物,占其总量的64.814%。

miR-140在人胃癌组织中的表达及对SGC-7901胃癌细胞功能的影响

目的:研究microRNA-140(miR-140)在人胃癌和正常胃组织中的表达水平,以及调控miR-140表达后对SGC-7901胃癌细胞功能的影响。方法:采用实时荧光定量PCR检测miR-140在人胃癌和正常胃组织中的表达水平;将miR-140 mimics(miR-140上调表达)和miR-140 inhibitors(miR-140下调表达)分别通过脂质体转染至人胃癌SGC-7901细胞中,同时设置未转染对照组(control组)和miRNA无义序列转染对照组(NC组)。实时荧光定量PCR检测转染后各组细胞中miR-140的表达变化;MTT方法检测各组细胞的生长活力和顺铂(DDP)作用下的生长抑制率;流式细胞术检测各组的细胞周期和凋亡率;Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;Western blot检测各组细胞中组蛋白脱乙酰酶4(HDAC4)蛋白表达。结果:miR-140在人胃癌组织中表达水平显著低于正常胃组织(P<0.05)。与control和NC组相比,miR-140 mimics组中SGC-7901细胞活力和侵袭能力下降,细胞周期被阻滞,DDP作用下细胞生长抑制率和凋亡率上升,且HDAC4蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);而miR-140 inhibitors组中SGC-7901细胞活力和侵袭能力上升,细胞周期被促进,DDP作用下细胞生长抑制率和凋亡率下降,且HDAC4蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-140在胃癌组织中低表达,可作为抑癌因子调控胃癌细胞活力、细胞周期变化、凋亡、侵袭并通过下调HDAC4发挥作用。miR-140可能作为胃癌诊断和治疗的新靶点。

鸡屎藤苷酸诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭

目的:初步探索鸡屎藤苷酸(PA)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡并抑制细胞恶性增殖和侵袭的可能机制。方法:选取SGC-7901胃癌细胞为研究对象,利用CCK-8法进行浓度梯度实验确定后续实验浓度,利用流式细胞术检测0、20、40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率以及线粒体膜电位变化情况,BrdU法和Transwell小室实验SGC-7901胃癌细胞的增殖活性以及侵袭能力,qRT-PCR检测抑癌基因P53、P21的mRNA相对表达水平,Western Blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-Myc和转移相关蛋白VEGF、波形蛋白表达水平。结果:CCK-8梯度浓度试验发现PA浓度从40μg/mL开始对SGC-7901胃癌细胞活性产生了明显抑制作用(P<0.05),后续以20、40、80μg/mL为试验浓度;与0μg/mL的PA处理比较,40、80μg/mL的PA处理后SGC-7901胃癌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Cleaved-Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平以及P53、P21相对表达量升高,线粒体膜电位、细胞增殖活性、侵袭率、c-Myc、VEGF、波形蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:PA可能通过降低线粒体膜电位促进线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,促进抗癌基因表达抑制细胞的恶性增殖,并抑制上皮间质转化降低侵袭能力。

端粒酶反义寡核苷酸对SGC-7901胃癌细胞生长的作用

目的 探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸 (PS ASODN)对胃癌细胞生长的作用。方法 脂质体介导的PS ASODN作用于SGC 790 1细胞后 ,MTT法计算细胞生长抑制率 ,流式细胞学观察细胞周期及细胞凋亡率变化。结果 终浓度为 3、2及 1μM的PS ASODN对SGC 790 1细胞均有抑制作用 ,抑制率与对照组相比差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;流式细胞学检测到凋亡峰 ,细胞阻滞于G0 /G1期。对照寡核苷酸无上述作用。结论 以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸不但明显抑制胃癌细胞的增殖 ,而且具有促凋亡作用 。

干扰Timeless表达对SGC-7901胃癌细胞凋亡与周期及β-catenin表达的影响

目的探讨干扰Timeless表达对SGC-7901胃癌细胞凋亡、周期及β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法合成Timeless的siRNA,通过Lipofectamine?3000转染SGC-7901细胞,检测并选择干扰效率高的siRNA用于Timeless干扰组细胞造模。设置分组:空白组,siRNA-对照组和siRNA-Timeless组。Realtime PCR及western blot法检测Timeless、β-catenin mRNA及蛋白表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果Realtime PCR及western blot法均证实Timesless-siRNA-2转染效率最高。与空白组及siRNA-对照组比较,siRNA-Timeless组Timeless、β-catenin mRNA及蛋白表达量下调(P<0.01),细胞活力降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞周期阻滞于S期(P<0.01)。结论干扰Timeless表达能显著诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,与下调β-catenin表达有关。

姬松茸菌孢多糖对SGC-7901胃癌细胞增殖影响的实验研究

目的 :研究姬松茸菌孢多糖体外对SGC 790 1胃癌细胞恶性增殖的影响。方法 :采用集落形成法、MTT比色法、生长曲线法。结果 :与对照组相比 ,各剂量姬松茸菌孢多糖对SGC 790 1细胞成集落数均有抑制作用 (P <0.0 1) ,其IC50 是 3 1 2 5mg/mL ,且随剂量增加其抑制作用增强 ,呈剂量 -效应关系 ;与对照组相比较 ,姬松茸菌孢多糖各剂量对SGC 790 1细胞增殖均有抑制作用 (P <0. 0 1) ,当其为 3 1 2 5 μg/μL时其细胞存活率为 5 1% ,有剂量 -效应关系 ;生长曲线显示 ,对照组SGC 790 1细胞在接种后第二天开始快速生长 ,第三天细胞数量已高于药物组 (P <0 0 5 ) ,而姬松茸菌孢多糖处理的SGC 790 1细胞从第一天起生长即受到不同程度抑制 ,且随剂量和时间的增加 ,抑制作用越明显。结论 :姬松茸菌孢多糖在体外能抑制SGC 790

复方蜥蜴散不同微粒组合剂含药大鼠血清对人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53的影响

目的:研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂含药SD大鼠血清对人SGC-7901胃癌细胞SITR1、P53表达水平的影响及机制。方法:160只SPF级雄性SD大鼠随机分8组,每组20只。各组分别予相应药物干预1周后,于腹主动脉处取血,离心,制备含药血清,加于人SGC-7901胃癌细胞培养24h,Western-Blot检测人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53表达水平。结果:(1)80目+100目高剂量组表达低于其他药物组(P<0.05)。(2)P53蛋白表达比较:复方蜥蜴散各组表达均低于华蟾素片阳性对照组、5-Fu阳性对照组(P<0.05);80目+100目混合组表达低于80目组、100目组(P<0.05);80目+100目高剂量组的表达低于80目+100目中、低剂量组(P<0.05)。结论:复方蜥蜴散可通过干预SIRT1、P53蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

不同浓度稀释碘伏联合顺铂对SGC-7901胃癌细胞生长的影响

目的进一步探讨不同浓度稀释碘伏对体外培养SGC-7901细胞生长的影响。方法体外培养SGC-7901细胞,待其生长至对数期时,接种96孔板,至细胞贴壁后分别以浓度梯度的稀释碘伏及碘伏与顺铂联合处理SGC-7901细胞,MTT法检测两种方案的药物对细胞增殖的影响;AO/EB染色方法观察其对肿瘤细胞形态学改变的影响。结果浓度梯度的稀释碘伏及碘伏联合顺铂对SGC-7901细胞的生长均有明显的增殖抑制作用,且呈浓度时间依赖性;AO/EB染色结果可见:随药物浓度的增大,活细胞量逐渐减少,胞质变少,体积缩小、胞核浓缩,于镜下可见凋亡小体。结论稀释碘伏对SGC-7901细胞的增殖抑制作用显著,对细胞凋亡具有一定的诱导作用。

基于三七、莪术提取物联合氟尿嘧啶对胃癌SGC-7901细胞的干预作用及机制研究

目的:观察三七、莪术提取物联合氟尿嘧啶对胃癌SGC-7901细胞的干预作用。方法:在SGC-7901细胞建立体外模型的基础上,通过MTT法筛选药物浓度、检测细胞活性,RT-PCR、Western Blot检测相关基因LATS2、MST1、MOB、YAP表达水平。结果:通过MTT检测分析,氟尿嘧啶和中药均可抑制SGC7901细胞增殖,且具有剂量依赖性,相比于对照组,氟尿嘧啶联合中药可显著抑制细胞增殖,RT-PCR实验分析发现,相比于对照组,氟尿嘧啶和中药均可显著提高细胞中LATS2、MOB的表达水平,显著降低MST1、YAP的表达水平,且联合使用改变更为明显。Western Blot分析检测亦发现,氟尿嘧啶和中药均可显著提高细胞中LATS2、MOB的表达水平,显著降低MST1、YAP的表达水平且联合使用改变更为明显。结论:三七、莪术提取物联合氟尿嘧啶可明显阻止胃癌细胞的增殖和侵袭、迁移能力,并可显著提高细胞中LATS2、MOB的表达程度,显著降低MST1、YAP的表达程度,在阻止胃癌细胞的增殖方面具有剂量依赖性。

秦皮乙素对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响

目的探讨秦皮乙素(AES)对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响及相关机制。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;葡萄糖摄取量测定和乳酸含量测定实验检测细胞糖酵解情况;Western blot法检测迁移、侵袭及糖酵解相关蛋白的表达水平。结果AES能够抑制SGC-7901细胞的增殖活力,且这种抑制效果与AES的剂量成正相关。随着AES剂量的梯度增加,SGC-7901细胞的迁移、侵袭及糖酵解能力逐渐降低(P<0.05)。AES可以下调SGC-7901细胞HIF-1α、MMP-2、MMP-9、GLUT1、LDHA蛋白的表达水平(P<0.05)。结论AES对人胃癌SGC-7901细胞增殖活性及迁移、侵袭能力有抑制作用,通过抑制人胃癌SGC-7901细胞的葡萄糖摄取及乳酸生成降低糖酵解水平。AES可能通过影响缺氧诱导因子HIF-1α抑制SGC-7901细胞迁移、侵袭及有氧糖酵解过程。

白术水提物通过PI3K-Akt-NF-κB通路抑制胃癌SGC-7901细胞的潜在机制

目的:探讨白术(Atractylodes macrocephala)水提物抑制胃癌SGC-7901细胞活性的潜在机制。方法:分别使用蒸馏水(对照)和白术水提物(白术治疗组)灌胃SD大鼠后,采集静脉血后分离其血清、过滤并分别命名为对照组血清(CON-S)和白术组血清(AM-S)。将胃癌SGC7901细胞分为对照组、10%AM-S组和20%AM-S组,其中两个AM-S组细胞分别在相应浓度的AM-S血清中培养24 h,对照组细胞用正常培养基培养相同时间,收取SGC7901细胞和上清液用于进一步分析。使用MTT法检测各组细胞活力,通过商业试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平,采用ELISA试剂盒检测各组细胞中IL-6和TNF-α的含量,采用WB法评估各组细胞中PI3K-Akt-NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果:10%AM-S组和20%AM-S组的SGC7901胃癌细胞增殖活力相较于对照组分别降低48.9%和53.25%(P<0.05或P<0.01);胃癌细胞上清液中,相较于对照组,10%AM-S组和20%AM-S组LDH水平分别升高29.25%和123%、SOD活性分别升高18%和54.60%、MDA水平分别降低27.8%和40.0%,IL-6水平分别降低15%和17.5%、TNF-α水平分别降低29.71%和40.16%(P<0.05或P<0.01)。相较于对照组,AM-S组中PI3K-AktNF-κB信号相关蛋白的水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:白术水提物可以通过抑制癌细胞增殖活力、促进凋亡、抑制肿瘤微环境中的促炎因子分泌以及改变细胞内的氧化应激水平等方式抑制胃癌,其机制可能是通过抑制PI3K-Akt-NF-κB通路来实现这些抗癌作用的。

miR-497阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制SGC-7901人胃癌失巢凋亡抵抗细胞的生长和转移

目的 探讨微小RNA 497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制。方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中,重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型,集落形成实验、流式细胞术、 TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学行为与亲本细胞的差异、荧光定量PCR检测miR-497表达、 Western blot法检测无翅基因/β联蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白如波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)等表达的变化;亲本细胞和凋亡抵抗SGC-7901细胞转染miR-497抑制物(miR-497 inhibitor)或miR-497模拟物(miR-497 mimic), CCK-8法检测其增殖活性、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力、 TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移能力、 Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。通过在失巢凋亡抵抗SGC-7901细胞中转染miR-497 mimic,在裸鼠皮下接种,测量并记录肿瘤组织的体积及质量的变化,Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。结果 与亲本细胞相比,SGC-7901胃癌失巢凋亡抵抗细胞增殖速度更快、集落形成更强,凋亡率更低,侵袭和迁移能力更强,miR-497表达明显下降。下调miR-497后细胞增殖能力显著增强,侵袭、迁移能力明显增强,Wnt1、 β-catenin蛋白表达量显著增加,vimentin表达显著增加,E-cadherin表达下降,而上调miR-497表达结果相反。miR-497过表达组的肿瘤组织生长速度、肿瘤的体积与质量明显低于对照组;Wnt1、 β-catenin、 vimentin蛋白表达量显著下降,而E-cadherin表达明显上调。结论miR-497在SGC-7901失巢凋亡抵抗细胞中低表达,miR-497通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活化和EMT,抑制胃癌细胞的生长和转移。

芒柄花黄素对人胃癌细胞系SGC7901生长、增殖及侵袭影响

目的:探讨芒柄花黄素(Form)对人胃癌细胞株SGC7901的作用及机制。方法:用不同浓度(0、20、40、80μmol/L)Form处理SGC7901后,采用Hoechst、MTT、流式细胞术等检测细胞抑制率、细胞周期、细胞核形态及凋亡。采用蛋白质印迹检测β-Catenin、p-β-Catenin、Cyclin D1、CDK4及p-AKT、AKT、BCL-2、BAX、Caspase3等蛋白的表达,RT-PCR检测BCL-2、CDK4、CDK6、AKT、Cyclin D1及BAX、Caspase3等m RNA表达。结果:Form抑制SGC7901细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性。Hoechst结果表明,相比于对照组(0μmol/L),实验组Form(20、40、80μmol/L)作用48 h后,细胞核固缩、溶解,破裂后呈颗粒状聚集。流式细胞术结果显示,不同浓度Form处理48 h,细胞凋亡率分别为17.0%、21.5%、32.5%,呈浓度依赖性。RT-PCR结果显示,SGC7901中Caspase3、BAX m RNA表达量随Form浓度增加而上升(P<0.01);BCL-2、CDK4、CDK6、AKT、Cyclin D1的m RNA表达量逐渐降低(P<0.01)。WB结果表明,SGC7901细胞中β-Catenin、p-β-Catenin、Cyclin D1、CDK4以及p-AKT、AKT、BCL-2等蛋白的相对表达量随Form浓度增加而降低(P<0.01);Caspase3、BAX等蛋白表达逐渐上升(P<0.01)。结论:Form具有促进SGC7901细胞凋亡的作用;其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号,活化Caspase家族实现的。

氧化苦参碱对SGC-7901胃癌细胞增殖及对血管内皮生长因子表达的影响

目的研究中药苦参有效成分氧化苦参碱对SGC-7901胃癌细胞增殖及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法用质量浓度为0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 g·L^(-1)的氧化苦参碱干预SGC-7901胃癌细胞分别为0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 g·L^(-1)质量浓度实验组,无任何药物处理的SGC-7901胃癌细胞为对照组。用噻唑蓝(MTT)法检测各组SGC-7901胃癌细胞培养第1,2,3,4天的增殖情况。用1.0,2.0和4.0 g·L^(-1)氧化苦参碱处理SGC-7901细胞并培养48 h后,用实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组VEGF mRNA的表达情况。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组蛋白表达情况。结果细胞培养第4天,对照组和0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 g·L^(-1)实验组的增殖抑制率分别为(4.15±3.93)%,(14.79±1.66)%,(31.65±2.07)%,(41.57±2.93)%,(64.37±4.13)%,(79.17±4.75)%,与对照组相比,各质量浓度实验组SGC-7901胃癌细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.01)。实验组的增殖抑制率随着培养时间和药物浓度的增加而增加(P<0.05或P<0.01)。氧化苦参碱干预48 h后,对照组和1.0,2.0和4.0 g·L^(-1)实验组VEGF mRNA表达量分别为0.82±0.03,0.65±0.05,0.54±0.06,0.46±0.04,与对照组比较,实验组VEGF mRNA表达量明显降低,且随氧化苦参碱质量浓度的升高其VEGF mRNA表达量呈逐渐降低趋势,组间差异均有统计学意义(均P<0.01)。对照组和0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 g·L^(-1)实验组上清液中VEGF蛋白表达量分别为(1326.52±139.57),(1305.69±119.88),(1235.59±102.36),(1083.33±89.65),(789.85±95.26),(426.59±83.16)pg·mL^(-1),与对照组相比,2.0,4.0,8.0 g·L^(-1)实验组细胞上清中VEGF蛋白表达量随氧化苦参碱质量浓度的增加而逐渐降低(P<0.05)。结论氧化苦参碱可抑制SGC-7901胃癌细胞增殖,增殖抑制率与作用时间、药物浓度呈正比,同时氧化苦参碱具有抑制相关肿瘤血管生成因子表达的作用。

茯苓对裸鼠SGC-7901胃癌细胞移植瘤的影响

目的研究中药茯苓对SGC-7901胃癌细胞株裸鼠体内移植瘤的影响。方法 1将10只裸鼠建立移植瘤模型后,随机分为空白对照组和茯苓组,每组5只,分别给予生理盐水和茯苓灌胃(0.5 mL),连续灌胃32 d。每间隔3 d计算移植瘤的体积,绘制移植瘤生长曲线。至第32天时处死裸鼠,称取瘤体重量,计算抑瘤率;同时采用免疫组化染色方法检测2组裸鼠移植瘤组织中B细胞淋巴瘤基因-2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。2制备含茯苓血清。将SGC-7901胃癌细胞株分为2组,空白对照组加入含生理盐水血清,茯苓组加入含茯苓血清的培养液培养。分别于处理后24 h和48 h行Western-blot法检测胃癌细胞中Bcl-2及Bax的表达。结果第32天时,空白对照组〔(2 652.17±225.01)mm3和(2.48±0.21)g〕裸鼠的移植瘤体积和质量均大于茯苓组〔(1 247.56±277.23)mm^3和(1.28±0.28)g〕,差异均具有统计学意义(P<0.050)。茯苓的抑瘤率为48.39%。免疫组化检测结果显示,茯苓组裸鼠移植瘤组织中Bcl-2〔(4.20±1.10)分和(8.00±1.20)分〕和VEGF〔(3.80±0.45)分和(7.80±1.10)分〕的表达均低于空白对照组(P<0.050),而Bax〔(7.40±1.34)分和(3.00±0.71)分〕、Caspase-3〔(6.60±1.34)分和(2.60±0.55)分〕及Caspase-9〔(7.20±1.79)分和(4.00±1.22)分〕的表达均高于空白对照组(P<0.050)。与空白对照组(1.72±0.03)比较,24 h(0.96±0.04)和48 h(0.77±0.04)时茯苓组Bcl-2的表达水平均较高(P<0.050),且茯苓组48 h时Bcl-2的表达水平高于24 h时(P<0.050);与空白对照组(0.15±0.01)比较,24 h时(0.19±0)茯苓组Bax的表达水平变化不明显(P>0.050),但48 h时(0.55±0.01)Bax的表达水平高于空白对照组和24 h茯苓组(P<0.050)。结论茯苓能够抑制裸鼠移植瘤的生长,其机理可能与线粒体凋亡通路及抑制VEGF的表达有关。

Akt特异性抑制剂MK-2206对SGC-7901胃癌细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)抑制剂MK-2206对SGC-7901胃癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:取对数生长期的SGC-7901胃癌细胞,采用MMT法分别检测0(未给药)、0.5、1.0、2.5、5.0、10、20、30μmol/L的MK-2206作用24 h后细胞的增殖情况;采用流式细胞术分析0、2.5、5.0μmol/L的MK-2206作用24 h后细胞的周期分布;检测0、2.5、10、20μmol/L的MK-2206作用24 h后细胞的凋亡率和细胞周期相关蛋白p21、p27、Cyclin D1以及凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的表达。结果:与未给药比较,5.0、10、20μmol/L的MK-2206均能明显抑制SGC-7901细胞的增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性;MK-2206阻滞细胞于G1期。与未给药比较,MK-2206能抑制Cyclin D1表达,上调p21和p27表达,其中20μmol/L的MK-2206作用最强(P<0.05)。SGC-7901细胞经MK-2206作用后,细胞出现明显的凋亡现象,且细胞内Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和PARP的表达均增加,其中20μmol/L的MK-2206作用最强(P<0.05)。结论 :MK-2206对SGC-7901细胞的增殖具有明显的抑制作用,并通过调控Caspase家族成员的活性诱导细胞凋亡。