SGI-1776对氧化应激诱导的HUSAEC细胞增殖的影响及机制

目的检测SGI-1776对H2O2氧化应激诱导人子宫螺旋动脉内皮细胞(HUSAEC)增殖的影响及其可能机制。方法体外培养HUSAEC细胞,在添加H2O2氧化应激诱导之前先加入不同浓度的SGI-1776(2.5、5、10μmo L/L)预孵30 min,MTT检测SGI-1776对氧化应激HUSAEC的增殖促进作用;FCM检测SGI-1776对氧化应激HUSAEC细胞周期分布及凋亡的影响;用Western blot、si RNA/c DNA转染检测SGI-1776对氧化应激HUSAEC细胞增殖促进作用的可能分子生物学机制。结果 MTT提示SGI-1776呈浓度和时间依赖性增加氧化应激诱导的HUSAEC细胞的增殖活性(P<0.05),与H2O2组相比较,降低氧化应激HUSAEC细胞G2/M期细胞比率及凋亡率(P<005),伴随着cortactin蛋白表达上调(P<0.05);用si RNA干扰沉默cortactin基因表达,则cortactin蛋白表达下调,而SGI-1776能部分抵消si RNA对氧化应激的HUSAEC细胞cortactin蛋白的下调作用;用c DNA转染氧化应激的HUSAEC细胞,则能与SGI-1776部分协同促进cortactin蛋白的表达。结论 SGI-1776通过上调cortactin蛋白表达,降低G2/M期细胞比率,降低细胞凋亡率而发挥其促进氧化应激HUSAEC细胞增殖作用,提示cortactin蛋白是子痫前期治疗的新的靶分子。

SGI-1776钝化Pim-1对卵巢癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制(英文)

目的:检测SGI-1776对卵巢癌HO-8910细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其可能机制。方法:体外培养卵巢癌HO-8910细胞;MTT法和克隆形成法检测SGI-1776对HO-8910细胞的增殖抑制作用;PI染色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测SGI-1776对HO-8910细胞周期分布的影响;Transwell法检测SGI-1776对HO-8910细胞迁移及侵袭的抑制作用;ELISA,Western印迹,siRNA/cDNA转染检测SGI-1776对HO-8910细胞增殖、迁移、侵袭抑制作用的可能分子机制。结果:SGI-1776在体外对HO-8910细胞增殖、迁移、侵袭呈现出浓度依赖性的抑制作用,阻滞细胞周期于G1期。随Pim-1激酶活性降低,Pim-1蛋白表达下调,同时Pim-1下游蛋白CDK6,pCDK6,CDK4,pCDK4,CDK2和pCDK2表达下调,而P21和P27蛋白表达上调。用siRNA干扰沉默Pim-1基因,则SGI-1776对HO-8910细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用明显加强;用Pim-1-cDNA转染HO-8910细胞,则能部分抵消SGI-1776对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论:SGI-1776通过钝化Pim-1而发挥其抑制卵巢癌HO-8910细胞增殖、迁移和侵袭的作用,提示Pim-1是卵巢癌治疗的新的分子靶。