补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响

目的探讨补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响。方法采用"大黄+利血平+控制饮食"的多因素法建立脾虚泄泻大鼠模型,连续造模15 d;大鼠随机分为正常组,模型组,补中益气汤低、中、高剂量组(4.67,9.35,18.70 g·kg-1),连续给药15 d;观察并计算大鼠腹泻指数;测定大鼠肠黏膜Na+-K+ATP酶的活性;Western Blot法检测钠依赖性葡萄糖转运体(SGLT1)、葡萄糖转运体2(GLUT2)、钠-氢交换体3(NHE3)、p38MAPK、p-p38MAPK、MAPKAPK2、p-MAPKAPK2、Akt2、p-Akt2、Ezrin、p-Ezrin蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著降低(P<0.01),小肠黏膜中SGLT1、GLUT2、NHE3、p-p38MAPK、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组大鼠在第25,30天的腹泻指数明显下降(P<0.05,P<0.01),补中益气汤高剂量组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著提高(P<0.05),补中益气汤中、高剂量组的SGLT1、GLUT2蛋白相对表达量及补中益气汤高剂量组的NHE3、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论通过提高SGLT1蛋白的表达,促进p38MAPK/Ezrin通路中蛋白的磷酸化,可能是补中益气汤治疗脾虚泄泻的机理之一。

白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制研究

目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制。方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑制剂组,采用2-NBDG测定白术内酯Ⅰ对Caco-2细胞葡萄糖摄取的影响;Western Blot法检测SGLT1、p-P38MAPK、p-MAPKAPK2、p-AKT2、p-Ezrin、MLCK、p-MLC、NHE3等蛋白表达,荧光定量PCR检测SGLT1、MLCK、NHE3 mRNA表达。结果:白术内酯Ⅰ促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,上调SGLT1、NHE3、MLCK的表达;此外,白术内酯Ⅰ增加了MLCK和P38MAPK/Ezrin信号通路中的蛋白磷酸化。结论:白术内酯Ⅰ可激活SGLT1促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,通过P38MAPK/Ezrin信号通路上调其下游靶点NHE3和MLCK促进水钠吸收是其治疗腹泻的机制之一。

木糖醇饮料对溃疡性结肠炎小鼠结肠病变的影响

目的考察木糖醇饮料对溃疡性结肠炎小鼠结肠病变的影响。方法SPF雄性小鼠随机分为正常组、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型组及木糖醇饮料高、中、低剂量组。正常组给予蒸馏水;模型组给予2.5%硫酸葡聚糖钠(DSS)溶液自由饮用诱导其溃疡性结肠炎;木糖醇饮料高、中、低剂量组分别给予含有不同浓度木糖醇(10%、5%、2.5%)的DSS溶液。各组小鼠连续自由饮用相应液体10 d。实验结束时,检测各组小鼠结肠的病理变化,同时测定结肠紧密连接蛋白(ZO-1与Occludin)、钠葡萄糖转运蛋白(SGLT-1)和钠氢协同转运蛋白(NHE3)的表达水平。结果与正常组比较,DSS造模后的UC小鼠出现稀便,疾病活动指数显著升高(P<0.05)。与UC模型组比较,木糖醇饮料组肠道长度显著缩短、肿胀,结肠黏连和坏死的情况明显加重,ZO-1、Occludi、SGLT-1及NHE3的表达显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论高浓度木糖醇饮料可加剧UC小鼠结肠病变及屏障功能的破坏。