p38 MAPK抑制剂对高糖诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的作用及机制

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)抑制剂对高糖诱导神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的保护作用及机制。方法将培养好的SH-SY5Y细胞随机分为6组,A、B、C组分别加入45、90、135 mmol/L高糖进行处理; D、E组分别加入10、25μmol/L的p38 MAPK抑制剂PD169316预处理30 min,之后加入135 mmol/L高糖溶液进行培养;对照组常规培养不做干预;另随机选部分细胞用135 mmol/L高糖处理3 h作为高糖对照组。采用Western blotting法检测细胞内磷酸化p38 MAPK及凋亡相关蛋白,用Annexin V-PI染色法检测细胞凋亡。结果高糖处理1. 5、3 h,与对照组比较,A、B、C组磷酸化p38 MAPK蛋白相对表达量呈浓度依赖性升高、抗凋亡蛋白BCL-2相对表达量低、促凋亡蛋白BAX、BID、BAD相对表达量高(P均<0. 05)。高糖处理6 h,A组BCL-2蛋白相对表达量低,BAX、BID、BAD蛋白相对表达量高(P均<0. 05),而B、C组促凋亡蛋白未见明显变化(P均> 0. 05)。与高糖对照组比较,D、E组磷酸化p38 MAPK蛋白相对表达量低(P均<0. 05),BCL-2蛋白蛋白相对表达量高(P均<0. 05),BAD蛋白及BID蛋白相对表达量低(P均<0. 05),E组以上指标变化最明显(P均<0. 05)。与对照组比较,C组细胞凋亡重;与C组比较,E组细胞凋亡轻。结论 p38 MAPK抑制剂可抑制高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其作用机制可能与调控抗凋亡蛋白及促凋亡蛋白表达有关。