SHIP1在肿瘤发生发展及免疫调节中的作用

含有SH2区域的肌醇5′磷酸酶1(SHIP1)是一类主要但不完全表达在造血源性细胞胞质中的磷酸酶蛋白,属于肌醇5′磷酸酶家族,是磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路的重要负性调控因子。PI3K信号通路已被证明在肿瘤的发生发展中起作用,而SHIP1作为磷酸肌醇信号通路的调节因子,是肿瘤发生发展和免疫调节中不容小觑的一环。本文旨在总结SHIP1在肿瘤发生发展和免疫调节中的作用,以探寻肿瘤治疗新途径。

SHIP2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SH2 domain containing 5’-inosi-tol phosphatase-2,SHIP 2)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学技术检测SHIP2蛋白在54例喉鳞癌组织及16例喉癌旁黏膜组织中的表达。结果 SHIP2蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高,其表达与喉鳞癌T分期、临床分期、转移及复发密切相关(P<0.05);生存分析表明SHIP2高表达组与低表达组患者5年无瘤生存率分别为19.2%和64.3%,5年总生存率分别为26.9%和85.7%,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析示SHIP2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素。结论 SHIP 2蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用,且具有预后评估价值。

SHIP1在胶质瘤中的表达水平及其生物学功能研究

目的研究含有肌醇-5′-磷酸酶1的Src同源物2(Src homology 2-containing inositol-5′-phosphatase 1,SHIP1)在胶质瘤组织中的表达水平及相关临床意义,并研究SHIP1在胶质瘤中发挥的生物学功能。方法qRT-PCR检测SHIP1 mRNA在45例胶质瘤组织和15例正常脑组织中的表达水平,并分析SHIP1 mRNA在胶质瘤组织中的表达水平与患者临床病理参数的关系,Kaplan-Meier生存曲线分析SHIP1 mRNA表达对患者预后的影响,Cox多因素分析影响胶质瘤患者预后的独立预后危险因素。构建SHIP1过表达质粒,转染胶质瘤细胞系U87,采用MTS实验检测SHIP1对细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测SHIP1对细胞周期的影响,Boyden实验检测SHIP1对细胞侵袭能力。结果qRT-PCR结果显示SHIP1 mRNA在胶质瘤组织中的表达显著低于正常脑组织,其低表达与肿瘤WHO分级相关,SHIP1低表达的胶质瘤患者生存期较短,WHO分级和SHIP1低表达是胶质瘤患者预后不良的独立危险因素。转染SHIP1过表达质粒后,U87细胞增殖和侵袭能力下降,细胞阻滞在G0/G1期。结论SHIP1在胶质瘤组织中低表达,且其低表达与WHO分级及不良预后相关,是患者预后不良的独立危险因素。同时SHIP1抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭能力。SHIP1具有作为胶质瘤患者预后分子标志物及治疗靶点的潜力。

SHIP1调控STAT3信号通路对白血病Jurkat细胞活力和凋亡的影响

目的:探讨含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1(SHIP1)通过调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对人白血病细胞活力和凋亡的影响。方法:以白血病Jurkat细胞为研究对象,将转染空载体和SHIP1过表达载体的细胞分别记为阴性对照(NC)组和SHIP1组,同时以不作处理的细胞为空白对照(control)组,用real-time PCR和Western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的caspase-3(cleaved caspase-3)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。同时,用STAT3信号通路抑制剂AG490作用于control组和SHIP1组细胞,分别记为control+AG490组和SHIP1+AG490组,再观测上述指标的变化。结果:分别与control组和NC组比较,SHIP1组SHIP1的mRNA表达水平和蛋白水平均显著升高(P<0.05);细胞存活率显著降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05)。分别与control组和control+AG490组比较,SHIP1+AG490组的细胞存活率显著降低(P<0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05);细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:SHIP1能够通过抑制STAT3信号通路抑制人白血病细胞生长,促进白血病细胞凋亡。

应用酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织SHIP2的相互作用蛋白

目的通过酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织标准均一化cDNA文库,寻找与含Src同源蛋白2肌醇-5-磷酸酶2(SHIP2)相互作用的蛋白。方法利用酵母双杂交系统,以SHIP2的P1(SH2+5-Ptase)和P2(PRD+SAM)段作为诱饵蛋白,筛选出人胃黏膜上皮组织均一化cDNA文库中与SHIP2相互作用的蛋白,并通过免疫共沉淀法进行验证。结果挑选出39个阳性克隆,经测序比对分析,回复性杂交,免疫共沉淀试验验证,最终确定一个与SHIP2相互作用的蛋白抗增殖蛋白1(prohibitin1/PHB)。结论酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织SHIP2的相互作用蛋白PHB。

SHIP2、EGFL7表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系

目的探讨肺癌组织含SH2结构域的Ⅱ型肌醇5’-磷酸酶(SHIP2)、类表皮生长因子域7(EGFL7)表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系。方法回顾性收集湖州市第一人民医院2019年1-12月收治的76例肺癌患者,均以免疫组织化学SP法检测组织中SHIP2、EGFL7蛋白的表达情况,采用Kaplan-Meier法和多变量Cox回归分析SHIP2、EGFL7与肺癌患者预后的关系。结果肺癌组织中SHIP2、EGFL7蛋白高表达率均高于癌旁组织(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达与低表达组TNM分期、淋巴结转移差异均有统计学意义(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达组3年生存率均低于低表达组(均P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、SHIP2及EGFL7高表达均为影响肺癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论肺癌患者癌组织中SHIP2、EGFL7均为高表达,并与TNM分期及淋巴结转移有关,是影响预后的独立危险因素。

5-苯基-1,3,4-噻二唑衍生物的合成及含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)抑制活性研究

作为细胞信号转导通路的关键节点分子,含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)是潜在的抗肿瘤靶点.已知的SHP1抑制剂屈指可数.设计并合成了11个5-苯基-1,3,4-噻二唑衍生物.活性测试结果表明,部分衍生物对SHP1显示了一定强度的抑制活性.其中,化合物5b[IC50=(1.33±0.16)μmol/L]对SHP1显示了中等强度的抑制活性,对PTP1B和TCPTP不显示抑制活性,对SHP2显示了2倍的选择性,为发现新型SHP1抑制剂提供了新的骨架类型.

miR-155在免疫性血小板减少症发病机制中的作用

目的通过观察免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血CD19＋B细胞中微小RNAl55（miR-155）的表达与B淋巴细胞功能的关联性，探讨miR-155在ITP发病机制中的作用。方法选取2014年12月至2015年10月天津医科大学总医院血液科住院的初诊ITP患者30例（初诊组）、完全缓解ITP患者25例（完全缓解组）为研究对象，健康志愿者25名为对照组。采取免疫磁珠法分离CD19＋B细胞，实时荧光定量PCR检测miR-155的表达，流式细胞术检测CD19＋B细胞内IgG、IgM、含SH2结构的5’肌醇磷酸酶-1（SHIP-1）的表达，并与其临床指标进行相关性分析。结果（1）初诊组ITP患者CD19＋B细胞中miR-155的表达水平（4．57±1．03）显著高于完全缓解组（0．79．4-0．13）和健康对照组（1．74±0．32），完全缓解组低于健康对照组（均P〈0．05），且初诊组患者中治疗有效的ITP患者初诊时miR-155的表达水平（3．85±0．71）低于难治患者初诊时miR-155的表达水平（6．67±1．05）（P〈0．05）。（2）初诊组CD19-B细胞中IgG、IgM表达水平（35．20％±6．19％、26．87％．±5．01％）显著高于完全缓解组（7．51％±1．91％、5．93％±2．23％）和健康对照组（8．23％±0．68％、8．21％±1．08％）（均P〈0．05）。（3）初诊组患者CD19＋B细胞中SHIP-1的表达水平（44．33％±3．95％）显著低于完全缓解组（83．13％±3．24％）和健康对照组（67．26％±3．73％），完全缓解组高于健康对照组（均P〈0．05）。（4）ITP患者CD19＋B细胞中miR-155的表达水平与B1细胞（CD19＋CD5＋B细胞）数量呈正相关（r=0．576，P〈0．05），与SHIP-1的表达量及外周血血小板计数呈负相关（r=-0．445、-0．402，均P〈0．05）。结论miR-155在ITP患者外周血的CD19＋B中异常高表达，并与B淋巴细胞功能紊乱及胞内抗体产生有关，提示其可能参与TP的发病。

SHIP在炎症性肠病结肠组织中的表达及其临床意义

目的:观察SHIP在溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)患者结肠组织标本中的表达情况,探讨其在炎症性肠病发生过程中所起的作用及意义。方法:收集活动期UC患者,活动期CD患者,及结直肠癌旁正常粘膜组织(NC组)标本各20例。将活检标本进行苏木精-伊红染色及SHIP免疫组化染色观察;利用Western blot半定量比较分析SHIP蛋白表达及组间差异;Real-time RT-PCR分析SHIP在RNA水平的表达情况和组间差异。统计学处理采用Student's t检验。结果:免疫组化染色示UC组SHIP阳性表达积分为(7.20±2.53),CD组积分为(6.50±2.76),对照组积分为(1.10±0.74)。t检验组间比较UC组和CD组无统计学差异(t=0.59,P>0.05);而UC组与NC组(t=7.32,P<0.05),CD组与NC组(t=5.98,P<0.05),差异均有统计学意义。Western blot检测结肠组织SHIP表达,UC组SHIP相对表达量为(0.314±0.021),CD组(0.301±0.019),NC组(0.163±0.027)。UC和CD组表达无差异(t=1.44,P>0.05),而UC组,CD组与NC组相比表达明显升高(t=13.88、13.16,P均<0.05)。Real-time RT PCR检测UC组结肠粘膜SHIP m RNA相对表达量为(0.649±0.028),CD组为(0.645±0.021),NC组为(0.140±0.015)。同样,UC组与CD组没有统计学差异,而其相较对照组表达均升高(P<0.05)。结论:炎症性肠病患者结肠组织SHIP表达明显高于正常结肠组织,但其在溃疡性结肠炎和克罗恩病间没有明显差异;提示SHIP可能在炎症性肠病的发病中发挥重要作用。