人骨髓间充质干细胞的鉴定:抗SH2和SH3单克隆抗体的制备与应用

间充质干细胞(MSC)是能够自我更新和分化成一种或多种间叶组织的骨髓或其它组织中的一种干细胞,至今还没有类似于CD34识别造血干细胞一样的公认的抗原用于确认间充质干细胞。为了分离和鉴定MSC,本研究选取抗SH2和SH3这两种应用较广泛的抗体。从SH2和SH3杂交瘤细胞接种小鼠获得的腹水中提纯SH2和SH3两种抗体,并用流式细胞术和免疫组织化学的方法鉴定贴壁培养的骨髓间充质干细胞;用免疫磁珠分选方法从骨髓单个核细胞中分选SH2和SH3阳性的细胞;用流式细胞仪双标的方法检测SH2和CD105抗体在间充质干细胞上的阳性率。结果表明:SH2和SH3在间充质干细胞上的阳性率均在80%,分选阳性细胞中80%的细胞为间充质干细胞,阴性细胞中间充质干细胞的比例不足1%。标记了SH2后的间充质干细胞CD105的阳性率不足1%。结论:SH2和SH3是骨髓间充质干细胞的特异性的标记物,可用于间充质干细胞的分离和鉴定。抗CD105抗体和抗SH2抗体在分离和鉴定MSCs上具有同等效力。