肺部结节或肿块患者肺泡灌洗液SHOX2和RASSF1A基因甲基化在肺癌诊断中的价值

目的通过肺组织活检或手术后病检结果来验证两基因甲基化指标检验肺部良、恶性结节诊断效能。方法进行前瞻性研究,收集2019年3月至2020年3月在云南省第三人民医院99例诊断为肺部结节、肿块的患者,行支气管镜检查收集支气管肺泡灌洗液(BALF)样本后,进行定期随访、肺穿刺活检、手术后病检。结果收集的99例肺部结节、肿块患者,经病理诊断后分为肺癌组(n=50)和良性肺疾病组(n=49)。肺癌组年龄(62.64±9.71)岁,良性肺疾病组年龄(60.48±13.69)岁,2组指标差异具有统计学意义(P=0.032);在肺癌的诊断过程中,发现SHOX2和RASSF1A基因任一阳性诊断肺癌的灵敏度分别为72%和58%,特异度分别为92.3%和95.9%。而这2个基因的联合检测在肺癌的诊断中表现出了更高的灵敏度,为0.84,远高于良性疾病组的0.102(P<0.001)。ROC曲线分析显示2个基因甲基化联合时灵敏度可提高至84%。结论肺泡灌洗液SHOX2和RASS1A基因甲基化检验对存在肺部结节或肿块影像表现的肺癌患者诊断具有良好的预测价值,在影像学和组织学诊断不明时,SHOX2和RASSF1A联合检验可以作为肺癌早期诊断的一个重要补充工具。

电子支气管镜联合SHOX2和RASSF1A甲基化检测对早期肺癌的诊断价值

目的:浅析早期肺癌采取电子支气管镜联合SHOX2和RASSF1A甲基化检测的临床效果,以便为日后临床制定检测方案提供参考。方法:抽取2022年11月~2023年4月茂名市人民医院28例早期肺癌患者行电子支气管镜细胞学及病理活检检查,同时对患者的血浆、痰液及支气管肺泡灌洗液三种标本采用甲基化特异性方式检测SHOX2和RASSF1A甲基化表达。结果:电子支气管镜确诊阳性检出率为67.86%,SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测灌洗液检出阳性率较高,分别为71.43%、60.71%;电子支气管镜+SHOX2、RASSFIA甲基化联合检查,准确度、阳性预测、阴性预测、敏感度及特异性均高于其他检测方式。结论:电子支气管镜检查联合血浆、痰液及支气管肺泡灌洗液HOX2和RASSF1A甲基化检测能提高早期肺癌的检出率,对肺癌的早期诊断有临床应用价值。

血浆SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化检测对肺结节的诊断价值

【目的】探究血浆SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化检测对肺结节性质判定及诊断的价值。【方法】抽取静脉血8~10 ml进行血浆分离,分离后的血浆进行DNA的提取与制备,其中包括裂解、结合、洗涤、亚硫酸盐转化、脱洗等步骤。进行PCR检测,分别设置SHOX2、RASSF1A、PTGER4甲基化的阈值,检测游离DNA中基因甲基化状态。采用首创的P值(阳性指数,Positive Index)计算公式法分析样本检测数据,依据阳性判断值判定样本阳阴性。【结果】84例胸部CT提示肺结节的患者,进行血浆游离DNA甲基化检测,其中阳性和阴性分别有18例和66例,阳性与阴性结果与患者的性别、吸烟、结节大小、多发与否无关;与年龄、结节的密度及病理类型有关,差异有统计学意义(P < 0.05)。通过金标准病理诊断肺癌有8例,其中6例甲基化检测为阳性,阳性率为75%;恶性结节与良性结节的甲基化阳性指数数值分别为2.00 ± 1.38和1.10 ± 0.92,差异有统计学意义(P < 0.05)。SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化诊断肺癌的曲线下面积(AUC)、灵敏度和特异度分别为0.754、75%和84.2%。SHOX2/RASSF1A/PTGER甲基化与病理诊断评定结果存在一致性,Kappa = 0.842。【结论】SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化检测可以成为肺结节性质早期判断的一种可靠且灵敏的新型生物学标志物,为肺癌的早期诊治提供依据。

联合SHOX2、RASSF1A及CEA构建的列线图模型对肺癌发生的预测价值

目的 联合矮小同源盒基因2(Short stature homeobox gene 2,SHOX2)、RAS相关结构域家族1亚型A(RAS association domain family 1,isoform A,RASSF1A)及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)构建预测肺癌发生的列线图模型,并确定该模型的预测价值。方法 选择2020年1月至2022年12月在新疆医科大学第一附属医院就诊的88例肺癌患者及肺良性肿瘤患者219名。比较两组患者的人口统计学和临床特征信息以及支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中SHOX2和RASSF1A基因的甲基化水平。进行单因素分析及多因素Logistic回归分析筛选出影响肺癌发生的变量构建列线图,并评估其预测效能。结果 肺癌患者中SHOX2阳性36例(41.4%),RASSF1A阳性30例(34.5%)。肺癌患者CEA、细胞角蛋白19片段(Cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)、鳞状上皮细胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCCA)、胃泌素释放肽前体(Pro-gastrinreleasing peptide,Pro-GRP)水平与肺良性肿瘤患者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,SHOX2、RASSF1A和CEA为肺癌发生的独立危险因素(P<0.05),基于上述独立风险因素所构建的列线图模型显示出良好的区分能力(AUC=0.926),具有较好的一致性且获益良好。结论 联合SHOX2、RASSF1A和CEA构建的列线图模型对肺癌发生具有较高的预测价值,可为肺癌的早期诊断提供依据。

SHOX2和RASSF1A基因甲基化在消化道肿瘤诊断和预后预测中价值的研究进展

消化道肿瘤发病率较高,由于其早期诊断较为困难,导致患者预后较差,因此对高危人群的筛查、早期诊断和及时治疗尤为重要。近年来,表观遗传学在肿瘤发病机制中的作用受到了广泛关注并取得了突破性研究进展。促癌基因矮小同源盒基因2(SHOX2)和抑癌基因Ras相关结构域家族1A(RASSF1A)甲基化作为生物标志物在消化道肿瘤诊断和预后预测中的敏感度和特异度较高,有较高的应用价值。该文就SHOX2和RASSF1A基因甲基化在消化道肿瘤诊断和预后预测中价值的研究进展作一综述。

支气管肺泡灌洗液中SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测对肺癌的诊断价值

目的:对疑诊肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中SHOX2、RASSF1A基因甲基化分析,评估两指标联合检测区分肺癌与肺良性疾病的诊断效能及联合细胞学使用对肺癌的诊断价值。方法:收集276例肺部疾病患者(肺癌组131例,肺部良性疾病组145例)的BALF样本,应用PCR法检测BALF中SHOX2和RASSF1A基因甲基化,并将检测结果和Sanger测序法结果比较。结果:PCR和Sanger测序法一致性分析显示两种方法在检测SHOX2和RASSF1A基因甲基化具有良好的一致性(Kappa=0.978,95%CI=0.954~1.000)。SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测在肺癌组的诊断灵敏度为0.840,高于良性疾病组(0.193)(P<0.001);肺癌组BALF中SHOX2、RASSF1A基因甲基化联合检测阳性率在小细胞肺癌和肺鳞癌中分别是100%和90.9%,高于肺腺癌(66.0%);SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测阳性率在晚期肺癌高达89.3%,明显高于早期肺癌阳性检出率。ROC曲线分析显示当SHOX2、RASSF1A基因甲基化、细胞学三指标联合使用时进一步将诊断灵敏度提高至0.931。结论:对BALF中SHOX2、RASSF1A基因甲基化PCR检测在肺癌诊断中有良好的灵敏度;SHOX2、RASSF1A甲基化PCR检测与细胞学联合使用可显著提高肺癌诊断灵敏度,是肺癌病理学诊断的有效补充工具。

支气管肺泡灌洗液SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测在临床肺癌早期诊断中的应用

目的综合评价支气管肺泡灌洗液(BALF)中基因矮小同源盒基因(SHOX)2、基因RAS类联域家族(RASSF)1A甲基化和4种血浆肿瘤标志物对早期肺癌的诊断价值。方法选取病理确诊的134例患者,其中67例早期肺癌纳入肺癌组,67例良性病变者纳入对照组。所有患者采用实时荧光PCR(RT-PCR)法检测BALF中基因SHOX2和RASSF1A甲基化情况,并收集癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCAg)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)血浆肿瘤标志物结果。统计BALF基因SHOX2、RASSF1A及肿瘤标志物诊断肺癌的灵敏度和特异度。通过Logistic回归分析评价各指标对肺癌组织的影响。构建受试者工作特征(ROC)曲线,计算各指标曲线下面积(AUC)值,以评估其在早期肺癌诊断中的性能。结果基因SHOX2及RASSF1A甲基化诊断灵敏度分别为80.6%、79.1%,特异度为82.1%、85.1%。Logistic回归分析显示,Cyfra21-1、NSE、SHOX2ΔΔCT及RASSF1AΔΔCT值是肺癌的影响因素。以基因SHOX2ΔΔCT值联合基因RASSF1AΔΔCT值为检验变量,绘制ROC曲线,诊断肺癌的AUC值为0.935,显著高于单独进行SHOX2和RASSF1A、NSE和Cyfra21-1诊断肺癌的ROC曲线(P<0.05)。结论BALF的基因SHOX2及基因RASSF1A甲基化,对早期肺癌的诊断有较高的敏感性和特异性,对肺癌的早期诊断具有高效的诊断能力,联合SHOX2、RASSF1FΔΔCT值诊断效率显著升高,在早期肺癌诊断中可以作为细胞学的辅助工具。

SHOX2基因甲基化辅助诊断肺癌的临床转化现状

肺癌是中国发病率首位的癌症,虽然组织学活检和细胞学检测可以确诊肺癌,但其检出时病情多已处于较晚期,且检出率并不理想。SHOX2基因甲基化检测为解决这个问题提供了一个较为有效的选项,多项临床试验证明其与组织学或细胞学检测联合使用提高了确诊率,是辅助确诊肺癌的有效工具。本文回顾了此检测在辅助确诊肺癌方面所进行的临床试验的结果,并对未来的使用方法和研究方向提出建议。

转录因子Tbx18、Tbx3、Shox2在生物起搏方面的研究进展

近年来,一些转录因子在生物起搏方面的作用受到了极大关注,无论是离体的细胞实验还是在体直接注射,都产生了令人瞩目的成果。文章就转录因子Tbx18、Tbx3、Shox2在生物起搏方面的研究进展做一综述,希望为其今后在临床上的应用提供依据。

SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测在早期肺癌的诊断研究

目的:探讨SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测在早期肺癌的诊断价值。方法:选择2020年8月-2021年3月期间我院收治肺部小结节患者107例为研究对象,其中经病理活检确认早期肺癌患者72例(肺癌组),肺部良性病变患者35例(对照组)。采集患者肺泡灌洗液(BALF)样本,进行细胞学检查且荧光PCR法测定样本中SHOX2和RASSF1A基因甲基化阳性率,分析甲基化情况及其病理诊断关系。结果:肺癌组和对照组SHOX2基因甲基化阳性率分别为51.4%和2.9%,RASSF1A基因甲基化阳性率分别为61.1%和5.7%,均差异显著(P<0.05),且SHOX2和RASSF1A基因甲基化任意阳性率显著高于细胞学检查阳性率(P<0.05);并联SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测早期肺癌的灵敏度和特异性分别为76.4%(55/72)、91.4%(32/35),且在不同病理分型中存在差异,灵敏度在小细胞癌中最高(95.7%,22/23),鳞癌次之(76.5%,13/17),腺癌最低(68.8%,22/32)。结论:SHOX2和RASSF1A基因甲基化任意阳性率在患者BALF中诊断效果良好,有成为早期肺癌临床筛查指标的潜力。

胸水中SHOX2基因甲基化程度与肺癌的关系

目的 本研究的目的是检测胸水中SHOX2基因甲基化作为良恶性胸腔积液鉴别方法的临床价值.方法 运用实时荧光定量PCR的方法分析亚硫酸氢盐转化后的胸腔积液中SHOX2基因是否存在甲基化.结果 共60例患者,其中恶性胸腔积液组28例,良性胸腔积液组19例,非肺部恶性肿瘤伴胸腔积液组13例,恶性胸腔积液组中35.7％（10/28）出现甲基化阳性,良性胸腔积液组发现甲基化为0％（0/19）.肺部恶性肿瘤组与良性组相比具有统计学差异（P＜0.05）.SHOX2基因甲基化诊断肺癌的敏感性为35.7％,特异性为100％.结论 胸腔积液中沉渣细胞SHOX2基因甲基化状态是一种有潜力的鉴别胸腔积液良恶性的辅助诊断方法.

家兔矮小同源盒基因(Shox2)的克隆和表达分析

为了研究新西兰白兔矮小同源盒基因(Shox2)序列,预测其结构和功能,以及研究Shox2基因的时空表达特征,本研究克隆了新西兰白兔Shox2基因全长CDS区,分析其编码蛋白的同源性、亲疏水性、二级和三级结构特点、系统进化树等生物信息学特征,并用Western blot法验证融合蛋白TrxA-Shox2。分别在胚胎中期(E20.5d)、胚胎后期(E28.5d)、幼龄期(出生后10d)、成年期(A)4个时间点采集3只动物的肾、大血管、真皮、心、大脑、肝、肺、脾、肌肉、胆囊共10种组织,采用实时荧光定量PCR技术研究Shox2基因的时空表达图谱。结果,成功克隆了新西兰白兔Shox2基因(登录号:KP726285)。Shox2基因CDS区全长666bp,翻译221个氨基酸。生物信息学分析显示,Shox2为碱性、不稳定蛋白,Shox2蛋白氨基酸二级结构中α-螺旋区域占61.99%,无规则卷曲区域占33.48%,延伸链占4.52%。Western blot验证了融合蛋白TrxA-Shox2的表达。家兔Shox2蛋白氨基酸序列与眼镜猴、猩猩、褐家鼠、人的氨基酸序列同源性较高,说明Shox2蛋白在进化中较保守。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,在E20.5d的家兔胚胎中,Shox2mRNA在肾、肌肉和胆囊的表达量高,在E28.5d时表达量较高的是脾、心,幼龄期时表达量较高的是真皮、肝,成年期时表达量较高的是真皮、脾。本研究成功克隆了新西兰白兔Shox2基因,预测了其结构和功能。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,不同的组织和不同时间特征的表达量变化可能与Shox2功能高度相关,并受到严格的调控。

5-Aza-CdR对人肺腺癌A549细胞及SHOX2基因甲基化的影响

目的观察5-氮杂-2’-脱氧胞苷酸(5-Aza-CdR)对人肺腺癌A549细胞以及short stature homeobox 2(SHOX2)基因甲基化水平的影响。方法不同浓度的5-Aza-CdR处理A549细胞24~72 h,MTT比色法和流式细胞术检测药物处理后细胞增殖、周期和凋亡的变化,同时应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测药物作用后SHOX2基因甲基化状态的变化。结果 5-Aza-CdR呈浓度依赖性抑制A549细胞增殖(P<0.05或0.01),随着5-Aza-CdR作用浓度的增加S期细胞明显增多,而G1期细胞减少;5、10μmol/L 5-Aza-CdR组凋亡率分别为(26.53±1.87)%和(38.84±3.10)%,均显著高于对照组(11.35±0.37)%的凋亡率(P<0.05或0.01)。MSP结果显示随着5-Aza-CdR浓度的增加,SHOX2基因启动子的甲基化条带减弱,而非甲基化条带则增强。结论 5-Aza-CdR能通过去甲基化作用逆转SHOX2基因启动子的高甲基化状态,并促进细胞的增殖和凋亡。

非小细胞肺癌中CDO1、RASSF1A和SHOX2基因甲基化的应用

目的探讨半胱氨酸双加氧酶1(cysteine dioxygenase type 1,CDO1)、Ras相关结构域家族基因1A(Ras association domain family member 1A,RASSF1A)和人矮小同源盒基因2(short stature homeobox 2,SHOX2)基因启动子区甲基化与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床病理学特征的关系,并分析各基因甲基化在NSCLC中的潜在诊断价值和意义。方法采用定量甲基化特异性PCR(quantitative methylation specific PCR,QMSP)法分析55例NSCLC组织和55例肺部良性病变组织中CDO1、RASSF1A和SHOX2基因甲基化检出率,分析各基因甲基化检出率与NSCLC临床病理特征的关系。利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)、敏感性和特异性评价各基因甲基化在NSCLC中的诊断价值。结果NSCLC组织中CDO1、RASSF1A和SHOX2基因启动子区甲基化检出率分别为85.45%(47/55)、41.82%(23/55)和29.09%(16/55),肺部良性病变组织中CDO1、RASSF1A和SHOX2基因甲基化检出率分别为5.45%(3/55)、9.09%(5/55)和3.64%(2/55)。与肺部良性病变组织相比,CDO1、RASSF1A和SHOX2基因甲基化在NSCLC中更易被检测到(P均<0.001)。CDO1、RASSF1A和SHOX2基因甲基化检测NSCLC的敏感性分别为85.45%、41.82%和29.09%,特异性分别为94.55%、90.91%和96.36%,区分NSCLC组织和肺部良性病变组织的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.9200、0.6721和0.6415(P<0.001,P=0.002,P=0.011)。此外,三基因甲基化检出率与NSCLC临床病理特征均无关(P>0.05)。结论与RASSF1A和SHOX2相比,CDO1基因甲基化是筛查NSCLC更有效的潜在分子标志物。

miR-375靶向SHOX2调控人食管鳞癌细胞侵袭迁移的初步研究？

目的探讨miR-375/SHOX2轴对食管鳞癌细胞侵袭迁移能力的影响,为食管鳞癌的靶向治疗寻找潜在新靶点。方法选取对数生长期的人食管鳞癌细胞(kyse-70、kyse-30),分别过表达以及干扰miR-375和SHOX2基因,采用克隆形成、MTT、划痕、Transwell等体外细胞功能学实验检测miR-375、SHOX2对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,通过拯救实验验证miR-375对SHOX2的靶向调控作用。结果与对照组的kyse-70、kyse-30细胞相比,过表达miR-375或干扰SHOX2基因后的细胞增殖率、克隆形成率和Transwell细胞穿透数均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与对照组的kyse-70、kyse-30细胞相比,干扰miR-375或过表达SHOX2后的细胞增殖率、克隆形成率和Transwell细胞穿透数均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);miR-375过表达后的食管鳞癌细胞SHOX2基因表达减少,而抑制miR-375后SHOX2基因表达增强。拯救实验结果显示,共转染miR-375和SHOX2后细胞增殖和侵袭能力较对照组又有所增强。结论 miR-375抑制食管鳞癌细胞增殖和侵袭;SHOX2促进食管鳞癌细胞增殖和侵袭。miR-375靶向负调控SHOX2表达,对食管鳞癌细胞的增殖和侵袭起调控作用。

Shox2基因转染后犬骨髓间充质干细胞HCN4表达的变化

目的探讨矮小同源盒基因亚型2(short stature homobox 2,Shox2)外源基因对犬骨髓间充质干细胞(canine mesenchymal stem cells,c MSCs)体外诱导分化的影响。方法分离培养犬骨髓间充质干细胞,用包装好的两种慢病毒载体p Lentis-m Shox2-RFP及p Lentis-RFP分别转染第3代c MSCs,收集转染阳性的c MSCs与乳鼠心肌细胞(rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养。实验分4组:A组(RFP-c MSCs组)、B组(RFP-c MSCs+NRVMs共培养组)、C组(Shox2-RFP-c MSCs组)、D组(Shox2-RFPc MSCs+NRVMs共培养组)。共培养诱导分化5 d后,利用嘌呤霉素对c MSCs进行纯化,运用全细胞膜片钳检测诱导出内向电流的动力学特征,运用实时荧光定量PCR、Western blot检测HCN4、Tbx3、Cx45/43、Nkx2.5等标志性基因mRNA和蛋白的表达情况,并行免疫荧光检测。结果 Western blot及RTPCR检测结果显示,D组细胞Shox2、HCN4、Tbx3、Cx45窦房结细胞特异性基因的表达较A、B、C组明显增高(P<0.05),B组细胞Cx43及Nkx2.5较C、D组细胞明显增高(P<0.05);免疫荧光结果显示,在Shox2基因调控作用下,c MSCs有HCN4通道生成;膜片钳检测结果显示,C、D组细胞产生了具有明显时间-电压依赖性的内向电流,且对细胞外Cs+敏感,符合起搏离子流If的动力学特征;而A、B组未检测出此电流。结论经m Shox2基因修饰的c MSCs通过体外诱导,产生了起搏离子流If并高表达窦房结标志性基因,成功向具有一定自主搏动能力的窦房结样细胞分化。

SHOX2基因启动子甲基化与肺癌关系的Meta分析

目的通过Meta分析的方法探讨SHOX2基因启动子甲基化与肺癌的关系。方法全面检索中国知网、万方医学数据库、维普中文期刊、Pubmed、Web of science等数据库,查找有关SHOX2基因启动子甲基化与肺癌关系的临床研究文献。搜索期限为2018年12月31日之前。应用Stata14.0软件对所得数据进行Meta分析。结果研究共纳入14篇文献,其中实验组肺癌标本1671例,对照组标本1659例,纳入最后统计数据,Meta分析结果表明,肺癌患者肿瘤组织中SHOX2基因甲基化出现的阳性风险明显高于对照组,用患者正常的肺组织标本为参照,其OR值合并效应量为18.54(95%CI:11.20~30.69,P<0.05),即肿瘤组织出现阳性的风险是对照组的18.54倍。按样本种类进行亚组分析,组织样本中OR值为33.94(95%CI:13.42~85.85,P<0.05);血浆样本中OR值为11.37(95%CI:4.33~29.84,P<0.05),灌洗液样本中OR值为24.58(95%CI:12.77~47.32,P<0.05);胸腔积液样本中OR值为5.52(95%CI:3.92~7.78,P<0.05);将纳入文献的肺恶性肿瘤的病理学类型进行亚组分析结果显示,腺癌所占比例(腺癌/腺癌+鳞癌+其他类型)小于25%以下OR值为12.33(95%CI:6.68~22.76,P<0.05),腺癌所占比例大于25%以上OR值为38.07(95%CI:17.98~80.60,P<0.05);将纳入文献的肺恶性肿瘤临床分期进行亚组分析结果表明,Ⅲ和Ⅳ期所占比例小于65%以下OR值为21.65(95%CI:11.80~39.73,P<0.05),Ⅲ和Ⅳ期所占比例大于65%以上OR值为20.34(95%CI:3.39~121.91,P<0.05)。结论肺癌患者肺癌组织中SHOX2基因启动子甲基化增高,此基因启动子甲基化和肺癌的发生可能存在相关性;SHOX2基因启动子甲基化和肺腺癌存在相关性,但与患者的临床分期无明显相关性。

血浆SHOX2和PTGER4基因甲基化在肺癌筛查中的意义

目的探讨血浆中SHOX2和PTGER4基因甲基化状态在肺癌无创筛查中的意义。方法选取联勤保障部队第九八八医院2018年1月~2019年4月受检者176例,抽取受检者静脉血10 ml,提取血浆游离DNA,,经重亚硫酸盐转化后荧光定量PCR扩增,分析SHOX2和PTGER4基因甲基化情况。并进行活检组织标本病理诊断。分析甲基化与病理结果和其他临床特征的关系。结果共检测176例,男性121例,女性55例。肺癌组93例,包含鳞癌34例,腺癌41例,小细胞癌17例,大细胞神经内分泌癌1例;对照组83例,包含肺炎或支气管炎67例,肺结核2例,间质性肺炎4例,健康体检者10例。血浆SHOX2和PTGER4基因检测肺癌的灵敏性和特异性是74%和85.1%。肺癌组基因甲基化阳性率为83.9%(78/93),显著高于对照组(28.9%,24/83),差异有统计学意义(P<0.05),且与病理类型和TNM分期有关。鳞状细胞癌、大细胞神经内分泌癌阳性率100%,小细胞癌82.4%(14/17),腺癌70.7%(29/41);TNM分期越高甲基化阳性率越高。对照组基因甲基化与肺纤维化或胸膜增厚无相关性。结论血浆SHOX2和PTGER4基因甲基化检测可以成为肺癌患者筛查的一种方法,用于目前筛查方法的补充。

SHOX2基因甲基化水平对肺癌和良性肺部疾病的鉴别诊断研究

目的探究SHOX2基因甲基化水平在肺癌和良性肺部疾病患者中的鉴别诊断价值。方法选取2014年3月—2016年6月武汉市中心医院胸外科、呼吸科住院的肺癌患者和良性肺部疾病患者,其中肺癌患者173例作为肺癌组,良性肺部疾病患者194例作为良性肺病组,进行常规血清学检查,并检测肿瘤标志物,采用Sanger测序法检测SHOX2基因甲基化,采用??CT法计算SHOX2基因甲基化水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标鉴别肺癌的临床价值,并分析??CT值与肺癌病理类型、TNM分期的关系。结果肺癌组患者白细胞计数(WBC)、??CT值均低于良性肺病组,血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)、细胞角蛋白21片段抗原(Cyfra21-1)、癌胚抗原(CEA)均高于良性肺病组(P<0.05)。多因素Logistic回归结果显示,血清ProGRP、血清Cyfra21-1、??CT值是肺癌的影响因素(P<0.05)。??CT值诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.843,最佳临界值为2.69时,灵敏度为58.2%,特异度为93.1%;血清ProGRP诊断肺癌的AUC为0.711,最佳临界值为32ng/L时,灵敏度为63.5%,特异度为77.4%;血清Cyfra21-1诊断肺癌的AUC为0.677,最佳临界值为2.92μg/L时,灵敏度为56.1%,特异度为72.3%。血清ProGRP诊断肺癌的AUC大于血清Cyfra21-1(Z=3.569,P=0.038)。??CT值联合血清ProGRP诊断肺癌的AUC为0.860,均大于??CT值、血清ProGRP、血清Cyfra21-1诊断肺癌的AUC(Z=4.046、5.607、8.215,P<0.05)。鳞状细胞癌、小细胞癌患者??CT值均低于腺癌、大细胞癌、其他未知病理类型(P<0.05)。Ⅲ期患者??CT值低于Ⅰ期、Ⅱ期(P<0.05);Ⅳ期患者??CT值低于Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期(P<0.05)。结论 SHOX2基因甲基化水平对肺癌和良性肺部疾病的鉴别诊断有一定价值,且与肺癌病理类型及TNM分期存在相关性,可作为诊断肺癌的辅助指标。

血浆无细胞DNA中SHOX2和PTGER4基因甲基化检测有助于肺结节患者的鉴别诊断

目的检测计算机断层扫描(CT)提示的肺结节患者,血浆游离无细胞DNA的矮小同源盒2(SHOX2)基因和前列腺素E受体4基因(PTGER4)甲基化,探讨其对肺结节性质判定的意义。方法抽取患者静脉血10 mL,提取血浆游离DNA后用重亚硫酸盐转化,采用实时荧光定量PCR扩增,将有效的Ct值输入专用的判读软件进行分析,得出SHOX2和PTGER4基因甲基化情况。运用免疫组织化学技术对活检诊断的肺恶性肿瘤进行组织学分型。结果 57例患者进行血浆游离DNA的SHOX2和PTGER4基因甲基化检测,阳性22例,阴性35例;57例中CT肺结节31例,其中19例基因甲基化检测为阳性;CT炎症16例中有3例基因检测为阳性;CT显示正常或磨玻璃的10例,结果均为阴性。不同CT表现下血浆游离DNA的SHOX2和PTGER4基因甲基化有显著差异, CT显示肺结节的阳性率最高(61.3%)。CT显示肺结节经病理诊断肺癌20例,其中18例基因甲基化检测为阳性,阳性率为90%,其余良性病变中仅有1例检测阳性。血浆游离DNA的SHOX2和PTGER4基因甲基化在肺良、恶性病变中有显著差异。肺鳞癌、小细胞癌的SHOX2和PTGER4基因甲基化阳性率100%,腺癌为75%。结论检测血浆游离DNA的SHOX2和PTGER4基因甲基化在肺癌早期诊断中具有一定价值,结合CT的影像特征,对肺结节患者性质的判定有良好的辅助诊断作用。