针刺对穴“后溪-环跳”对腰椎间盘突出症大鼠HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察针刺对穴“后溪-环跳”对LDH大鼠HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路及通路相关炎症因子的影响,探讨对穴治疗LDH的潜在机制。方法:将大鼠随机分成假手术组、模型组、对穴组与普通针刺组(即普针组)4组,每组10只。根据自体髓核移植法造模,造模3 d后,对普针组、对穴组行针刺干预,普针组选取双侧“肾俞”“大肠俞”“委中”穴;对穴组取双侧“后溪穴”“环跳穴”。两组均干预1次/d, 30 min/次,共28 d。于造模前1 d、造模3 d后与干预28 d后测定大鼠痛阈值,HE染色观察大鼠L5脊神经干组织病理学改变;ELISA测定血清TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-α与IL-8等含量;Western Blot及免疫荧光技术(IF)检测HMGB1蛋白在脊神经干中的表达。结果:针刺干预后,普针组、对穴组大鼠的痛阈均显著提高;与模型组比较,普针组与对穴组脊神经干中HMGB1蛋白表达及血清中TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-α与IL-8等含量均明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺能有效缓解LDH大鼠的痛觉敏感,改善脊神经干组织炎症情况,对穴“后溪-环跳”优于普通组穴“肾俞、大肠俞、委中”,其机制可能是通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号转导及下调IL-1β、TNF-α和IL-8等炎症因子水平实现的。

吕景山对穴后溪-环跳对腰椎间盘突出症SD大鼠血浆白细胞介素-6、一氧化氮、前列腺素E2的影响

目的通过观测吕景山对穴后溪-环跳对腰椎间盘突出症模型SD大鼠免疫炎症机制中血浆白细胞介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)的影响,以证实对穴后溪-环跳对于腰椎间盘突出症免疫炎症机制的作用。方法本实验选取新型腰椎间盘突出症SD大鼠模型作为实验对象,选用吕景山对穴“后溪-环跳”作为治疗穴位,采用普通针刺的治疗方法,观测针刺吕景山对穴后溪-环跳组、后溪组、环跳组和环跳-阳陵泉组前后大鼠免疫炎症机制中血浆IL-6、NO、PGE2含量的变化。结果吕景山对穴后溪-环跳组较后溪组、环跳组和环跳-阳陵泉组大鼠血浆IL-6、NO、PGE2含量显著性降低(P<0.05)。结论针刺吕景山对穴后溪-环跳的镇痛效果比单用后溪或者环跳,以及吕景山对穴环跳-阳陵泉的疗效要更好;针刺吕景山对穴后溪-环跳能够显著降低大鼠血浆IL-6、NO、PGE2的含量;针刺吕景山对穴后溪-环跳是通过降低IL-6、NO、PGE2的含量来达到调节腰椎间盘突出症免疫炎症机制,缓解疼痛的目的。

针刺“后溪”“环跳”对腰椎间盘突出症大鼠脊神经干高迁移率族蛋白1的影响

目的:观察针刺“后溪”“环跳”对腰椎间盘突出症(LDH)大鼠脊神经干高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白和mRNA表达的影响,探讨针刺对穴“后溪”“环跳”治疗LDH的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、普针组、对穴组,每组8只。采用非压迫自体髓核混悬液注射法制备腰椎间盘髓核突出大鼠模型。普针组针刺双侧“委中”“大肠俞”“肾俞”,对穴组针刺双侧“后溪”“环跳”,两组均每次30min,每日1次,连续治疗14d。采用热痛刺激仪检测大鼠双后足热痛阈;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8含量;Westernblot法及免疫荧光染色法检测大鼠腰(L)5脊神经干HMGB1蛋白表达水平;荧光定量PCR法检测大鼠L5脊神经干HMGB1mRNA相对表达量;HE染色法观察L5脊神经干组织形态变化。结果:与假手术组比较,模型组双后足热痛阈降低(P<0.05),与模型组比较,普针组、对穴组双后足热痛阈升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组脊神经干HMGB1蛋白、mRNA表达及血清IL-1β、IL-6、IL-8含量明显升高(P<0.0001,P<0.001);与模型组比较,普针组和对穴组脊神经干HMGB1蛋白、mRNA表达及血清IL-1β、IL-6、IL-8含量明显降低(P<0.01,P<0.0001,P<0.001,P<0.05),对穴组较普针组降低更明显(P<0.001,P<0.01,P<0.0001,P<0.05)。模型组神经纤维排列散乱,大小不一,大量髓鞘崩解、空泡样改变,施万细胞大量溶解;普针组及对穴组出现再生髓鞘,神经纤维排列较为规律,对穴组较普针组恢复更为明显。结论:针刺干预抑制了LDH大鼠HMGB1蛋白和mRNA的表达,从而进一步减少IL-1β、IL-6、IL-8的产生,抑制炎性反应,改善疼痛,对穴组的治疗效果较普针组更为明显。

针刺后溪和环跳对腰椎间盘突出症模型大鼠NF-κB/iNOS/NO通路的影响

目的:观察针刺后溪和环跳对腰椎间盘突出症(LDH)模型大鼠L5脊神经根核因子κB(NF-κB)炎性信号通路中NF-κB、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)表达的影响,探讨针刺治疗LDH的作用机制.方法:将40只健康无特定病原体级雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、针刺1组和针刺2组,每组10只.通过穿刺L4-L5棘突间隙注射自体髓核混悬液制成非压迫髓核突出模型.针刺1组针刺双侧肾俞、大肠俞和委中;针刺2组针刺双侧后溪和环跳.均采用平补平泻手法,每次留针30 min,每隔10 min行针1次,每日1次,共治疗14次.用热刺痛仪进行缩爪痛阈值测定;酶联免疫吸附法测定血清NF-κB、iNOS及NO水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察脊神经根的病理形态学改变;定量反转录聚合酶链式反应法检测脊神经根iNOS mRNA表达;免疫荧光法检测脊神经根NF-κB及iNOS蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组的缩爪痛阈值降低;血清NF-κB、iNOS及NO表达水平升高;HE染色观察发现脊神经根内施万细胞大量变性溶解,并出现空泡样改变;同时脊神经根NF-κB、iNOS蛋白表达和iNOS mRNA表达均升高.与模型组比较,针刺1组和针刺2组的缩爪痛阈值升高,针刺2组升高幅度更大(P<0.05);针刺1组和针刺2组的血清NF-κB、iNOS及NO表达水平降低,针刺2组降低更显著(P<0.01);针刺1组和针刺2组的脊神经根空泡样改变和施万细胞变性溶解减少,且针刺2组改变更明显;针刺1组和针刺2组的脊神经根NF-κB及iNOS蛋白表达和iNOS mRNA表达均降低,针刺2组降低更明显(P<0.01).结论:针刺后溪和环跳可改善LDH模型大鼠的脊神经根形态,抑制脊神经根中NF-κB、iNOS蛋白表达和血清NO水平,缓解脊神经根炎症引发的疼痛,这可能是针刺治疗LDH的机制之一.