日本血吸虫SIEA28kDa分子抗原的二维凝胶电泳分析(英文)

目的 分析鉴定日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原 (SIEA) 2 8k Da抗原组分。方法 用高效液相离子交换法对电泳纯 SIEA2 8k Da抗原组分进一步分离纯化 ,对获得的色谱纯 SIEA2 8k Da抗原组分进行二维凝胶电泳分析。结果 SIEA经双向凝胶电泳分离、银染后获得的 SIEA- 2 D图谱蛋白斑点以 p I3～ 7和 Mw14～ 6 6 k Da范围最多。进一步经图象采集、PDQuest2 D软件分析 SIEA双向电泳图谱 ,计算在相同的设定值条件下获取的蛋白质斑点数 ,测得 SIEA- 2 D电泳图谱平均为 (94 8±89)个蛋白质斑点数。电泳纯 SIEA2 8k Da抗原组分用高效液相离子交换法纯化后 ,2 80、2 2 0 nm波长色谱图均为一个两侧对称、光滑的高峰曲线 ,色谱洗脱液对其活性光密度图也为一个两侧对称、光滑的高峰曲线。二维凝胶电泳银染色可见一个显色饱和度高的蛋白质圆斑 ,免疫印迹分析为一个显色饱和度高的单一圆斑。结论 色谱纯 SIEA2 8k Da抗原组分为单一分子 ,其等电点为 5 .

抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究

目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位，探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因．克隆至PET32a／SIEA26～28kDa-scFv质粒，构建PET32a／EGFP-scFv质粒。转化至感受态E．coli BL21（DE3）中。并诱导表达单链抗体融合蛋白。分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性。单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育，荧光显微镜下观测GFP信号。确定特异性单链抗体的靶向性。结果重组质粒PET32a／EGFP-scFv构建成功．Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达．与SIEA26-28kDa特异性结合。GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚．雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织。结论SIEA26-28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性，具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用，为SIEA26-28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础。

SIEA免疫后的感染血清体外培养日本血吸虫未成熟卵鉴定抗卵胚胎发育候选分子

目的筛选ＳＩＥＡ抗卵胚胎发育的候选分子。方法小鼠再感染日本血吸虫尾蚴用ＳＩＥＡ免疫后４９天，实验组收集该免疫血清培养日本血吸虫未成熟卵。对照组用未免疫小鼠相同天数感染的血清培养，２天后，收集虫卵，作免疫沉淀和ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析。结果发现实验组仅出现５４ＫＤ。结论日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原中５４ＫＤ分子可能位于未成熟卵膜或基质中，由未成熟卵所释放。

抗日本血吸虫生殖抗原SIEA 26-28ku组分的质谱分析

目的筛选确定抗日本血吸虫生殖功能抗原SIEA26-28 ku的编码基因。方法采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原(SIEA),选择SIEA 26-28 ku免疫血清识别信号较强的SIEA-2D蛋白质斑点(65～73号)采样,消化处理后进行质谱与生物学信息分析。结果从SIEA-2D图谱上共获得1037个蛋白质斑点;通过MALDI-TOF-MS对其进行肽指纹图谱分析后获得了7张肽指纹图谱。通过PeptIdent软件检索SWISS-PROT数据库,发现有意义的血吸虫同源蛋白质11个,这些同源蛋白质部分与细胞代谢或蛋白质合成代谢相关,部分与核苷酸代谢有关,其中编号为SIEA-2D66为日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),SIEA-2D71为琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SDISP),SIEA-2D73为谷胱甘肽-S-转移酶(GST),其同源程度分别为37.2%、18.7%和22.9%。结论初步获得与抗日本血吸虫生殖功能抗原SIEAn 26～28 ku相关的编码基因HGPRT、SDISP和GST。

应用SIEA皮瓣行乳房再造——附3例报告

乳房再造是整形外科领域常见的技术。下腹部因组织量大，血管来源较多，和兼得的腹壁整形术成为乳房再造最常用的供区。目前应用最为广泛的是下腹部横行腹直肌肌皮瓣（Transverse Rectus Abdominis Museuloeutaneous，TRAM）及腹壁下动脉穿支皮瓣（Deep Inferior Epigastric Perforator，DIEP）。

日本血吸虫天然抗病分子疫苗的结构与功能分析II.SIEA 28kDa分子的高效液相色谱分离及薄层等电聚焦分析

采用高效液相离子交换法对电泳纯SIEA 28 kDa抗原组分进一步分离纯化。对获得的色谱纯SIEA 28 kDa抗原分子进行薄层等电聚焦分析,测定其等电点。结果证明电泳纯SIEA 28 kDa抗原分子经高效液相离子交换法纯化后,280nm、220nm波长色谱图均为一个两侧对称、光滑的高峰曲线,色谱洗脱液对其免疫活性光密度图也为一个两侧对称、光滑的高峰曲线。色谱纯化证明SIEA 28 kDa抗原组分可能为单一分子,其等电点范围在p15-p17之间。

SIEA对感染了日本血吸虫尾蚴的小鼠诱导的免疫力研究

目的 采用尾蚴攻击感染小鼠后免疫的方式 ,研究日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原 (SIEA)诱导抗卵胚胎发育和抗虫免疫的效果。方法 感染日本血吸虫尾蚴之后的第 2天用 SIEA免疫小鼠 ,每周 1次 ,共 5次 ,于第 48天剖杀小鼠 ,统计肝脏各期虫卵数、雌虫子宫虫卵数及每鼠成虫数。结果 与对照组比较 ,SIEA免疫诱导显著抗卵胚胎发育效果 ,肝组织成熟卵数下降 2 7.5 % ,成熟卵比例下降 11.0 % ,但 SIEA未诱导显著抗虫和抗雌虫生殖效果。结论 采取在尾蚴感染之后免疫 ,SIEA能诱导显著抗卵胚胎发育 。

日本血吸虫SIEA66-68kDa抗原的分离、纯化及免疫保护性研究

目的研究日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原66-68kDa(SIEA66-68kDa)的动物免疫保护力,并对其作为天然分子疫苗的可行性进行评估。方法采用电泳切胶、电洗脱、超滤离心等技术,分离纯化SIEA66-68kDa天然分子抗原,免疫小鼠,待其产生抗体后进行尾蚴攻击感染(40尾/只),计算减虫率和减卵率。结果 SIEA66-68kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用,其减虫率为41.70%,每克肝脏减卵率为51.23%,雌虫子宫减卵率为29.30%,每克大肠减卵率为59.26%,每克粪便减卵率为45.17%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SIEA66-68kDa天然分子抗原具有刺激小鼠产生较好的抗日本血吸虫感染的免疫保护作用,可作为抗日本血吸虫感染候选分子疫苗的靶标。

SIEA抗血清抑制日本血吸虫卵肺肉芽肿的研究

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）诱导保护性免疫的效果及机制。方法将日本血吸虫未成熟卵在ＲＰＭＩ—１６４０培养液加ＳＩＥＡ免疫血清中培养４天，小鼠尾静脉注射该虫卵，３２天后观察并统计小鼠肺内肉芽肿面积。结果对照组和实验组肺内虫卵肉芽肿面积之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＳＩＥＡ诱导产生的抗体具有一定的免疫力；抗体可能通过阻塞卵孔或者结合特定抗原，阻止卵内毛蚴发育，达到抗卵胚发育的效果。

日本血吸虫SIEA26-28 ku抗原组分的紫外吸收光谱分析

目的 了解SIEA 2 6 2 8ku抗原分子的结构和功能以及生物学特性。 方法 采用梯度聚丙烯酰胺凝胶制备电泳和高效液相色谱方法 ,分离纯化SIEA2 6 2 8ku分子 ,并对其进行紫外吸收光谱分析鉴定。 结果 通过紫外吸收光谱分析表明 ,SIEA2 6 2 8ku抗原组分的紫外吸收光谱共有 6个特征性蛋白吸收峰 ,分别在 2 5 8、2 60、2 64 .5、2 68、2 69.5和 2 72nm ,部分吸收峰符合苯丙氨酸的吸收光谱。 结论 高效液相色谱技术结合紫外吸收光谱分析 ,可为日本血吸虫SIEA 2 6 2 8ku抗原组分结构和功能的进一步研究以及生物学特性分析提供重要信息。

SIEA-Gp101分子抗原的分离纯化及其单特异性抗血清的制备

应用SDS PAGE、电渗、透析等方法 ,分离纯化SIEA Gp10 1分子抗原。采用多途径免疫法制备单特异性抗血清 ,琼脂扩散试验和ELISA测定抗体的效价 ,SDS PAGE和ELIB检测抗体的特异性。结果表明纯化的SIEA Gp10 1为单一抗原分子 ,对SIEA Gp10 1的抗血清进行ELIB分析 ,证明其仅识别SIEA Gp10 1抗原 ,说明SIEA Gp10 1分子具有抗原性。

被动转移抗SIEA-Gp101血清对人工感染日本血吸虫鼠肺虫卵肉芽形成的影响

目的 了解SIEA Gp10 1对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响。方法 采用虫卵肉芽肿肺模型对SIEA Gp10 1的作用进行研究。将 36只昆明鼠随机分为 5组 ,各组被动转移的成分分别为 :抗SIEA Gp10 1,抗SIEA2 8kDa ,抗SIEA Gp10 1与抗SIEA2 8kDa混合血清 ,同时设正常兔血清组与生理盐水对照组。分别于第 1、3、5天尾静脉注射抗血清、正常兔血清或生理盐水 ,各组于第 2天注射日本血吸虫成熟虫卵 ,第 8天取鼠肺组织切片 ,观察虫卵肉芽肿变化并测量、比较虫卵肉芽肿大小。结果 正常兔血清组与生理盐水组相比 ,虫卵肉芽肿大小无统计学差别 (P >0 0 5 ) ;与正常兔血清组比较 ,实验组虫卵肉芽肿的大小分别下降了 18 0 8%、2 8 30 %和 6 44 % ,其中抗SIEA2 8kDa差别显著 (P<0 0 5 ) ,抗SIEA Gp10 1和混合血清组差别不显著 (P >0 0 5 )。肉芽肿内外细胞成分的观察显示 ,正常兔血清组与生理盐水组无明显的差别 ;而抗SIEA2 8kDa血清被转组 ,虫卵破坏加快 ,部分虫卵卵内仅见残渣和少量炎性细胞。抗SIEA Gp10 1与混合血清组部分虫卵坏死 ,有一定数量的炎性细胞浸润。结论 SIEA2 8kDa分子具有抗卵胚发育和抑制虫卵肉芽肿形成的作用。混合血清组较抗SIEA2 6 2 8kDa组虫卵破坏较轻 ,虫卵肉芽肿增大 ,细胞数量增多 。

SIEA免疫血清对体外培养的日本血吸虫卵胚胎发育的作用

目的 采用体外培养方式 ,探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原 (SIEA )免疫血清的抗卵胚胎发育作用。方法 从日本血吸虫小鼠肝脏无菌分离提取虫卵 ,转入 RPMI- 16 40培养基中 ,对照组与试验组分别加入正常鼠血清和 SIEA免疫血清。试验 1:培养虫卵 30 d;试验 2 :培养虫卵 14d。观察统计各期虫卵比较。结果 在试验 1中 ,SIEA免疫血清组成熟卵比例与对照组比较 ,下降 2 2 .5 % ,初产卵、胚胎卵和死亡卵比例均高于对照组。在试验 2中 ,SIEA免疫血清组成熟卵比例下降 14.7% ,胚胎卵比例上升 2 4.4%。结论 体外培养系统中 SIEA免疫血清具有抗日本血吸虫卵胚胎发育的作用。

腹壁浅动脉(SIEA)皮瓣在乳房重建术中的应用

腹壁浅动脉(superficial inferior spigastric artery,SIEA)皮瓣乳房重建术是一种基于腹壁浅动脉系统的术式。由于术中不需切开腹直肌鞘以致破坏皮瓣深部腹部组织的完整,因此大大减少了术后供区并发症,同时取得良好的美容效果。文章综合近年来国外在此术式上的最新进展,就SIEA皮瓣的定义、解剖基础、手术方式、术后并发症进行综述。

来北京,你国际了吗? 中国传媒大学中外学生交流协会(SIEA)

欢迎大家来到中国传媒大学!选择北京这样一个国际化的大舞台,万万不能错过的不仅仅是"北京烤鸭",更不能放过的是这里"得天独厚"的国际化语言文化学习资源!"中外学生交流协会"就是一个致力于帮助中外学生挖掘这种资源的社团。

日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用

运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26～28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26～28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26～28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26～28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26～28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26～28ku的编码基因奠定了基础.

日本血吸虫未成熟卵抗原和成虫抗原分别与联合免疫小鼠的研究

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）和成虫抗原（SA）分别与联系免疫小鼠的抗卵胚胎发育效果和抗感染效果。方法采用SIEA与SA分别与联合免疫小鼠，于攻击感染后48天剖杀，统计雌雄虫数及肝脏各期虫卵数。结果与对照组比较，SIEA单独免疫产生显著抗卵胚胎发育的免疫力，肝组织成熟卵数下降37，3％，成熟卵比例下降24．0％；SA单独免疫产生显著抗感染免疫力，减虫率为34．5％；SIEA与SA联合免疫，产生显著抗感染免疫力和最佳抗卵胚胎发育免疫力，减虫率33．5％，成熟卵数和成熟卵比例分别下降73．8％和45．0％，抗卵胚胎发育免疫力显著高于SIEA单独免疫组。结论提示来源于成虫的抗感染抗原与来源于未成熟虫卵的抗卵胚胎发育抗原联合应用是血吸虫疫苗研制中有希望的发展方向。

日本血吸虫真核表达质粒pcDNA3/HGPRT的构建及序列测定

目的应用基因工程技术,对日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guaninephosphoribosyltransferase,HGPRT)进行亚克隆,试图构建真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT。方法通过筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,克隆HGPRT基因片段,然后将目的片段亚克隆入真核表达载体pcDNA3。结果成功构建了真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT,为进一步研究HGPRT的功能奠定了基础。

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导免疫对虫卵肉芽肿影响的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原和成虫冷浸抗原分别免疫昆明系小鼠，发现未成熟虫卵可溶性抗原（SIEA）能诱导小鼠产生明显抗卵成熟能力。所得虫卵肉芽肿面积（HE染色，LSAB法）和只用佐剂的对照组存在显著性差异（P＜0．01），面积显著减小，而对照组和成虫冷浸抗原之间无显著性差异（P＞0．05）。

诱导保护性免疫的日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原分析

目的：为寻找抗日本血吸虫虫卵成熟疫苗候选分子提供实验依据。方法：用日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）和成虫冷浸抗原经皮肤多次重复注射小鼠，再感染后４９天收集小鼠肝内虫卵。聚乙二醇沉淀虫卵内抗原抗体复合物，应用ＥＩＴＢ分析该抗原抗体复合物。结果：发现各组抗原抗体复合物的组份为６７ＫＤ、５４ＫＤ或４０ＫＤ，其中５４ＫＤ为诱导保护性免疫的各组样品共有组分。