S100P基因shRNA慢病毒载体构建与RNA干扰效率鉴定

目的构建S100P基因短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,并在胃癌细胞中鉴定其沉默效率。方法设计S100P基因特异性的RNA干扰序列,构建shRNA慢病毒载体,与S100P过表达质粒共转染293T细胞。随后筛选有效的shRNA慢病毒载体,与pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染293T细胞,包装病毒,感染胃癌细胞株MGC-803和SGC-7901。采用RT-PCR和Western blot检测S100P基因的敲减效率。结果成功构建S100P基因的shRNA慢病毒载体,MGC-803和SGC-7901细胞中S100P基因的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论成功构建的S100P基因shRNA慢病毒载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。