头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎大鼠胃组织SIRT1、p53和p21的影响

目的:观察头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)的治疗效果及对HAG胃组织中SIRT1/p53/p21信号通路的影响。方法:30只SD大鼠均分为正常对照组、模型组和药物组,正常对照组给予无菌脑心浸液肉汤灌胃,模型组和药物组大鼠给予H.pylori灌胃(1×1011CFU/L SS2000菌液1.5 m L/只)建立HAG模型,药物组HAG模型大鼠给予1.58 mg/(kg·d)头花蓼灌胃治疗,正常对照组大鼠和模型组大鼠给予等量无菌生理盐水灌胃,连续给药14 d;治疗结束4周时检测大鼠胃组织H.pylori定植量、观察各组大鼠胃黏膜组织学改变,采用Real time PCR和Western blot技术检测大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA及蛋白表达水平。结果:正常对照组大鼠胃组织H.pylori定植量为0,模型组和药物组大鼠胃黏膜均有H.pylori定植,与模型组比较,药物组H.pylori定植量显著降低(P<0.05);正常对照组大鼠胃组织无病理形态学改变,模型组大鼠H.pylori感染后的胃黏膜腺体排列不规则,胃黏膜固有层中有较多淋巴细胞浸润,细胞浸润多呈弥漫性;药物组大鼠胃组织病理形态学改变少于模型组;与正常对照组比较,模型组病理评分显著升高,而药物组病理评分显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);H.pylori感染后,与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53基p21 mRNA表达量增加(P<0.05);头花蓼治疗后,与模型组相比,药物组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA水平都明显升高(P<0.05);与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21蛋白表达均有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);而头花蓼治疗后,与模型组相比,SIRT1、p53和p21蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:头花蓼治疗可能是通过上调SIRT1、p53和p21基因表达来发挥作用。

当归多糖对造血干细胞SIRT1、p53和p21表达的影响

目的研究当归多糖(ASP)基于辐射所致小鼠衰老造血干细胞(HSCs) SIRT1、p53和p21蛋白表达的影响,探讨ASP基于调控HSCs衰老的可能机制。方法 72只SPF级C57BL/6J小鼠随机纳入对照组、模型组和ASP组。模型组通过X线3.0G y/8F全身照射建立小鼠HSCs衰老模型;ASP组在照射期间给予ASP灌胃;对照组与模型组予生理盐水。经免疫磁珠法分选小鼠HSCs,采用流式细胞术检测细胞周期,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞;经混合集落培养(CFU-Mix)观察HSCs自我更新及定向分化潜能;Western blot检测SIRT1、p53、p21蛋白表达。结果与对照组比较,X线照射可能显著增加模型组HSCs G;期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性细胞率、p53及p21蛋白表达(P<0.05),降低SIRT1表达和CFU-Mix形成能力(P<0.05)。与模型组比较,ASP会抑制衰老HSCs G;期细胞比例、SA-β-Gal染色阳性细胞率、p53及p21蛋白表达增加(P<0.05),同时SIRT1表达增加、CFU-Mix能力增强(P<0.05)。结论 ASP可能上调SIRT1表达、下调p53及p21表达,从而可能延缓小鼠HSCs衰老。

SRT2104对小鼠糖尿病肾病发病机制及SIRT1/P53/NRF2通路的影响

目的研究SRT2104对糖尿病肾病(DN)小鼠肾功能、肾纤维化、肾炎症及肾氧化应激的影响,并探讨其影响机制。方法将36只雄性BABL/c小鼠随机均分为3组:对照组、DN组和DN+S组,后两组小鼠通过连续5 d腹腔注射50 mg/kg的链脲佐菌素建立DN小鼠模型,之后DN+S组小鼠给予含有SRT2104的饮食喂养24周。最后检测各组小鼠的血糖及肾功能指标,以及肾皮质中肾纤维化、肾炎症及肾氧化应激相关指标和SIRT1/P53/NRF2通路分子的水平。结果DN组和DN+S组的血糖均高于对照组(P<0.05),但DN组和DN+S组组间对比无显著差异。DN组小鼠的尿白蛋白和尿肌酐的比率(UACR)、肾重量/胫骨长度、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)和血β2-微球蛋白(β2-MG)的数值均显著高于对照组(P<0.05),DN+S组显著低于DN组(P<0.05)。DN组小鼠肾皮质中纤维化指标转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达、炎症指标纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)和VCAM-1的表达和氧化应激指标诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平均显著高于对照组(P<0.05),DN+S组显著低于DN组(P<0.05)。DN+S小鼠肾皮质中SIRT1和NRF2的表达均显著高于DN组(P<0.05),P53乙酰化程度低于DN组(P<0.05)。结论SRT2104可降低DN小鼠肾纤维化、肾炎症及肾氧化应激,改善肾损伤,其机制与SIRT1/P53/NRF-2通路的激活有关。

Sirt1、P53及P-gp在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨沉默信息调节因子1(Sirt1)、P53及P-糖蛋白(P-gp)在胃癌组织中的表达、临床病理意义及对生存预后的影响。方法采用免疫组化方法检测胃癌组织及正常组织石蜡切片中的Sirt1、P53及P-gp的表达,KaplanMeier生存曲线分析68例患者生存时间与上述指标的表达水平的关系。结果肿瘤组织中Sirt1、P53及P-gp的表达较正常组织表达增高(P<0.001)。Sirt1的高表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,且浸润深度越深、有淋巴结转移及临床分期升高时表达随之升高(P<0.05)。Sirt1阳性表达和P53、P-gp之间存在一定的相关性(P<0.001)。Sirt1阳性表达的患者生存时间较Sirt1阴性表达者低(P<0.001)。结论 Sirt1、P53及P-gp在胃癌组织中呈现高表达,且与胃癌的病理学特征有相关性;联合检测Sirt1、P53及P-gp表达可作为一组判断患者生存时间及预后的指标。

鼻咽癌p53 p21^(WAF1)和MDM2蛋白异常表达的临床意义

目的:探讨p53、p21WAF1、MDM2蛋白在原发鼻咽癌(NPC)异常表达的临床意义。方法:采用LSAB法检测69例原发NPC组织中p53、p21WAF1和MDM2蛋白的表达状况。结果:1)p53、p21WAF1和MDM2蛋白在原发NPC组织的阳性表达率分别为79.7%、84.1%、和82.6%;高表达率分别为50.7%、46.4%和31.9%。2)p53蛋白的高表达率随TNM分期的升高而增多,P=0.042。3)p53或MDM2蛋白高表达者的复发间期显著短于相应蛋白低表达/阴性者,分别P=0.038和P=0.002。4)p53和MDM2蛋白同时高表达者、MDM2蛋白高表达同时p21WAF1蛋白低表达/阴性者的复发间期明显短于对照组,分别P<0.001;p21WAF1蛋白高表达同时p53蛋白低表达/阴性者、p53和MDM2蛋白同时低表达/阴性者的复发间期显著长于对照组,分别P=0.002和P=0.014。5)p53和MDM2蛋白高表达同时p21WAF1蛋白低表达/阴性者的复发间期明显短于对照组,P<0.001;p53和MDM2蛋白低表达阴性同时p21WAF1蛋白高表达者的复发间期明显长于对照组,P=0.002。结论:p53或MDM2蛋白高表达提示有促进NPC复发的作用,p21WAF1蛋白高表达提示有抑制NPC复发的作用。单独检测p53或MDM2蛋白在原发NPC组织的表达情况可以作为预测NPC复发倾向和临床预后的参考指标;如同时检测p53、MDM2和p21WAF1蛋白的两项或三项指标,预测意义更理想。

CyclinD1、p21^(WAF1)、p53及Ki-67在肝细胞癌中的表达及与预后的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染色,分析其表达水平与HCC病理特征的关系,并进行生存分析。结果 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67在HCC中的阳性表达率分别为38.8%、40.5%、65.4%及80.0%,均明显高于癌旁肝组织(分别为19.0%、11.5%、0.0%、6.3%,P<0.005)。相关分析显示,cyclin D1阳性表达与核分级呈正相关(P=0.041),p21WAF1及p53阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.032、P=0.031)和血管浸润(P=0.036、P=0.011)呈正相关,Ki-67阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.004)、核分级(P=0.045)和血管浸润(P=0.001)呈正相关。生存分析显示,cyclin D1及Ki-67高表达者预后较差。Ki-67阳性表达与p53(P=0.000)及p21WAF1(P=0.047)阳性表达有明显相关性,其他各蛋白之间表达无明显相关。Cox回归模型分析显示,肿瘤大小(P=0.042)、肿瘤数目(P=0.004)及血管浸润(P=0.000)为HCC的独立预后因素。结论 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67可能参与了HCC的生物学进程;cyclin D1及Ki-67阳性表达对HCC预后的判断有一定价值。

CHD5基因启动子甲基化调控p19Arf/p53/p21Cip1信号通路促进急性髓系白血病发病的研究

目的:探讨急性髓系白血病患者(AML)骨髓中CHD5基因甲基启动子甲基化状态及其调控p19Arf/p53/p21Cip1信号通路促进AML发病的机制。方法:采用MSP检测AML组及对照组CHD5基因甲基化状态,应用实时定量RT-PCR和Westernblot检测CHD5、p19Arf、p53及p21Cip1的表达水平。结果:AML患者骨髓中CHD5基因甲基化率(39.06%)较对照组(6.67%)明显增高(P<0.05);CHD5基因甲基化与AML不同染色体核型相关(P=0.009),但与性别、年龄及临床分型无显著相关(P>0.05);AML患者CHD5相对表达水平明显低于对照组(P<0.05);存在CHD5甲基化AML患者p19Arf、p53及p21Cip1基因和蛋白表达水平较对照组降低。结论:AML患者CHD5基因启动子的高甲基化可导致CHD5、p19Arf、p53和p21Cip1表达水平下降,从而可能通过调控p19Arf/p53/p21Cip1途径减弱对白血病细胞增殖抑制作用,促进AML的发生。

食管癌变过程中p53、BrdU、P21^(waf1)和PCNA蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21^(waf1)、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化。方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH29例,DYS23例)p53、PCNA、BrdU和P21^(waf1)进行检测。结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21^(waf1)、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似。随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21^(waf1)呈下降趋势(P<0.05)。BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P>0.05)。p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关;P21^(waf1)的表达与细胞分化程度有关(P<0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化。在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21^(waf1)可能是一个重要的保护因子。

胃癌中p21^(WAF1)与p53基因的相关性研究

目的 探讨胃癌中 p2 1WAF 1与 p5 3基因的关系。方法 采用 S- P法检测 p2 1WAF 1和 p5 3在胃癌中的表达。结果 p2 1与 p5 3在正常胃黏膜、不典型增生、胃癌中的阳性表达率分别为 10 0 .0 %与 0 %、92 .5 %与 15 .0 %、39.8%与 5 6 .5 % ;40例不典型增生 ,p5 3阳性而 p2 1阴性者为 5 .0 % ,p5 3阴性而 p2 1阳性为 82 .5 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3阳性高分化腺癌各为 6 3.3%与 36 .7% ,与低分化腺癌 32 .7%与 78.2 %比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;48.1%的胃癌 p2 1、p5 3蛋白表达相反 (P>0 .0 5 ) ;p2 1表达在侵犯浅肌层为 6 0 .0 %显著高于深肌层的 35 .2 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3在原发与转移癌中一致表达为 35 .3%与 70 .6 % ,皆与未转移癌 6 2 .5 %与 42 .5 %有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;p2 1在 TNM 期 6 0 .0 %、 期 5 6 .2 %显著高于 期 2 7.8%、 期 2 2 .2 % (P<0 .0 5 )。结论 正常胃黏膜和不典型增生 p2 1蛋白表达大部分依赖 p5 3蛋白 ,而胃癌在相当程度上不依赖。p2 1失表达和 p5 3异常表达与胃癌发生、分化程度、转移有关 ,而 p2 1失表达还与侵袭。

乳腺癌细胞中p53、C-erbB-2、p21^(WAF1)和CDK4的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌组织中p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测120例乳腺癌组织石腊切片上p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4的表达。结果:p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4阳性表达率分别为53.3%、63.3%、58.3%、41.6%;阳性产物主要位于细胞核中,p53、C-erbB-2的表达与肿瘤组织分级(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)显著相关,p21WAF1的表达与淋巴结转移(P<0.01)显著相关,无淋巴结转移组明显高于有淋巴结转移组;与组织分级及PR、ER表达无显著相关。CDK4阳性表达与肿瘤组织分级(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)显著相关,与PR、ER无相关。结论:p53、C-erbB-2、p21WAF1和CDK4与乳腺癌的发生发展密切相关,可作为判断肿瘤浸润转移、指导治疗和估计预后的参考指标。特别是p53的表达水平及淋巴结转移可能是判断乳腺癌的术后生存的独立有效指标,而综合应用上述指标可能更有助于预后的判断。

补肝肾益气血方对^(60)Co γ射线所致小鼠骨髓损伤p53、p21^(WAF1)、caspase-3、CD_(34)蛋白表达的影响

目的:探讨补肝肾益气血方对辐射损伤的防护作用及其机理。方法:设正常对照组、病理模型组、补肝肾益气血方高、低剂量组、阳性药物组5组。补肝肾益气血组给予补肝肾益气血方,阳性药物组给予复方阿胶浆,其余给予生理盐水。灌胃10天后,以^(60)Co γ射线全身照射小鼠造成辐射损伤,运用免疫组化法观察补肝肾益气血方对辐照小鼠骨髓p53、p21^(WAF1)、caspase-3、CD_(34)等蛋白表达的影响。结果:该方能抑制受照鼠骨髓有核细胞p53基因突变,降低p53蛋白表达,促进p21^(WAF1)表达,显著降低Caspase-3表达,增加CD_(34)表达。结论:补肝肾益气血方对^(60)Co γ射线所致小鼠骨髓损伤有较好保护作用,其作用机理主要为能促进受损骨髓造血机能恢复和改善造血微环境。

血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠骨髓源内皮祖细胞衰老及p53、SIRT1蛋白表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)衰老及对p53、SIRT1蛋白表达的影响,探讨其抗衰老的作用机制。方法体外培养EPCs,加入100 nmol/L AngⅡ诱导细胞衰老,建立EPCs衰老模型,随机分为正常组、模型组、miR-34a抑制剂组、血府逐瘀汤5%药物血清组、血府逐瘀汤10%药物血清组、血府逐瘀汤15%药物血清组。β-半乳糖苷酶染色法检测内皮祖细胞衰老,Western blot检测EPCs中p53蛋白、SIRT1蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组EPCs衰老数量明显增多(P<0.01),p53蛋白表达量明显升高(P<0.01),SIRT1蛋白表达量明显降低(P<0.01);与模型组比较,miR-34a抑制剂组和5%、10%、15%药物血清组EPCs衰老数量显著减少(P<0.01),miR-34a抑制剂组和10%、15%药物血清组p53蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),miR-34a抑制剂组和10%、15%药物血清组SIRT1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与miR-34a抑制剂组比较,5%、10%、15%药物血清组EPCs衰老数量显著增多(P<0.05,P<0.01),p53蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),SIRT1蛋白表达明显下降(P<0.01);与5%药物血清组比较,10%、15%药物血清组EPCs衰老数量明显减少(P<0.01),p53蛋白表达显著降低(P<0.01),SIRT1蛋白表达显著升高(P<0.01);与10%药物血清组比较,15%药物血清组EPCs衰老数量明显减少(P<0.01),p53蛋白表达差异不明显,SIRT1蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论血府逐瘀汤能延缓EPCs的衰老,可明显降低衰老EPCs中p53蛋白的表达,显著增加衰老EPCs中SIRT1蛋白的表达,其中以15%药物血清组效果最佳。

乙型肝炎病毒X基因经p53依赖性与非依赖性途径对p21^(WAF1)表达的影响

背景与目的研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒X基因(HBx)对p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚。本研究的目的是探讨HBx对p53下游基因p21WAF1的影响。方法通过正、反义野生型p53(wtp53)与HBx单转染及共转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,以及HBx转染不同内源性p53状态的肝癌细胞株,检测p21WAF1启动子荧光素酶基因表达,并用流式细胞仪观察细胞周期的变化,Westernblot法比较p53、p21WAF1表达水平的变化。结果正、反义wtp53与HBx单转染及共转染SMMC-7721细胞,HBx与正义wtp53共转染组(1.007±0.098)与单转染正义wtp53(0.490±0.012)相比,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显升高(P<0.05),其余各组HBx均可导致p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显减少(P<0.05)。Westernblot法表明HBx可导致p53的表达增加,但p53表达较低的SMMC-7721细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达减弱,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达(0.053±0.010)也较对照组(0.094±0.013)明显减少(P<0.05),而p53表达较强的HepG2细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达增强、p21WAF1启动子荧光素酶基因的表达(1.252±0.052)较对照组明显升高(0.767±0.031)(P<0.05)。细胞周期结果表明瞬时转染HBx的SMMC-7721和Hep3B细胞停滞在G0-G1期细胞数(42.31%、36.96%

白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其与sirt1-p53通路的关系

目的研究白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其与sirt1-p53通路的关系。方法 48只SD大鼠随机分为4组,I/R组、白藜芦醇预处理组(Res+I/R组),白藜芦醇预处理+sirt1抑制剂组(Res+ex527+I/R组)I,/R+sirt1抑制剂组(I/R+ex527),每组各12只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌I/R损伤模型;分光光度法测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;免疫组化测定心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白表达;Western印迹检测sirt1、乙酰化p53表达。结果白藜芦醇能减少大鼠心肌I/R后心肌细胞凋亡(P<0.05),使sirt1表达增高(P<0.05),乙酰化p53表达降低(P<0.05)。结论白藜芦醇对大鼠心肌I/R损伤具有保护作用,其机制可能与sirt1-p53通路有关。

山茱萸多糖对衰老模型小鼠肝组织SIRT1和p53基因表达的影响

目的研究山茱萸多糖对衰老模型小鼠肝细胞SIRT1和p53基因表达的影响。方法采用半定量RT-PCR法测定小鼠肝组织SIRT1 mRNA和p53 mRNA的表达,并观察山茱萸多糖对其影响。结果与青年对照组相比,衰老模型组小鼠p53 mRNA表达增高,SIRT1 mRNA表达降低(P<0.01)。山茱萸多糖可降低p53基因表达(P<0.05),使SIRT1基因表达增强,但与衰老模型组相比差异无统计学意义(P>0.05);山茱萸多糖大小剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论山茱萸多糖通过影响SIRT1对p53的作用而延缓衰老。

p53-miR-34a-SIRT1反馈环在血管内皮祖细胞复制性衰老过程中的调控作用及机制

目的:研究p53-miR-34a-SIRT1反馈环在血管内皮祖细胞(EPC)复制性衰老过程中的调控作用及机制。方法:培养并鉴定由脐带血来源的EPC;观察第三代和第六代EPC在衰老、凋亡、周期和血管形成等方面的差异;检测第三代和第六代EPC中p53、乙酰化的p53(Ac-p53)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达情况;构建携带微小核糖核酸(miR)-34a抑制因子的慢病毒载体,明确外源性miR-34a抑制因子能否延缓第六代EPC的凋亡。结果:成功培养了脐带血来源的EPC。第六代EPC的衰老率和凋亡率明显高于第三代EPC,细胞周期主要停留在G0/G1期;第六代EPC的p53表达量高于第三代EPC,Ac-p53和SIRT1表达则相对较低,组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。转染携带miR-34a抑制因子的慢病毒载体后,第六代EPC衰老情况有所改善,血管形成能力也增强,晚期凋亡率明显减少。结论:p53-miR-34a-SIRT1是EPC复制性衰老过程中的重要反馈调节机制,miR-34a抑制因子可能是延缓EPC衰老的靶点。

柴胡疏肝散对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织SIRT1/p53通路相关蛋白的影响

目的探讨柴胡疏肝散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织沉默信息调节因子蛋白1(SIRT1)/p53通路相关蛋白表达的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、柴胡疏肝散组(9.6 g·kg-1),每组8只。正常对照组给予基础饲料,模型组和柴胡疏肝散组给予高脂饲料,柴胡疏肝散组同时给予柴胡疏肝散浸膏剂灌胃。16周后处死大鼠,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量和肝组织TC、TG含量;取肝组织行HE和油红O染色观察组织学改变;蛋白质印迹法检测肝组织SIRT1、p53、乙酰化p53(Ac-p53)蛋白表达。结果与模型组比较,柴胡疏肝散组肝组织病理学结果表明,脂质沉积明显减轻,血清LDL-C和肝组织TC、TG显著降低(P<0.05,P<0.01),肝组织SIRT1蛋白表达水平显著上调(P<0.01),而Ac-p53蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论柴胡疏肝散能够减轻高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝组织脂质沉积,调控肝组织SIRT1/p53通路相关蛋白的表达水平可能是其作用机制之一。

p53和p21^(WAF1)在鼻咽癌rAd-p53瘤内注射前后的表达及其与近期预后的关系

目的探讨重组人p53腺病毒(rAd-p53)瘤内注射前后鼻咽癌(NPC)组织中p53蛋白和p21WAF1蛋白的表达情况,及其与鼻咽癌近期疗效的关系。方法应用免疫组织化学法检测12例鼻咽慢性炎组织和63例确诊中晚期鼻咽癌组织的p53和p21WAF1蛋白表达情况。63例中晚期鼻咽癌随机分为2组:p53治疗组(32例):rAd-p53瘤内注射+同步放化疗;常规治疗组(31例):同步放化疗。分析两组治疗前及放疗至20 Gy时p53和p21WAF1蛋白表达情况及其与预后的关系。结果 NPC组织中p53和p21WAF1蛋白阳性表达率分别为49.21%和46.03%,和鼻咽黏膜慢性炎相比差异有统计学意义(P<0.05)。NPC组织中p53和p21WAF1蛋白表达有相关性(rs=0.556,P=0.000)。放疗前及放疗至20 Gy时,鼻咽癌p53治疗组和p21WAF1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);两组p53蛋白和p21WAF1蛋白阳性表达与1年无瘤生存率有关(P<0.05)。结论 rAd-p53瘤内注射后p53和p21WAF1蛋白的阳性表达可能在抑制鼻咽癌复发或转移进程中起着重要作用,并预示较好的预后。

上皮性卵巢癌组织中p21^(WAF1)表达及其与P53和PCNA的相关性

背景与目的:近年研究表明,p21WAF1下调与多种肿瘤发生、发展有关,但其与上皮性卵巢癌的关系研究甚少,本研究从mRNA和蛋白水平探讨p21WAF1基因在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其与P53和PCNA蛋白表达的相关性。方法:应用RT-PCR法检测55例上皮性卵巢癌、32例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中p21WAF1mRNA表达,免疫组化法检测P21WAF1、P53、PCNA蛋白表达,并结合其临床病理参数及预后进行分析。结果:上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤、正常卵巢组织中p21WAF1mRNA阳性率分别为40.00%、56.25%、73.33%(P=0.012),P21WAF1蛋白阳性率分别为36.36%、56.25%、80.00%(P=0.001)。上皮性卵巢癌p21WAF1mRNA及其蛋白表达均低于其它两组,而P53、PCNA蛋白表达阳性率显著高于其它两组(P<0.05)。上皮性卵巢癌中p21WAF1mRNA表达与其蛋白表达呈显著性正相关,与PCNA表达呈负相关,与P53表达无显著性相关。P21WAF1蛋白表达与PCNA、P53表达均呈负相关。P21WAF1蛋白低表达与卵巢癌FIGO分期晚有显著性相关(P=0.032),与患者年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无显著性相关(P>0.05),而p21WAF1mRNA与上述各项临床病理参数均无显著性相关(P>0.05)。单因素分析显示p21WAF1mRNA与P21WAF1蛋白低表达患者预后差(P<0.05)。结论:上皮性卵巢?

舒林酸在防治小鼠大肠癌中对p53和p21^(WAF1)影响的初步研究

目的:细胞凋亡受到抑制与大肠癌的发生有密切联系。近年来发现长期应用舒林酸等非甾体抗炎药(NSAID)对人的结肠癌、直肠癌和癌前病变的发生发展有预防作用。本实验试图通过对凋亡调控基因的观察,初步探讨舒林酸抗肿瘤作用可能存在的分子机制。方法:利用二甲肼诱发的小鼠实验性大肠癌动物模型,采用TUNEL原位杂交和免疫组化染色的方法,分别标记细胞凋亡、p53、p21阳性细胞,多阶段地动态观察诱癌过程中蛋白表达的变化和舒林酸对它们的影响。结果:p53蛋白表达阳性细胞密度随着病变加重而增加,p21阳性细胞密度升高趋势不明显,预防组、治疗组的p53和p21阳性率都与模型组无显著性差异(P>0.05)。预防组和治疗组中p53低于模型组(P<0.05),p21表达则高于模型组(P<0.05)。结论:舒林酸可以通过上调p21的表达,抑制突变型p53的表达,诱导细胞凋亡,抑制肿瘤形成和进展。