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竹节参齐墩果烷皂苷对RAW264-7巨噬细胞SIRT1活性影响及抗炎作用研究 被引量:16
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作者 袁琴 袁丁 +4 位作者 周志勇 刘朝奇 王婷 向婷婷 张长城 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期349-354,共6页
目的探讨竹节参齐墩果烷皂苷(chikusetsu oleanane saponin,COS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞的SIRT1活性影响及抗炎作用。方法Griess法测定一氧化氮(NO)释放量;免疫印迹(Western blot)法检测炎性因子肿瘤坏... 目的探讨竹节参齐墩果烷皂苷(chikusetsu oleanane saponin,COS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞的SIRT1活性影响及抗炎作用。方法Griess法测定一氧化氮(NO)释放量;免疫印迹(Western blot)法检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)蛋白表达;免疫荧光分析COS对细胞核因子-κB(NF-κB)和沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)核转运的作用。结果 COS在25~300 mg·L^(-1)与1 mg·L^(-1)LPS共培养时,对RAW264.7细胞生长无明显影响;与LPS组相比,COS能有效抑制NO释放和抑制TNF-α、IL-1β的分泌;还能抑制NF-κB的核移位,上调SIRT1的表达。结论 COS对LPS刺激的RAW264.7细胞炎症具有保护作用,其保护机制可能是COS上调SIRT1表达,促进NF-κB去乙酰化作用,从而抑制NF-κB的核移位,减少TNF-α、IL-1β等炎症因子的产生。 展开更多
关键词 竹节参齐墩果烷皂苷 RAW264-7细胞 脂多糖 一氧化氮 TNF-α IL-1Β NF-κB sirt1
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SIRT1通过调节FOXO1/RAB7信号通路促进低氧诱导的胰腺癌细胞自噬 被引量:10
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作者 田舍 江建新 +2 位作者 喻超 李琳 孙诚谊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1545-1550,共6页
目的:探讨SIRT1对低氧诱导的胰腺癌细胞自噬的影响及FOXO1/RAB7信号通路在其中的作用。方法:利用Western blot和免疫荧光法检测SIRT1在低氧诱导的自噬胰腺癌细胞核内的表达情况。将下调 SIRT1 基因的小干扰RNA和过表达 SIRT1 的质粒转... 目的:探讨SIRT1对低氧诱导的胰腺癌细胞自噬的影响及FOXO1/RAB7信号通路在其中的作用。方法:利用Western blot和免疫荧光法检测SIRT1在低氧诱导的自噬胰腺癌细胞核内的表达情况。将下调 SIRT1 基因的小干扰RNA和过表达 SIRT1 的质粒转染到胰腺癌Panc-1细胞中,敲减和过表达 SIRT1 基因;激光共聚焦显微镜追踪双色LC3荧光蛋白表达,Western blot实验检测自噬相关蛋白LC3、p62及FOXO1/RAB7信号通路的蛋白表达情况。通过生物信息学GEPIA网站关联性分析预测SIRT1与FOXO1的相互作用,并进一步利用免疫共沉淀技术检测 SIRT1与FOXO1蛋白的相互作用。结果: SIRT1在低氧诱导的胰腺癌细胞核内表达增加。敲减SIRT1 的表达可以引起胰腺癌细胞自噬受抑制。过表达 SIRT1 能够增强Panc-1细胞中FOXO1和RAB7的蛋白表达水平( P <0.05),而当 SIRT1 表达下调时,FOXO1和RAB7表达受到抑制( P <0.05)。SIRT1与FOXO1蛋白存在相互作用。结论: SIRT1可能参与胰腺癌细胞自噬的调控,其机制可能与 FOXO1/RAB7信号通路有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 sirt1蛋白 自噬 FOXO1/RAB7信号通路
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SIRT1去乙酰化酶抑制剂引起人乳腺癌MCF-7耐药细胞凋亡的机制 被引量:4
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作者 李咏 徐榕 +2 位作者 张秀敏 李电东 何琪杨 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1003-1010,共8页
研究SIRT1去乙酰化酶抑制剂引起人乳腺癌MCF-7耐多柔比星(doxorubicin,DOX)细胞及其敏感细胞凋亡的机制。MTT法检测细胞生长抑制作用;Western blotting方法检测蛋白表达;DNA特异染料Hoechst 33342染色检测染色质凝集;Annexin V检测细胞... 研究SIRT1去乙酰化酶抑制剂引起人乳腺癌MCF-7耐多柔比星(doxorubicin,DOX)细胞及其敏感细胞凋亡的机制。MTT法检测细胞生长抑制作用;Western blotting方法检测蛋白表达;DNA特异染料Hoechst 33342染色检测染色质凝集;Annexin V检测细胞凋亡;流式细胞仪测定细胞周期分布。结果表明,SIRT1去乙酰化酶抑制剂烟酰胺(nicotinamide,NAM)和Sirtinol对人乳腺癌细胞MCF-7敏感和耐药细胞表现出相同的生长抑制作用,但没有增强DOX活性的作用。NAM使MCF-7和MCF-7/DOX细胞阻滞在G2/M期。50 mmol.L-1NAM作用MCF-7细胞后,激活caspase凋亡通路,出现PARP、caspase-6、-7、-9切割片段,并且染色质发生凝集和Annexin V阳性细胞。而在MCF-7/DOX耐药细胞中,NAM作用24 h后,才开始出现PARP、caspase-6、-7切割片段,48 h后明显增加,可以检测到较多的细胞出现染色质凝集和Annexin V阳性细胞。SIRT1去乙酰化酶抑制剂对人乳腺癌MCF-7耐药细胞和敏感细胞均有相似的抑制作用,无交叉耐药性,其作用通过激活caspase凋亡通路实现。 展开更多
关键词 sirt1去乙酰化酶抑制剂 多药耐药性 细胞凋亡 人乳腺癌MCF-7细胞
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SIRT7通过抑制内质网应激蛋白GRP78减轻脂多糖或D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的肝细胞凋亡 被引量:3
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作者 阮昕 张颖婷 +7 位作者 韩可琪 林龙帅 陈晨 岳铭 王楚翘 孙英刚 赵庆华 贺明 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期812-819,共8页
目的·探究SIRT7(sirtuin 7)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/LPS诱导的急性肝损伤的作用及机制。方法·将13周龄的C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组(n=5)、LPS组(n=7)和D-GalN/LPS组(n... 目的·探究SIRT7(sirtuin 7)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/LPS诱导的急性肝损伤的作用及机制。方法·将13周龄的C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组(n=5)、LPS组(n=7)和D-GalN/LPS组(n=8),分别腹腔注射生理盐水、LPS和D-GalN/LPS。24 h后收集生理盐水组和LPS组的小鼠血清和肝脏,D-GalN/LPS组于注射后8 h收集血清和肝脏。利用苏木精-伊红(H-E)染色比较3组小鼠肝脏病理学改变,同时观察血清学生化指标的变化;利用TUNEL染色和F4/80染色明确小鼠肝脏内细胞凋亡和炎症细胞浸润程度;利用realtime-PCR检测各组小鼠肝组织中SIRT7、白介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)等的mRNA水平;利用Western blotting检测各组小鼠肝组织中SIRT7、激活型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase3)和伴侣葡萄糖调节蛋白(the 78 kDa glucose regulated protein,GRP78)等的蛋白水平。体外实验中,在正常小鼠肝细胞AML-12细胞中过表达SIRT7,并给予LPS刺激,利用Western blotting明确SIRT7对LPS引起的内质网应激信号通路分子的调控。结果·注射LPS或D-GalN/LPS后,小鼠肝脏出现明显的炎症细胞浸润、充血及肝细胞凋亡,血清中谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)和谷草转氨酶(glutamic-oxalacetic transaminase,GOT)水平明显升高,肝组织中SIRT7的mRNA和蛋白水平均明显降低,内质网应激蛋白GRP78表达明显上调。在AML-12细胞系中,SIRT7过表达可明显抑制LPS引起的GRP78蛋白上调。结论·SIRT7通过抑制内质网应激中的GRP78减轻LPS或D-GalN/LPS诱导的肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 去乙酰化酶(sirtuin) 脓毒症 sirt7 急性肝损伤 内质网应激 细胞凋亡
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苏姜猪SIRT7基因组织表达定位分析 被引量:2
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作者 王利红 张伟 +1 位作者 陈圣源 朱军 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第15期63-67,共5页
为深入分析去乙酰化转移酶Sirtuin7(SIRT7)在苏姜猪不同脏器组织中的表达分布情况,采用实时荧光定量(RT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫组织化学方法对苏姜猪11种脏器组织中SIRT7基因的表达分布进行研究。结果表明,SIRT7蛋白在所... 为深入分析去乙酰化转移酶Sirtuin7(SIRT7)在苏姜猪不同脏器组织中的表达分布情况,采用实时荧光定量(RT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫组织化学方法对苏姜猪11种脏器组织中SIRT7基因的表达分布进行研究。结果表明,SIRT7蛋白在所检测的组织样中均有表达,其中在胃和肠组织中表达量相对最高,显著高于其他组织(P<0.05);SIRT7蛋白主要分布于胃腺、大肠和小肠的腺细胞中,在心脏、腿肌、背最长肌和腹脂中的表达量相对最低,显著低于其他组织中表达量(P<0.05);在肺、肾和脾脏组织中,SIRT7蛋白主要分布于支气管上皮细胞、肺泡细胞、肾脏近远曲小管细胞、脾脏红髓区细胞;SIRT7基因在各脏器组织中mRNA和蛋白表达量间存在极显著正相关(P<0.01)。结果提示,SIRT7基因在苏姜猪组织中广泛表达,其转录和翻译水平存在极显著正相关,该基因功能主要与各脏器功能细胞的物质能量代谢和分泌功能有关。 展开更多
关键词 苏姜猪 sirt7 RT-PCR ELISA 免疫组化
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SIRT7研究进展 被引量:1
6
作者 韩艳艳 于世鹏 《济宁医学院学报》 2016年第5期353-356,361,共5页
SIRT7是Sirtuins蛋白家族(组蛋白去乙酰化酶类)成员之一,位于17号亚染色体(17q25.3)的单拷贝基因。以往研究多集中在SIRT1~SIRT6,近年来,随着对SIRT7研究的不断深入,发现其对特定底物具有脱乙酰化物酶的活性,可通过多种途径参与基... SIRT7是Sirtuins蛋白家族(组蛋白去乙酰化酶类)成员之一,位于17号亚染色体(17q25.3)的单拷贝基因。以往研究多集中在SIRT1~SIRT6,近年来,随着对SIRT7研究的不断深入,发现其对特定底物具有脱乙酰化物酶的活性,可通过多种途径参与基因转录、蛋白质合成、染色体重构及细胞应激等过程的调节。此外,SIRT7还参与相关疾病及衰老的发生发展过程。本文就近年来SIRT7研究进展作一综述。 展开更多
关键词 sirt7 催化活性 细胞应激 疾病 衰老
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SIRT7对高糖环境下小鼠肾足细胞增殖、凋亡的影响及其机制
7
作者 冯敏 林婷 +3 位作者 陈霞霞 杨小玲 吕琦 温俊平 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期611-616,共6页
目的:探讨沉默信息调节因子7(SIRT7)对高糖环境下小鼠肾足细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:在体外高糖条件下培养小鼠肾足细胞,构建SIRT7过表达载体(pcDNA3.1-SIRT7)和小干扰RNA-SIRT7(siRNA-SIRT7)干扰载体并转染小鼠肾足细胞,依... 目的:探讨沉默信息调节因子7(SIRT7)对高糖环境下小鼠肾足细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:在体外高糖条件下培养小鼠肾足细胞,构建SIRT7过表达载体(pcDNA3.1-SIRT7)和小干扰RNA-SIRT7(siRNA-SIRT7)干扰载体并转染小鼠肾足细胞,依据干预因素分组设计为空白对照组(Control)、高糖组(HG)、SIRT7过表达+高糖组(SIRT7 OE+HG)、SIRT7过表达阴性对照+高糖组(SIRT7 OE-NC+HG)、siRNA-SIRT7干扰+高糖组(siRNA-SIRT7+HG)、siRNA-SIRT7干扰阴性对照+高糖组(siRNA-SIRT7-NC+HG)。实时荧光定量RT-qPCR和免疫印迹验证SIRT7过表达和干扰效率。采用CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量RT-qPCR分析SIRT7的mRNA表达水平,免疫印迹检测小鼠肾足细胞功能蛋白Nephrin和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果:CCK-8检测结果显示,与Control组比较,HG组细胞的增殖活性下降(P<0.05),与HG组比较,siRNA-SIRT7+HG组细胞的增殖活性显著降低(P<0.05),而SIRT7 OE+HG组细胞的增殖活性增强(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,与Control组比较,HG组细胞的凋亡率升高(P<0.05),与HG组比较,siRNA-SIRT7+HG组细胞的凋亡率显著升高(P<0.05),而SIRT7 OE+HG组细胞的凋亡率下降(P<0.05)。免疫印迹检测结果显示,与Control组比较,HG组Nephrin、Wnt5a和β-catenin蛋白表达下调(P均<0.05),与HG组比较,siRNA-SIRT7+HG组Nephrin、Wnt5a和β-catenin蛋白表达显著下降(P均<0.05),而SIRT7 OE+HG组Nephrin、Wnt5a和β-catenin蛋白表达显著升高(P均<0.05)。结论:高糖环境可抑制小鼠肾足细胞增殖并诱导凋亡、过表达SIRT7可逆转该作用,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路的活性有关。 展开更多
关键词 肾足细胞 sirt7 WNT/Β-CATENIN信号通路 凋亡 高糖 小鼠
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SIRT7与肿瘤关系的研究进展
8
作者 杨增祥 邹晓峰 薛义军 《赣南医学院学报》 2017年第2期317-320,325,共5页
SIRT7是Sirtuins蛋白家族中成员之一,位于细胞核仁的蛋白。SIRT7主要参与细胞的rRNA转录、蛋白质合成、染色体重建、细胞生存、脂质代谢等重要生理过程。目前研究发现SIRT7在多种肿瘤组织中表达增多,与肿瘤的发生、发展密切相关。但SIRT... SIRT7是Sirtuins蛋白家族中成员之一,位于细胞核仁的蛋白。SIRT7主要参与细胞的rRNA转录、蛋白质合成、染色体重建、细胞生存、脂质代谢等重要生理过程。目前研究发现SIRT7在多种肿瘤组织中表达增多,与肿瘤的发生、发展密切相关。但SIRT7在肿瘤发生、发展过程中的作用机制及其与肿瘤的临床关系尚未明确。 展开更多
关键词 sirt7 肿瘤 机制
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Sirt7在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 刘春菊 高英 魏力 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第11期1787-1790,共4页
目的:作为七个Sirtuin(SIRT,又称抗衰老酶)家族成员(Sirt1-Sirt7)之一,Sirt7已被发现在很多肿瘤中异常表达,但其在宫颈癌中的表达仍不清楚。本研究中重点探索Sirt7在宫颈鳞状细胞癌中的表达以及其在宫颈癌发生、发展及转移方面的临床意... 目的:作为七个Sirtuin(SIRT,又称抗衰老酶)家族成员(Sirt1-Sirt7)之一,Sirt7已被发现在很多肿瘤中异常表达,但其在宫颈癌中的表达仍不清楚。本研究中重点探索Sirt7在宫颈鳞状细胞癌中的表达以及其在宫颈癌发生、发展及转移方面的临床意义。方法:本研究共纳入手术切除宫颈癌组织石蜡标本113例,采用免疫组化(SP)法检测宫颈癌标本39例,宫颈上皮内瘤变标本62例和正常宫颈组织12例中Sirt7的表达情况,并分析Sirt7与宫颈癌临床病理之间的关系。结果:Sirt7在正常宫颈、宫颈鳞状上皮内瘤变(低度)、宫颈鳞状上皮内瘤变(高度)及宫颈鳞癌组织中的阳性表达率依次上升,分别为8.3%,13.1%,41.7%及69.2%(P<0.05)。另外,Sirt7的表达情况与宫颈鳞癌的组织分化程度相关(P<0.05),具有统计学意义,而与临床分期、淋巴结转移及患者年龄无关(P>0.05)。结论:Sirt7可能在宫颈鳞癌的恶性进展中发挥作用,有可能是宫颈鳞癌治疗的一个潜在靶点。 展开更多
关键词 sirt7 宫颈鳞状细胞癌 免疫组织化学
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稳定表达SirT7对其转染的P19细胞的增殖抑制作用 被引量:1
10
作者 吕建祎 张业 沈珝琲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期724-727,共4页
目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对... 目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对P19细胞生长和细胞周期的影响。结果稳定表达Sirt7 P19细胞系细胞生长速度减慢,流式细胞仪荧光分析呈现明显的G1/S期阻滞。结论SirT7可导致P19细胞的周期阻滞,并抑制细胞的增殖。 展开更多
关键词 sirt7 细胞增殖 细胞周期
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干扰SIRT7抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力 被引量:1
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作者 陈晓曦 陈旭旭 +2 位作者 林佳浩 陈吉彩 黄国裕 《温州医科大学学报》 CAS 2019年第1期11-14,23,共5页
目的:研究干扰SIRT7对甲状腺癌细胞BCPAP的体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过慢病毒构建干扰SIRT7的甲状腺癌BCPAP的稳定株,并在mRNA和蛋白水平验证干扰效果,然后通过CCK-8、细胞划痕、细胞迁移和细胞侵袭实验来研究SIRT7对甲... 目的:研究干扰SIRT7对甲状腺癌细胞BCPAP的体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过慢病毒构建干扰SIRT7的甲状腺癌BCPAP的稳定株,并在mRNA和蛋白水平验证干扰效果,然后通过CCK-8、细胞划痕、细胞迁移和细胞侵袭实验来研究SIRT7对甲状腺癌细胞BCPAP体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:成功构建干扰SIRT7的甲状腺癌细胞BCPAP的稳定株;干扰SIRT7之后,甲状腺癌细胞BCPAP的体外增殖活力显著降低,划痕愈合能力、细胞迁移和侵袭能力也明显减弱,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:SIRT7可能在甲状腺癌中扮演了癌基因的角色,并且SIRT7可能是甲状腺癌一个潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 癌基因 sirtUIN sirt7
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SIRT1全长(SIRT1-FL)及选择性剪接变异体(SIRT1-△Exon7)在大鼠海马和皮层的表达及其意义 被引量:1
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作者 卫美辰 张策 杨小荣 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第9期850-853,共4页
目的明确大鼠神经系统是否存在SIRT1-△Exon7,并初步探讨SIRT1-FL和SIRT1-△Exon7对神经干细胞分化的影响。方法分别提取新生大鼠海马和皮层的mRNA,应用PCR和RT-PCR方法检测SIRT1-FL和SIRT1-△Exon7的mRNA表达水平。结果 SIRT1-△Exon7... 目的明确大鼠神经系统是否存在SIRT1-△Exon7,并初步探讨SIRT1-FL和SIRT1-△Exon7对神经干细胞分化的影响。方法分别提取新生大鼠海马和皮层的mRNA,应用PCR和RT-PCR方法检测SIRT1-FL和SIRT1-△Exon7的mRNA表达水平。结果 SIRT1-△Exon7和SIRT1-FL的mRNA在大鼠海马和皮层均有表达。皮层SIRT1-FL mRNA含量比海马高5.81%(P<0.05),皮层SIRT1-△Exon7 mRNA含量比海马低56.68%(P<0.05)。结论首次发现大鼠神经系统存在SIRT1-△Exon7。SIRT1-FL可能促进了神经干细胞的分化过程,而SIRT1-△Exon7可能发挥相反的作用。 展开更多
关键词 选择性剪接 sirt1-FL sirt1-△Exon7 神经干细胞 分化
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SIRT7生物学功能及其与肿瘤发生发展关系的研究进展 被引量:1
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作者 胡烨 陈思齐(综述) 谢妮(审校) 《临床与病理杂志》 2020年第4期994-1000,共7页
SIRT7是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)依赖蛋白去乙酰化酶,对组蛋白H3的第18位赖氨酸残基(H3K18ac)有特异性去乙酰化作用。作为Sirtuins蛋白家族的成员之一,SIRT7是许多细胞活动的关键介质。越来越多... SIRT7是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)依赖蛋白去乙酰化酶,对组蛋白H3的第18位赖氨酸残基(H3K18ac)有特异性去乙酰化作用。作为Sirtuins蛋白家族的成员之一,SIRT7是许多细胞活动的关键介质。越来越多的证据表明SIRT7的基本细胞程序功能对于致癌演变以及肿瘤生物学有重要的影响,因此SIRT7有望成为表观遗传药物治疗新靶点。 展开更多
关键词 sirt7 去乙酰化酶 肿瘤
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牦牛SIRT7基因克隆及其在各组织和不同发情时期卵巢中的表达 被引量:1
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作者 杨柳青 殷实 +2 位作者 秦文昌 袁钰洁 李键 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期219-225,共7页
旨在克隆牦牛Sirtuin7(SIRT7)基因,预测其蛋白结构和功能,并检测其mRNA在牦牛各组织和不同发情时期卵巢中的表达。采集成年牦牛(3~5岁)的肝脏、乳腺、大肠、肾等组织及处于卵泡期、红体期、黄体期的卵巢。提取各组织的总RNA,并通过反转... 旨在克隆牦牛Sirtuin7(SIRT7)基因,预测其蛋白结构和功能,并检测其mRNA在牦牛各组织和不同发情时期卵巢中的表达。采集成年牦牛(3~5岁)的肝脏、乳腺、大肠、肾等组织及处于卵泡期、红体期、黄体期的卵巢。提取各组织的总RNA,并通过反转录PCR(Reverse transcription PCR,RT-PCR)扩增获得牦牛SIRT7的基因序列。通过不同的生物信息学软件比对SIRT7基因的序列同源性、构建系统进化树以及预测牦牛SIRT7所编码蛋白的结构和功能。采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法检测SIRT7 mRNA在牦牛各组织和不同发情时期卵巢中的表达。结果显示,牦牛SIRT7基因的开放阅读框(Open reading frame,ORF)大小为1203 bp,编码400个氨基酸。牦牛SIRT7基因的核苷酸序列与黄牛、绵羊、山羊的同源性较高。SIRT7蛋白为亲水性蛋白。二级结构由α-螺旋(47.4%)、β-折叠(29.7%)、β-转角(15.7%)及无规卷曲(7.2%)组成。磷酸化和糖基化分析结果表明,SIRT7蛋白有38个磷酸化位点,24个O-糖基化位点。荧光定量结果为,SIRT7 mRNA在牦牛的肾中表达最高。在牦牛卵巢中,卵泡期、红体期、黄体期SIRT7 mRNA的表达量呈持续升高的趋势,其中黄体期表达量最高。为揭示SIRT7在牦牛生长发育,尤其是卵巢发育过程中的调控作用提供一定的基础数据。 展开更多
关键词 牦牛 sirt7 克隆 组织表达谱 卵巢
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SIRT7生物学功能与人类疾病研究进展 被引量:2
15
作者 刘新 闫波 《济宁医学院学报》 2017年第4期295-300,共6页
SIRT7是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的第三类去乙酰化酶sirtuins家族成员之一。尽管SIRT7是迄今sirtuins家族中研究最少的成员,但是最近的突破性研究使其去乙酰化活性及生物功能日渐清晰。SIRT7是sirtuins家族中唯一位于核仁的蛋白... SIRT7是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的第三类去乙酰化酶sirtuins家族成员之一。尽管SIRT7是迄今sirtuins家族中研究最少的成员,但是最近的突破性研究使其去乙酰化活性及生物功能日渐清晰。SIRT7是sirtuins家族中唯一位于核仁的蛋白。在有丝分裂中,SIRT7介导rDNA转录激活。SIRT7通过其去乙酰化活性与P53、H3K18、PAF53、NPM1、GABP-β1和U3-55k等多种底物蛋白相互作用,参与调控细胞增殖、衰老、凋亡等多种细胞进程,并在应激条件下参与调节细胞生存与凋亡的平衡。SIRT7在细胞代谢过程中发挥重要作用,参与恶性肿瘤、心血管疾病、脂肪肝及糖尿病等疾病的病理性进展。本文总结了近年来SIRT 7的研究进展,就其生物学功能与人类疾病的相关性作一综述。 展开更多
关键词 sirt7 去乙酰化活性 应激 代谢
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Expression analysis,single nucleotide polymorphisms within SIRT4 and SIRT7 genes and their association with body size and meat quality traits in Qinchuan cattle 被引量:4
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作者 GUI Lin-sheng XIN Xiao-ling +2 位作者 WANG Jia-li HONG Jie-yun ZAN Lin-sen 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第12期2819-2826,共8页
Silent information regulator 2 (Sir2) proteins, or sirtuins, are nicotine adenine dinucleotide (NAD)-dependent deacetylases that connect metabolism with longevity in lower organisms. In mammals, there are seven Si... Silent information regulator 2 (Sir2) proteins, or sirtuins, are nicotine adenine dinucleotide (NAD)-dependent deacetylases that connect metabolism with longevity in lower organisms. In mammals, there are seven Sir2 homologs, namely, silent information regulators (SIRT1-7). SIRT4 and SIRT7 genes play a crucial role in regulating lipid metabolism, cellular growth and metabolism. This suggests that they are potential candidate genes for affecting body size and meat quality traits in animals. Hence, this study aimed to detect genetic variations of both SIRT4 and SIRT7 bovine genes in Qinchuan cattle, and to evaluate the effect of these variations on economically important body size and meat quality traits. Expression analysis using quantitative real-time PCR (qPCR) indicated that SIRT4 and SIRT7 were broadly expressed in all thirteen studied tissues. The expression of SIRT4 was higher in liver, muscle, and in subcutaneous fat tissue. In the case of SIRT7, the expression was higher in lung, abomasum, and subcutaneous fat. Using DNAsequencing, a total of three single nucleotide polymorphisms (SNPs) were identified within SIRT4 and SIRT7 genes in 468 Qinchuan cattle. These included one novel SNP within 3' untranslated regions (UTR) of SIRT4 (SNP1: g. 13915A〉G) and two novel synonymous substitutions in SIRT7 (SNP2: g.3587C〉T and SNP3: g.3793T〉C). Statistical analyses indicated that all three SNPs could significantly influence some body size and meat quality traits in Qinchuan cattle. These novel findings will provide a background for application of bovine SIRT4 and SIRT7 genes in the selection program of Chinese cattle. 展开更多
关键词 sirt4 sirt7 single nucleotide polymorphisms (SNPs) beef cattle
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SIRT7基因乙酰化活性缺失突变真核表达载体的构建
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作者 李小娜 梁慧敏 +6 位作者 王天晓 韩飞 刘文斌 郑立娟 董严 刘晋祎 时小燕 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2015年第2期87-90,共4页
目的构建SIRT7基因乙酰化活性缺失的定点突变真核表达载体。方法用RT-PCR法从293T细胞中扩增SIRT7基因,并克隆到真核载体pcDNA 3.1/myc-His(-)A上。采用Two-step PCR定点突变技术,构建SIRT7基因的H187Y突变质粒,经测序确证定点突变成... 目的构建SIRT7基因乙酰化活性缺失的定点突变真核表达载体。方法用RT-PCR法从293T细胞中扩增SIRT7基因,并克隆到真核载体pcDNA 3.1/myc-His(-)A上。采用Two-step PCR定点突变技术,构建SIRT7基因的H187Y突变质粒,经测序确证定点突变成功,再将SIRT7及突变载体转染293T细胞,Western blot检测融合蛋白表达。结果克隆出SIRT7基因,构建了真核载体pcDNA 3.1/myc-His-SIRT7,经Two-step PCR获得突变体pcDNA 3.1/myc-His-SIRT7H187Y。DNA测序结果表明,编码187位氨基酸的560-562位碱基由CAC突变为TAC,其他碱基均无突变。SIRT7和H187Y突变载体转染293T细胞后,可检测出myc-SIRT7融合蛋白表达。结论成功构建了SIRT7以及H187Y突变的真核表达载体。 展开更多
关键词 sirt7 TWO-STEP PCR 定点突变 真核表达载体
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SIRT7基因在胃癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 刘衍姣 李兰兰 曹璋 《科技视界》 2018年第35期180-181,167,共3页
目的:基于大数据挖掘分析SIRT7基因在胃癌组织的表达及其对胃癌患者预后的影响。方法:采用Oncomine数据库分析SIRT7在胃癌组织中的mRNA表达情况,通过Kaplan-Meier Plotte数据库进行胃癌患者总生存期的分析。结果:在mRNA水平上,与正常胃... 目的:基于大数据挖掘分析SIRT7基因在胃癌组织的表达及其对胃癌患者预后的影响。方法:采用Oncomine数据库分析SIRT7在胃癌组织中的mRNA表达情况,通过Kaplan-Meier Plotte数据库进行胃癌患者总生存期的分析。结果:在mRNA水平上,与正常胃组织比较,胃癌组织中呈低表达,但是差异无统计学意义;但是生存分析结果显示SIRT7高表达的胃癌患者预后较差。结论:SIRT7表达在胃癌和正常胃组织中有明显差异, SIRT7过表达的胃癌患者预后较差。 展开更多
关键词 胃癌 sirt7 预后 表达
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SIRT7调控SMAD4去乙酰化抑制口腔癌细胞EMT转化及转移 被引量:2
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作者 高运来 陶文 +1 位作者 徐峰 李伟 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期1089-1093,共5页
目的探讨口腔癌细胞中SIRT7表达,分析其表达对口腔癌细胞EMT转化、转移能力的影响及可能分子机制。方法Western blotting检测SIRT7在正常口腔细胞系HOK和人口腔癌细胞系HSC3、OECM1、OC3、SCC4和SCC25中的表达;采用慢病毒载体过表达(OE-... 目的探讨口腔癌细胞中SIRT7表达,分析其表达对口腔癌细胞EMT转化、转移能力的影响及可能分子机制。方法Western blotting检测SIRT7在正常口腔细胞系HOK和人口腔癌细胞系HSC3、OECM1、OC3、SCC4和SCC25中的表达;采用慢病毒载体过表达(OE-SIRT7组)或敲低(shSIRT7组)HSC3细胞系中的SIRT7表达;采用细胞划痕实验和Transwell实验检测SIRT7表达对口腔癌细胞迁移和侵袭的影响;Western blotting检测SIRT7、SMAD4、Ac-SMAD4、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和MMP-7蛋白表达。结果SIRT7在HSC3(0.43±0.032)、OECM1(0.27±0.043)、OC3(0.37±0.025)、SCC4(0.31±0.022)、SCC25(0.72±0.063)中的表达均低于HOK细胞的0.97±0.133。OE-SIRT7组细胞划痕愈合率[(13.54±4.35)]%和向下层小室侵袭率[(38.46±7.68)%]明显低于阴性对照组[(49.58±11.26)%、(60.14±15.74)%],而shSIRT7组细胞划痕愈合率[(76.58±17.26)%]和向下层小室侵袭率[(70.42±20.64)%]明显高于阴性对照组(P<0.05)。沉默SIRT7显著降低E-cadherin表达,并上调了Ac-SMAD4、N-cadherin、Vimentin和MMP-7蛋白水平;沉默SMAD4后,SIRT7敲降对Ac-SMAD4表达增加以及EMT相关蛋白分子的影响显著降低。结论SIRT7通过促进SMAD4去乙酰化抑制口腔癌细胞EMT转化,进而抑制口腔癌细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 口腔癌 sirt7 SMAD4 EMT 侵袭 迁移
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沉默SIRT1降低胆管癌细胞对5-氟尿嘧啶的耐药:基于抑制FOXO1/Rab7自噬通路 被引量:3
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作者 辛辰 王笑影 +5 位作者 李响 陈宇 王雪 宁佳曦 杨适 王忠琼 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期454-459,共6页
目的探讨SIRT1靶向FOXO1/Rab7自噬通路调节胆管癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的机制。方法不同浓度(50、100、150、200μg/mL)的5-FU处理HCCC-9810细胞构建HCCC-9810/5-FU耐药细胞模型,免疫荧光检测细胞中SIRT1表达情况,Western blot和q-... 目的探讨SIRT1靶向FOXO1/Rab7自噬通路调节胆管癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的机制。方法不同浓度(50、100、150、200μg/mL)的5-FU处理HCCC-9810细胞构建HCCC-9810/5-FU耐药细胞模型,免疫荧光检测细胞中SIRT1表达情况,Western blot和q-PCR检测SIRT1、FOXO1、Rab7表达水平,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达水平。SIRT1 siRNA和NC siRNA转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞,CCK-8检测细胞耐药性,划痕实验检测细胞迁移能力,RT-qPCR检测FOXO1、Rab7 mRNA水平,Western blot检测SIRT1、FOXO1、Rab7、Beclin1、LC3、p62蛋白表达水平。结果不同浓度(50、100、150、200μg/mL)的5-FU均能抑制HCCC-9810细胞增殖。与对照组相比,HCCC-9810/5-FU耐药细胞中SIRT1荧光强度略有增强;SIRT1、Rab7、p62、FOXO1和Beclin 1蛋白表达上调(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加(P<0.001);SIRT1、Rab7和FOXO1 mRNA水平上调(P<0.05)。沉默SIRT1表达后,HCCC-9810细胞的5-FU耐药性降低,细胞迁移能力降低,SIRT1(P<0.01)、Rab7(P<0.05)、p62(P<0.05)、FOXO1(P<0.01)和Beclin1(P<0.001)蛋白表达降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.001);FOXO1和Rab7 mRNA水平降低(P<0.05)。结论沉默SIRT1的表达抑制FOXO1/Rab7自噬通路激活。 展开更多
关键词 sirt1 FOXO1/Rab7自噬通路 胆管癌细胞 5-氟尿嘧啶 耐药性
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