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甘蓝型油菜S-GT基因克隆、hpRNAi载体构建及遗传转化
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作者 李长春 乔富兴 +2 位作者 严晓锋 丁全如 黄邦全 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第3期290-293,共4页
根据发表的甘蓝型油菜S-GT基因cDNA序列设计引物,以甘蓝型油菜总DNA为模板进行PCR扩增,获得S-GT基因全长.根据获得的基因序列设计引物扩增出S-GT基因序列相同但是带有不同酶切位点的两个片段,将两个片段反向插入到带有本实验所构建的种... 根据发表的甘蓝型油菜S-GT基因cDNA序列设计引物,以甘蓝型油菜总DNA为模板进行PCR扩增,获得S-GT基因全长.根据获得的基因序列设计引物扩增出S-GT基因序列相同但是带有不同酶切位点的两个片段,将两个片段反向插入到带有本实验所构建的种子特异表达载体内含子的两端,成功构建了油菜S-GT基因的种子特异性hpRNAi载体.通过根瘤农杆菌EHA105介导,转化甘蓝型油菜‘hubu 11’的子叶柄,诱导愈伤组织分化出绿芽,进而再生出完整的植株.通过PCR初步鉴定获得了58株转基因阳性植株. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 硫甙 thiohydroximate siglucosyltransferase hpRNAi载体 转基因
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