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慢病毒介导下干涉酪氨酸激酶B表达对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖的影响
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作者 赵庆丽 赵易 +4 位作者 秦芬武 马骥 乔如丽 任晖 蔡黔 《中国医药》 2015年第9期1395-1397,共3页
目的 探讨慢病毒介导下干涉酪氨酸激酶B(TrkB)表达对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响及其作用机制.方法 对MCF-7、BCAP-37、SK-BR-3和MDA-MB231乳腺癌细胞进行筛选,选取TrkB表达水平相对较高的细胞进行慢病毒感染以干涉TrkB表达,构建稳... 目的 探讨慢病毒介导下干涉酪氨酸激酶B(TrkB)表达对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响及其作用机制.方法 对MCF-7、BCAP-37、SK-BR-3和MDA-MB231乳腺癌细胞进行筛选,选取TrkB表达水平相对较高的细胞进行慢病毒感染以干涉TrkB表达,构建稳定干涉TrkB的乳腺癌细胞系Lv-sh-TrkB,通过蛋白质印迹(Western blot)实验检测TrkB干涉效果,同时构建乱序干涉细胞系Lv-scramble.采用噻唑蓝方法、流式细胞仪检测干涉TrkB后细胞的增殖情况以及细胞周期变化.结果 4株乳腺癌细胞中,SK-BR-3细胞TrkB表达水平相对较高,通过慢病毒感染SK-BR-3细胞后筛选稳定干涉TrkB表达的细胞株Lv-sh-TrkB,Western blot实验结果表明,Lv-sh-TrkB细胞中TrkB表达水平明显低于空白对照和Lv-scramble 细胞.细胞增殖检测表明Lv-sh-TrkB细胞增殖速度明显低于空白对照和Lv-scramble细胞;流式细胞仪检测细胞周期结果显示Lv-sh-TrkB细胞发生G1期阻滞,空白对照、Lv-scramble和Lv-sh-TrkB细胞G1期比例分别为61%、62%和78%.结论 干涉TrkB基因后乳腺癌细胞SK-BR-3增殖受到明显抑制,细胞周期发生G1期阻滞. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 酪氨酸激酶B sk-bR-3细胞 细胞增殖 细胞周期
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Tyrolit Hydrostress的SK-B WX电动绳锯
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《建设机械技术与管理》 2005年第7期i007-i007,共1页
Tyrolit Hydrostress的SK-B WX电动绳锯现在也可以当作电动绳锯来使用了。
关键词 Tyrolit Hydrostress公司 sk-b WX型 电动绳锯 技术性能 远程遥控
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Sawada-Kotera方程的Bcklund变换及其精确解 被引量:3
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作者 徐惠益 《苏州大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第1期24-27,共4页
利用Sawada Kotera(SK)方程的B cklund变换,从一个已知解出发并利用积分方法得到方程的一些精确解.
关键词 BACKLUND变换 精确解 积分方法 方程 已知
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白花前胡乙素通过SREBP1c/FASN信号通路抑制卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的作用 被引量:4
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作者 薛乃铭 柴梦钰 +1 位作者 杨万山 周宪春 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期2773-2777,共5页
目的研究白花前胡乙素抑制卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的作用及机制。方法通过CCK-8细胞活力检测法对不同浓度的白花前胡乙素作用24、48 h对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的影响;划痕实验考察20、40、60μmol/L白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3迁移... 目的研究白花前胡乙素抑制卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的作用及机制。方法通过CCK-8细胞活力检测法对不同浓度的白花前胡乙素作用24、48 h对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的影响;划痕实验考察20、40、60μmol/L白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3迁移的影响;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用24 h后,RT-qPCR检测c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1等增殖基因mRNA的表达水平及胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1c、脂肪酸合成酶(FASN)等肿瘤细胞能量代谢关键基因mRNA的表达水平;Western印迹检测SREBP1c、FASN等蛋白的表达水平。结果不同浓度的白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖均具有抑制作用,且随着白花前胡乙素浓度升高,作用时间增长,对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的抑制作用增强;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用后能够抑制卵巢癌细胞SK-OV-3迁移,降低c-Myc、CyclinD1 mRNA基因表达效果,同时使其蛋白表达水平在一定程度上被降低。结论白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖具有抑制作用,其作用机制可能是通过SREBP1c/FASN信号通路调节卵巢癌细胞SK-OV-3能量代谢从而抑制其增殖。 展开更多
关键词 白花前胡乙素 卵巢癌 SK-OV-3 胆固醇调节元件结合蛋白1c 脂肪酸合成酶
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PI3K/AKT信号通路在SK-N-SH细胞中对增殖和分化的影响 被引量:7
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作者 雷璐璐 王珊 +1 位作者 刘苗 冯瑞华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1089-1094,共6页
目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路在人神经母细胞瘤SK-N-SH(human neuroblastoma,SK-N-SH)细胞增殖和分化中的作用。方法:体外培养SK-N-SH细胞,取对数生长期细... 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路在人神经母细胞瘤SK-N-SH(human neuroblastoma,SK-N-SH)细胞增殖和分化中的作用。方法:体外培养SK-N-SH细胞,取对数生长期细胞接种于96孔培养板,将培养板中的细胞分为A组抑制剂LY294002组、B组激动剂类胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)组、C组二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组(LY294002阴性对照组)、D组dd H2O组(IGF-1阴性对照组)和空白组E、F组(培养基组),24 h后A组加入不同浓度的抑制剂LY294002,终浓度为20、40、50、60、100μmol/L,B组换用无血清DMEM继续培养12 h后加入不同浓度激动剂IGF-1,终浓度为25、50、100、150、200 ng/ml,阴性对照组分别加入与LY294002和IGF-1相同浓度的DMSO和dd H2O,空白组为100μl/孔培养基,置于37℃,5%CO2的孵箱中培养,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法检测PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002和激动剂IGF-1对SK-N-SH细胞增殖影响,倒置相差显微镜下观察细胞形态学分化改变,荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测SK-N-SH细胞Trk A m RNA的表达与变化。结果:1MTT检测结果显示,LY294002明显抑制SK-N-SH细胞生长,LY294002组(0.39±0.17)细胞增值能力较阴性对照DMSO组(0.78±0.21)减弱,差异有统计学意义(P=0.018)。IGF-1促进SK-N-SH生长,IGF-1组(0.72±0.14)细胞增值能力较阴性对照组(dd H2O组,0.43±0.08)增值能力更强,差异有统计学意义(P=0.004)。2显微镜下观察LY294002组和IGF-1组细胞无明显分化形态学改变。3FQ-PCR结果显示,LY294002组(0.78±0.05)酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine kinase receptor A,Trk A)信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,m RNA)的表达与阴性对照组(1.56±0.02)、空白组(1.66±0.15)比较,组间差异有统计学意义(F=81.89,P=0.000)。IGF-1组、dd H2O阴性对照组和空白组3组间的Trk A m RNA的表达水平无统计学差异(F=0.27,P=0.770)。结论:PI3K/AKT信号通路可能参与了SK-N-SH增殖和分化过程,该通路关键基因有望成为临床治疗神经母细胞瘤的分子靶点。 展开更多
关键词 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT) 增殖 分化
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The Expression of Endothelin Receptor B in Melanoma Cells A375 and Sk-mel-1 and the Proliferative Effects of Endothelin 3 on A375 Cells 被引量:1
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作者 林能兴 黄长征 +10 位作者 田进 陶娟 张进 杨凌云 李延 刘业强 陈思远 沈关心 李家文 王椿森 涂亚庭 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第5期611-613,共3页
In order to investigate the expression of endothelin receptor B (ETR-B) in human malignant melanoma (MM) cells A375 and SK-mel-1 and the proliferative effects of endothelin 3 (ET3) on A375 cells, RT-PCR was appl... In order to investigate the expression of endothelin receptor B (ETR-B) in human malignant melanoma (MM) cells A375 and SK-mel-1 and the proliferative effects of endothelin 3 (ET3) on A375 cells, RT-PCR was applied to detect the expression of ETR-B gene in human MM cells A375 and SK-mel-1. MTT method was used to evaluate the growth enhancing effects of ET3 on A375 cell line in vitro. The results showed that ETR-B gene was expressed in both MM A375 and SK-mel-1 cells. ET3 had stronger ability to enhance the proliferation of A375 cells in vitro in a concentration-dependent manner. It was suggested that ET3/ETR-B might play an important proliferative role in MM. 展开更多
关键词 MELANOMA endothelin receptor B endothelin 3 A375 SK-mel-1
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火炭母提取物激活NF-κB抑制AMPK通路诱导人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡研究
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作者 罗德平 肖威 +2 位作者 李慧娟 吕根梅 余瑛 《社区医学杂志》 CAS 2024年第16期551-556,共6页
目的研究火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法利用乙酸乙酯萃取火炭母有效成分,用MTT法检测火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,利用蛋白质印迹法检测核... 目的研究火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法利用乙酸乙酯萃取火炭母有效成分,用MTT法检测火炭母提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,利用蛋白质印迹法检测核转录因子κB(NF-κB)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路相关蛋白。结果果火炭母乙酸乙酯提取物能够抑制人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖能力,且抑制率与处理浓度和时间增加而增强,火炭母浓度为10mg/L时,24、48和72h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为3.37%、4.21%及5.51%;火炭母浓度为100mg/L时,24、48和72h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为38.86%、45.86%及54.54%;火炭母浓度为1000mg/L时,24、48和72h卵巢癌细胞抑制增殖率的平均值为65.39%、73.76%及84.97%,差异有统计学意义,均P<0.01。0、10、20、50、100、1000mg/L的火炭母乙酸乙酯提取物作用于人卵巢癌SK-OV-3细胞后24h使用流式细胞术检测细胞凋亡率P值分别为0.977、0.013、0.008、0.003和0.012,显示20mg/L以上的火炭母乙酸乙酯提取物处理导致SK-OV-3细胞凋亡率显著升高。蛋白质印记法实验结果表明,随火炭母乙酸乙酯提取物处理浓度增加,SK-OV-3细胞NF-κBp65蛋白表达水平升高,而AMPK蛋白表达水平下降。结论火炭母乙酸乙酯提取物可能通过激活NF-B通路,抑制AMPK蛋白的表达,诱导人卵巢癌SK-OV-3细胞凋亡。火炭母乙酸乙酯提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞的毒性作用呈明显的剂量依赖性和时间依赖性。 展开更多
关键词 火炭母 核转录因子KB 腺苷酸活化蛋白激酶 细胞凋亡 人卵巢癌SK-OV-3细胞
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葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒作用评价 被引量:5
8
作者 徐炳欣 郑甲信 +3 位作者 赵媛媛 李强 兰丙欣 王艳芝 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期1894-1898,共5页
目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作... 目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作用48 h后,葫芦素B以剂量依赖方式抑制SK-N-SH细胞的生长,0.143和0.716μmol.L-1葫芦素B固体脂质纳米粒对SK-N-SH细胞的抑制率分别为(34.9±4.6)%和(53.6±6.3)%,与对应浓度的葫芦B原料组的(13.2±2.3)%和(43.4±5.5)%相比较有显著性差异(P<0.05)。葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的IC50为0.508μmol.L-1,而葫芦素B原料为12.6μmol.L-1。细胞形态观察结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)组相比较,葫芦素B原料及葫芦素B固体脂质纳米粒组的细胞密度下降,细胞体积缩小,大多数细胞形状发生改变。流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B原料可将SK-N-SH细胞抑制在S期和G2/M期,而葫芦素B固体脂质纳米粒可把SK-N-SH抑制在G2/M期。结论葫芦素B固体脂质纳米粒与葫芦素B原料药既能抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性,且前者毒性更强。 展开更多
关键词 葫芦素B固体脂质纳米粒 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞 细胞毒性
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内皮素受体B在黑素瘤中的表达及内皮素3对黑素瘤细胞A375的体外促生长效应
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作者 黄长征 田进 +10 位作者 林能兴 陶娟 李延 刘业强 杨凌云 张晶 古江增隆 沈关心 李家文 王椿森 涂亚庭 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期419-421,共3页
目的研究内皮素受体B(ETR-B)在人恶性黑素瘤中的表达及内皮素3对黑素瘤细胞A375的体外促生长效应。方法采用免疫组化SP法检测ETR-B在黑素瘤组织中的表达,用RT-PCR法检测ETR-B基因在人恶性黑素瘤细胞A375和SK-mel-1中的表达,用MTT比色法... 目的研究内皮素受体B(ETR-B)在人恶性黑素瘤中的表达及内皮素3对黑素瘤细胞A375的体外促生长效应。方法采用免疫组化SP法检测ETR-B在黑素瘤组织中的表达,用RT-PCR法检测ETR-B基因在人恶性黑素瘤细胞A375和SK-mel-1中的表达,用MTT比色法检测不同浓度内皮素3对黑素瘤细胞A375的体外促增殖活性。结果ETR-B在41例恶性黑素瘤和23例色素痣中的阳性率分别为78.05%和8.69%,两组间差异有统计学意义。P<0.05。15例原位和26例Ⅰ~Ⅳ期恶性黑素瘤ETR-B阳性表达率分别为53.33%和92.31%,两组比较.P<0.05。13例转移性恶性黑素瘤(Ⅲ~Ⅳ期)中ETR-B阳性表达率100%,28例未转移者(0~Ⅱ期)的阳性表达率为67.86%,两组比较,P<0.05。ETR-B基因在人恶性黑素瘤细胞A375和SK-mel-1中均有表达;内皮素3对黑素瘤细胞A375在体外具有很强的促增殖作用,且促增殖能力呈内皮素3浓度依赖性。结论内皮素3/ETR-B在促黑素瘤细胞生长中有重要作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤 受体 内皮素B 内皮缩血管肽3 A375 SK—mel-1
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