shRNA干扰对肺癌细胞内Skp2和p27水平及其生长的影响

目的:探讨干扰肺腺癌SPC-A-1细胞中Skp2(S-phase kinase associated protein,Skp 2)基因的发夹结构RNA(smallhairpin RNA,shRNA)对肺癌细胞Skp2和p27基因表达的影响及对细胞生长的影响。方法:设计、合成特异性的shRNA序列并与pGenesil-1质粒载体连接转染SPC-A-1细胞,经过稳定筛选后的肺癌细胞,通过RT-PCR和Western印迹法分别检测细胞内Skp2、p27 mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞生长情况并绘制生长曲线。结果:在转染干扰RNA后SPC-A-1细胞内的Skp2 mRNA及蛋白表达下降明显,而p27蛋白水平却明显上升,这与抑制了Skp2表达导致p27降解减少有关。生长曲线表明细胞生长受到了抑制。结论:成功构建了针对Skp2基因的shRNA真核表达载体,能有效抑制肺癌细胞生长,并使得Skp2基因表达下降,p27基因的表达增多,为肺癌细胞的基因治疗提供了实验依据。

口腔疣状癌中survivin与BCL-2、Skp2与P27两组蛋白表达特点及相关性研究

目的:研究口腔疣状癌(OVC)组织中survivin(生存蛋白)与BCL-2(B淋巴瘤/白血病-2基因)、Skp2(S期激酶蛋白-2)与P27(激酶抑制蛋白)两组蛋白的表达特点及其相关性。方法:以本院2012-01-2015-01期间收治的34例口腔疣状癌患者作为本次研究资料,全部患者均在本院接受手术治疗。将术中取得的口腔疣状癌组织、癌旁组织,以及2015年1月间在本院因良性病变行病理检查患者的正常口腔黏膜组织作为研究标本,测定3种口腔黏膜组织中survivin、BCL-2、Skp2、P27的蛋白表达水平并进行对比分析,分析不同类型、不同分期的口腔疣状癌组织中4项蛋白表达的差异性,研究survivin与BCL-2、Skp2与P27之间的相关性,并据此研究4项蛋白表达水平对于口腔疣状癌诊断治疗的意义。结果:口腔疣状癌组织中Survivin、BCL-2、Skp2、P27表达阳性率均显著高于癌旁组织与正常组织,P<0.01;经进一步两两对比分析,癌旁组织中4项蛋白表达的阳性率与正常组织无明显差异,P>0.05。Survivin在口腔疣状癌组织中的阳性表达与BCL-2的阳性表达呈显著正相关性,P<0.01,0<r<1;Skp2在口腔疣状癌组织中的阳性表达与P27的阳性表达呈显著负相关性,P<0.01,-1<r<0。不同肿瘤类型、不同分期口腔疣状癌组织中,Survivin、BCL-2、Skp2、P27阳性表达率差异具有统计学差异性,P<0.05。结论:survivin、BCL-2、Skp2、P27在口腔疣状癌中均可见特异性表达,Survivin与BCL-2在口腔疣状癌组织中的阳性表达以及Skp2与P27在OVC癌组织中的阳性表达均具有明确相关性。

基于PCIe2.0协议的PCS层弹性缓冲器设计

弹性缓冲器能够补偿时钟偏差,解决了不同时钟域下的数据传输问题,被广泛应用于高速数据流通信中.结合PCIe 2.0协议,采用常半满方式对弹性缓冲器进行了设计.在读写指针的对比过程中,相对于传统的同步指针的实现方法,采用常半满的检查方式和半满同步方法,简化了逻辑结构.并且在充分考虑协议的基础上,不仅实现了时钟补偿的功能,而且能很好地与接收端的其他模块完成接口对接.经modelsim仿真验证,所设计的缓冲器支持250 MHz的读写时钟频率,输入输出数据为20bit,适用于5G全速率(250 MHz)和2.5G半速率(125 MHz)两种模式.

SKP^2在子宫内膜癌组织中的表达和意义

目的:评价SKP2在子宫内膜癌中的临床意义。方法:采用免疫组化S-P法,检测45例子宫内膜癌中SKP2蛋白的表达情况,分析其和临床各病理指标之间的关系。结果:SKP2在子宫内膜癌中呈高表达,其阳性率为78.4%(34/45),明显高于正常子宫内膜、子宫内膜增生过长(P<0.01);SKP2的表达与组织学分级和淋巴结转移关系密切(P<0.05);与临床分期、肌层浸润深度和年龄均无关(P>0.05)。结论:SKP2在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用,可能与子宫内膜癌的恶化进展有关,有可能成为判断预后的指标之一。

手部烧伤后瘢痕挛缩的发病机制分析

目的：通过对SKP-2及PTEN的免疫组化变化来分析手部烧伤后瘢痕挛缩的发病机制。方法：选择2009年7月-2011年12月因手部烧伤后瘢痕挛缩在我院住院的患者58例（增生性瘢痕41例，瘢痕疙瘩17例）和非挛缩瘢痕皮肤组织患者30例，采用免疫组化检测三组的SKP-2及PTEN表达情况，并且进行相关性分析。结果：瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的SKP-2表达的平均光密度值也明显高于非挛缩瘢痕组织（P〈0．05）。瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的PTEN表达的平均光密度值也明显少于非挛缩瘢痕组织（P〈0．05）。不同组织中SKP-2和PTEN表达呈现负相关。结论：手部烧伤后瘢痕挛缩在临床上比较常见，SKP-2和PTEN蛋白共同参与了瘢痕挛缩发生、发展过程，而且互为影响，从而有可能为瘢痕挛缩的治疗提供新的思路。

Jun活化结构域结合蛋白-1和S期激酶相关蛋白-2在病理性瘢痕组织中的表达及意义

目的研究Jun活化结构域结合蛋白-1（Jun activation domain binding protein-1,JAB-1）和S期激酶相关蛋白-2（S-phase kinase-associated protein-2,SKP-2）在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕组织中的表达及其与肿瘤抑制因子P27^kip1之间的相互关系,探讨它们在病理性瘢痕形成中的作用及机制。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-过氧化物酶（SP）染色法结合计算机病理图像分析,检测瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮肤组织中的JAB-1、SKP-2及肿瘤抑制因子P27^kip1蛋白的表达水平,并进行统计学分析。结果瘢痕疙瘩、增生性瘢痕中JAB-1和SKP-2的表达均较正常皮肤高,而P27^kip1的表达则较正常皮肤低;瘢痕疙瘩与增生性瘢痕之间的各表达指标间比较无明显差异。病理性瘢痕组织中JAB-1和SKP-2的表达均与P27^kip1蛋白表达呈负相关性（分别为r=-0.630,P〈0.01和r=-0.538,P〈0.01）。结论JAB-1和SKP-2在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕组织中的表达异常增高,促使细胞周期负性调控因子P27^kip1蛋白的降解,从而影响创伤的愈合过程,在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕形成中起重要作用。