草鱼钠磷协同转运载体SlC34a2基因的克隆及组织表达分析

为了揭示草鱼对磷的吸收机制,运用RT-PCR和快速扩增c DNA末端方法,从草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠中克隆获得钠磷协同转运载体基因Slc34a2,该基因全长为2446 bp,包含了1938 bp的开放阅读框,47 bp的5′非编码区(Untranslated region,UTR)和461 bp的3′UTR,编码645个氨基酸。草鱼SLC34A2蛋白的分子式为C3215H5125N801O902S30,分子量大小为70.39 k D,等电点为5.68,总平均疏水指数为0.458。对草鱼SLC34A2蛋白结构和功能预测分析,发现SLC34A2蛋白有11个跨膜域,1个半胱氨酸富集区,且N-端在胞外而C-端在胞内,也在第二个细胞外环中发现4个N-糖基化位点。用邻接法构建系统进化树,发现草鱼Slc34a2基因与硬骨鱼类聚类为一支,且草鱼SLC34A2蛋白与鲤(Cyprinus carpio)和斑马鱼(Danio rerio)SLC34A2的相似性最高,分别为90.3%和87.0%。实验采用了实时荧光定量PCR对草鱼Slc34a2 m RNA进行组织表达分析,结果表明Slc34a2 m RNA在组织中广谱表达,且在肠中表达最高,其次是肝脏、鳃、肾脏、脾脏、皮肤、肌肉、脑和头肾。实验为以后研究提高鱼对磷的利用和减少磷的排放奠定分子基础。

肺泡微石症1例

目的报道1例北京协和医院诊治的肺泡微石症(PAM)病例,并总结该病的临床表现和遗传学特点。方法报道本例的临床表现、影像学表现以及SLC34A2基因扩增及测序结果分析突变类型。结果患者为35岁男性,以咳嗽、咳痰起病,逐渐气短,胸部CT、支气管肺泡灌洗液及肺病变组织病理均符合肺泡微石症病理表现,基因检测发现SLC34A2基因第8外显子纯合子突变(c.A910T)。结论肺泡微石症是一种罕见的遗传性疾病,临床表现不特异,但有着典型的影像学表现。外显子8的c.910A>T(Lys304Ter)突变在亚洲人群中最为常见,可能为我们日后的基因筛查或基因治疗提供了潜在的靶点。

肺泡微石症1例并文献复习

目的总结1例诊断和治疗肺泡微石症的临床过程,提高对该疾病的认识。方法分析我院1例肺泡微石症的临床资料,并文献复习。结果患者以咳嗽及气喘起病,并逐渐加重,入院时已出现肺动脉高压及右心功能不全表现,肺部CT表现为双肺弥漫性密度增高的间质性改变,以中下肺野和近胸膜下较为密集,呈典型的"火焰征",通过外送基因检测发现SLC34A2基因中第8个外显子有纯合子突变(c.A910T),因此临床诊断为肺泡微石症。入院后予吸氧、抗感染、平喘、利尿及降低肺动脉压等对症治疗,患者症状可减轻。结论肺泡微石症临床表现无特异性,影像学表现较典型,若发展至晚期,可通过SLC34A2基因检测协助临床诊断。

肺泡微结石症1例家系基因分析

肺泡微结石症(PAM)是一种罕见的肺部疾病,以磷酸钙盐颗粒在双肺肺泡内沉积为特征。目前研究发现PAM有家族遗传倾向,多呈常染色体隐性遗传方式发病,其中以磷酸钠协同转运蛋白抗原(SLC34A2)基因突变为主,但文献报道的基因突变位点各国略有不同,为进一步探讨中国PAM患者基因突变情况,本研究收集了1例PAM患者的临床资料及家系成员的外周血,应用聚合酶链式反应结合DNA测序法对家系成员进行SLC34A2基因突变检测,结果发现患者与父亲有SLC34A2基因外显子8突变,即c.910A>T(p.K304X);患者与母亲有SNP位点2个突变即外显子13的3′-UTR区和内含子12 c.1363T>C(p.Y455H)同时出现突变。SNP的两个位点同时突变属于新的突变类型,目前文献中尚未报道。中国PAM患者突变位点更倾向于外显子8,是否存在SLC34A2复合杂合突变致病的可能有待进一步研究。

肺泡微石症1例

肺泡微石症(PAM)是一种原因不明的、罕见的、以肺泡内有大量钙盐沉积的微小结石及继发弥漫间质纤维化为特征的慢性肺部疾病。磷酸钠共转运蛋白Npt2b的SLC34A2基因突变是PAM主要的发病机制,中国患者最常见的是第8外显子发生突变。该病报道不多,现将贵州省诊断的1例PAM报道如下,以丰富该疾病的临床信息及诊治思路。

一个肺泡微结石症家系中SLC34A2基因的新突变

目的研究中国一个肺泡微结石症（pulmonary alveolar microlithiasis，PAM）家系溶质转运蛋白家族34成员2（solute carrier family 34 member2，SLC34A2）基因突变情况。方法抽提家系成员外周血基因组DNA，针对SLC34A2基因以聚合酶链反应一单链构象多态性方法筛选出突变片段，进行测序分析。并在100名正常对照中筛查所发现的突变片段。结果该家系2例患者在SLC34A2基因第8外显子均出现纯合突变（c．A910T），从而提前出现终止密码子。此外在2例患者及先证者女儿的第2内含子发现一纯合性单核苷酸多态。结论本家系中患者SLC34A2基因第8外显子出现新的纯合突变，提前出现终止密码子，编码截短蛋白，导致发病。所发现的第2内含子多态性意义有待深入研究。

肺泡微石症患者1例基因测序及文献复习

目的通过对1例肺泡微石症（PAM）患者的诊断，并对其SLC34A2基因测序分析，查找可能导致陔病发生的基因突变序列，斤查阅相关文献进行复习。方法患者男性，其父母为近亲结婚，慢性病程．绎临床、影像学检佥疑诊PAM，经支气管镜肺活检病理确诊。提取外周血作基凶检测，对基因SLC34A2外显子进行扩增、测序和分析。结果成功扩增2～13号外显子，DNA测序结果显示2个纯合子突变SNP：内含子2中纯合突变rs4697597和外显子8纯合突变（c．A910T）。rs4697597功能分析未发现与SLC34A2的转录和翻译相关。外显子8纯合突变导致转录赖氨酸的密码子AAA突变为终止密码子TAA，可能导致SLC34A2功能缺失。结论该患者为近亲结婚后裔，位于外显子8的SNP纯合突变可能是致使患者发生PAM的变异位点。

家族性肺泡微石症2例并文献复习

目的探讨肺泡微石症（pulmonaryalveolarmicrolithiasis，PAM）的病因、流行病学及临床特点，以提高对该病的临床认识。方法对2例家族型肺泡微石症患者进行病例报道和文献复习。结果PAM是一种具有家族聚集倾向的常染色体隐性遗传疾病，临床症状轻微，影像学改变较明显，表现为两肺弥漫性小结节影，以中下肺为主，病理表现为肺泡腔内不规则同心分布的钙盐沉着，无有效治疗手段，主要是以对症治疗为主，终末期可进行肺移植。结论PAM是一种临床症状与影像学表现不相称的呼吸系统疾病，容易被误诊为肺结核，诊断不明时，可行病理检查进一步确定诊断。