突变KRAS的互作化学分子研究

利用互作蛋白质组化学技术发现G12D突变型KRAS相互作用化学分子。建立融合蛋白质表达量相同的BioID-G12D-KRAS与BioID-WTKRAS细胞,通过LC-MS/MS检测生物素化肽段,定量分析蛋白质组学数据,预测野生型KRAS和G12D突变型KRAS的潜在结合分子。最终成功培养BioID-G12D-KRAS和BioID-WT-KRAS表达含量相同的SW48细胞;定量质谱识别BioID-WT-KRAS组中有88个生物素化蛋白质,BioID-G12DKRAS组中有90个生物素化蛋白质;发现AHNAK2与野生型KRAS更稳定结合,SLC5A3与G12D突变型KRAS优势结合。