通过Dn-5、SlgA研究大柴胡汤恢复重症胰腺炎肠黏膜屏障的作用

目的通过测定模型大鼠肠黏膜Dn-5、SlgA的含量,来研究大柴胡汤恢复重症胰腺炎肠黏膜屏障的作用。方法将健康SD大鼠100只随机分为5组,测定肠黏膜Dn-5、SlgA含量。结果高、中、低剂量组肠黏膜Dn-5m RNA的表达高于模型组;高、中剂量组肠黏膜SlgA含量高于模型组,低剂量组肠黏膜SlgA含量与模型组相仿。结论大柴胡汤可以增强肠道黏膜的防御作用,从而起到恢复肠黏膜屏障的作用。

乳酸杆菌和低聚异麦芽糖对抗生素相关腹泻大鼠肠粘膜SlgA的影响

目的:研究抗生素相关腹泻(Antibiotic-associateddiarrhea,AAD)大鼠肠粘膜分泌型免疫球蛋白A (SIgA)的含量变化,探讨乳酸杆菌和低聚异麦芽糖复合配方(合生元)对肠粘膜SIgA水平的调节作用。方法: 以盐酸林可霉素复制AAD模型,治疗组采用不同剂量的合生元灌胃。分别在实验第6d、第9d、第13d进行肠 道菌群分析和肠粘膜SIgA水平检测(放射免疫分析)。结果:AAD大鼠肠道菌群失调,肠粘膜组织中SIgA水 平下降;不同剂量的合生元均能调节肠道菌群失调、促进肠粘膜SIgA水平的分泌。结论:乳酸杆菌和低聚异麦 芽糖组成的合生元配方可提高AAD大鼠肠粘膜SIgA的分泌,提高肠道相关淋巴组织免疫功能,对AAD肠粘 膜免疫屏障具有保护作用。

应用间接ELISA试验检测副结核病肠道分泌物中特异性SlgA抗体的研究

本试验建立了一种新的较为敏感的间接 ELISA 检测方法,对203头份疫区牛肠管分泌物进行了 ELISA 检测,并按病理学分期进行了配对比较。结果表明,ELISA 的阳性检出率为74.1%(20/27),非特异性低至1.73%(3/175);ELISA 对进行期病变牛的检出率为100%,而对静止期病变牛的检出率为63.64%。本试验又与细菌分离培养及病理组织学检查进行比较。两者的总符合率达94.58%。可作为副结核病的辅助诊断手段,并可为进行肠道局部免疫的研究提供可靠的理论依据。

发酵饲料对育肥湖羊生长性能、肠道形态及肠黏膜SIgA含量的影响

试验旨在研究发酵饲料对育肥湖羊生长性能、肠道形态及肠黏膜SIgA含量的影响。随机选择70只健康、体重为(30.86±4.50)kg的6月龄育肥湖羊,分为5组,每组14只。发酵饲料的添加量分别为0(对照组)、2.0%、4.0%、6.0%、8.0%,预试期14 d,正试期45 d,试验结束后5组各随机屠宰3只羊取样。结果:(1)与对照组相比,添加6%发酵饲料的平均日增重(ADG)增加50%,差异显著(P<0.05);2%组、6%组料重比(F/G)分别降低25.69%、40.63%;添加发酵饲料处理组的终末体重(final weight)、平均日采食量(ADFI)均无显著差异(P>0.05)。(2)与对照组相比,添加2%、6%发酵饲料各处理组的十二指肠、空肠、回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(V/C)比值均显著升高,隐窝深度均显著降低,差异极显著(P<0.01),随着绒毛高度和V/C比值的增加,隐窝深度也随之降低。其中,添加6%的发酵饲料均显著提高十二指肠、空肠和回肠黏膜分泌型免疫球蛋白(SIgA)的含量,且分别提高了27.46%、33.50%、34.33%,差异极显著(P<0.01)。结论:结果显示添加6%的发酵饲料可以改善育肥湖羊的肠道形态发育,促进肠道分泌大量的SIgA,增强肠道黏膜屏障功能,从而提高湖羊的生长性能,进一步实现与抗生素相当的成效。

sIgA水平对白念珠菌粘附阴道上皮细胞的影响

目的探讨sIgA在念珠菌性阴道炎(CV)发病中的作用。方法采用放射免疫法测定CV组、健康组及带菌组阴道分泌物中sIgA含量,用体外粘附方法测定白念珠菌对阴道上皮细胞(VEC)的粘附能力,观察sIgA水平时白念珠菌粘附VEC的影响。结果CV组sIgA水平明显低于健康组和带菌组(P<0.01);CV组白念珠菌在含sIgA阴道分泌物中粘附能力高于健康组和带菌组(P<0.05);白念珠菌在不含sIgA阴道分泌物中粘附能力各组间差异无显著性意义(P>0.05);白念珠菌临床株和标准株间差异无显著性意义(P>0.05)。结论sIgA对白念珠菌粘附VEC有抑制作用,sIgA水平的降低是CV发病的原因之一,与白念珠菌来源无关。

支气管肺灌洗液中sIgA和CA_(50)检测诊断外周型肺癌的意义

本文通过检测25例外周型肺癌病人血及支气管肺灌洗液(BALF)中sIgA和CA_(50),探讨其对外周型肺癌的诊断价值。1 材料和方法1.1 病例选择肺癌组为病理证实的原发性支气管肺癌共25例,X线表现均属外周型,男20例,女5例,平均年龄54.3岁(24岁～71岁),其中鳞癌10例,腺癌11例,未分化癌2例,未定型2例。良性肺病组包括肺炎、肺结核等共20例,男18例,女2例,平均年龄50.1岁(20岁～69岁)。1.2 检查方法 Olympus BF纤支镜,内径5.5mm。检查时纤支镜远端楔于肿瘤及病变所在病灶段级支气管开口,对照组选健侧中叶(B_4、B_5)或舌叶支气管开口,经活检孔注入2％利多卡因 1～2ml后,快速注入50ml 37℃生理盐水,在 13.3～20kPa(100～150mmHg)负压下吸引回收液,共2次总量为100ml,回收液过滤后装入塑料试管中。2 结果表1中BALF中CA_(50)和sIgA均为相对量(如:CA_(50)ug/ml/白蛋白 ug/ml、sIgAug/ml/白蛋白 ug/ml),白蛋白作为标准参考物。25例肺癌及20例良性肺病患者血及病侧BA LF中CA_(50)、sIgA联合检测诊断肺癌见表2。

高血糖素样肽2对大鼠严重脑外伤后肠道免疫功能的影响

目的:了解高血糖素样肽2对大鼠严重脑外伤后胆汁中分泌型IgA、肠黏膜蛋白质和DNA含量、门静脉血内毒素含量的影响。方法:实验于2003-07/2005-07在上海交通大学医学院附属第三人民医院神经外科实验室完成。①分组:健康雄性SD大鼠18只,随机(随机数字法)分为对照组、损伤组和高血糖素样肽2组,每组6只。②模型制备:戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔注射麻醉后,在大鼠右侧颅顶部用牙科钻钻开一直径为5mm的骨窗,注意保持硬膜完整,参考袁氏自由落体脑挫裂伤模型造成右顶叶较为一致的脑挫裂伤,冲击力为100g×15cm。对照组只行开颅,不进行打击。③高血糖素样肽2组大鼠在脑挫裂伤后腹腔注射高血糖素样肽2,按每天15g/kg的剂量分两次腹腔注射,间隔10～12h,连续注射7d。损伤组相同时间点腹腔注射相同剂量生理盐水。④连续注射7d后收集各组大鼠胆汁测定分泌型IgA、采集门静脉血测定血内毒素及制备小肠黏膜标本测定小肠黏膜蛋白质和DNA含量。结果:18只大鼠均进入结果分析。①损伤组胆汁中sIgA水平[(97.0±8.5)mg/L]仅为对照组[(119.7±10.8)mg/L]的81%左右(P<0.05),高血糖素样肽2组[(114.3±10.9)mg/L]与对照组接近(P>0.05)。②高血糖素样肽2组小肠黏膜蛋白质和DNA含量高于损伤组[蛋白质:(2.3±0.1),(2.1±0.1)mg/cm;DNA:(154.3±13.8),(143.4±10.1)mg/L,P均<0.05],与对照组[(2.4±0.1)mg/cm,(163.8±14.9)mg/L]接近。③高血糖素样肽2组门静脉血内毒素含量低于损伤组[(82.8±6.3),(90.1±7.8)Eu/L,P<0.05],与对照组[(78.9±5.4)Eu/L]接近。结论:高血糖素样肽2能够改善严重脑外伤后肠道免疫功能,从而减轻内毒血症。

仔猪断奶前后肠道形态和相关免疫蛋白基因表达的变化

为了研究仔猪出生至断奶后肠道形态和相关免疫蛋白基因表达的变化,本试验于仔猪出生7、14和21 d以及断奶后14 d（出生35 d）分别从6窝中每窝挑选1头健康仔猪（共24头）屠宰获得十二指肠和空肠组织。利用苏木精-伊红染色检测小肠形态和淋巴细胞、杯状细胞计数,酶联免疫吸附法（ ELISA）测定空肠组织中的分泌型免疫球蛋白A（ sIgA）浓度,实时荧光定量PCR检测空肠组织中防御素基因的表达水平。结果表明：仔猪出生7~21 d,出生14和21 d的十二指肠和空肠的绒毛高度显著低于出生7 d（P〈0.05）,同时十二指肠的隐窝深度随着日龄的增加有逐渐降低的趋势,但肠上皮杯状细胞和淋巴细胞数目无显著变化（P〉0.05）；断奶后14 d空肠绒毛高度较出生7 d显著降低（P〈0.05）,隐窝增生明显,隐窝深度较出生7~21 d显著增加（P〈0.05）,同时十二指肠和空肠上皮淋巴细胞数目均显著增多（P〈0.05）。另外,较出生21 d,断奶后仔猪空肠分泌更多的sIgA（P=0.001）和表达更多的防御素基因（P〈0.05）以保护肠黏膜。由此可知,断奶前,仔猪健康状况下肠道屏障完整,sIgA和防御素表达的水平相对较低,断奶破坏了肠道完整性,使得肠道绒毛萎缩,隐窝增生,肠道上皮屏障受到损伤,大量的淋巴细胞趋化至肠道上皮,同时断奶时微生物入侵刺激了肠上皮免疫球蛋白和防御素的分泌。

尿感方对小鼠抗炎与免疫调节作用及对大鼠黏膜免疫的影响

目的研究尿感方对小鼠的抗炎与免疫调节作用以及对大鼠的黏膜免疫作用。方法酶标法测定尿感方对二甲苯致炎小鼠血清前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)、一氧化氮(NO)含量的影响;观察尿感方各剂量组对免疫低下小鼠免疫脏器指数的影响;酶标法测尿感方对大鼠尿液分泌型免疫球蛋白(sIgA)含量的影响;Real-time PCR法测定尿感方对大鼠膀胱组织分泌片段(SC)基因表达的影响。结果与空白模型组比较,尿感方能增加致炎小鼠血清SOD含量,降低血清MAD含量(P<0.05),并能增加大鼠尿液中sIgA含量(P<0.05),增加大鼠膀胱组织中SC基因的表达(P<0.05);与空白模型组比较,尿感方能增加免疫低下小鼠的脾脏指数与胸腺指数(P<0.05)。结论尿感方能调节模型小鼠血清中炎症因子水平并发挥抗炎作用,且有一定的免疫调节作用;能增加大鼠尿液中sIgA含量,以及膀胱组织中SC基因的表达,增强尿道防御外来致病菌侵袭的能力。

rChIFN-γ对E-tenella卵囊免疫雏鸡肠道分泌型IgA^＋细胞数量的影响

本研究初步探讨了重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ)对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊免疫接种鸡肠道粘膜sIgA+细胞数量的影响。分别给7和14日龄雏鸡予以E.tenella孢子化卵囊免疫接种并同时肌注5000u rChIFN-γ后,于21日龄用同源E.tenella攻虫。免疫组化检测结果表明rChIFN-γ加强免疫组在21日龄时十二指肠、空肠、盲肠和回肠的绒毛sIgA+细胞数量均高于免疫对照组,在28日龄时,均呈现显著性差异(α=0.05)。结果表明rChIFN-γ可提高球虫卵囊免疫雏鸡肠道内的sIgA+细胞数量,增强粘膜免疫水平,具有明显的抗球虫免疫增强效果。

IL-2对免疫新城疫疫苗的固始鸡十二指肠(SIgA)分泌的增强作用

研究了白细胞介素-2（IL-2）作为黏膜免疫佐剂对免疫新城疫疫苗的固始鸡十二指肠分泌型免疫球蛋白A（SIgA）分泌的增强作用。将不同浓度的IL-2联合新城疫Ⅳ系弱毒苗经口腔注入8日龄固始鸡，用免疫组织化学技术来检测十二指肠中SIgA阳性细胞及SIgA阳性分泌物的分布和含量。结果表明：①SIgA阳性细胞主要分布于十二指肠肠黏膜固有层及肠腺腔中。②添加IL-2的3个试验组SIgA阳性细胞及SIgA阳性分泌物的含量高于空白对照组和新城疫组。免疫后1—2周，第Ⅳ组SIgA阳性细胞及阳性分泌物的含量最高，与其他组差异不显著。免疫后3—5周，第Ⅲ组SIgA阳性细胞及阳性分泌物的量最高，与其他组差异显著。结论：由结果可知IL-2能增加浆细胞分泌SIgA；延长新城疫疫苗的免疫时间，增强免疫效果，是很好的黏膜免疫佐剂；IL-2的最佳添加剂量免疫后1～2周为50ug／羽，免疫后3～5周为10ug／羽。

谷氨酰胺对正加速度暴露后大鼠肠道屏障损伤的修复作用

目的观察正加速度(+Gz)暴露对大鼠肠黏膜机械屏障及免疫屏障的损伤,探讨谷氨酰胺(Glutamine,Gln)对损伤的修复作用。方法 24只雄性SD大鼠随机分成3组,每组8只,分别标记为A组(对照组)、B组(+10 Gz组)、C组(+10 Gz+Gln组)。采用动物离心机模拟+Gz暴露,B组大鼠以+10Gz值旋转5 min,每日暴露1次,持续5 d,C组训练方法同B组,训练前灌服用生理盐水配置的Gln溶液。实验结束后次日麻醉大鼠,取大鼠肠黏膜标本及外周血清,镜下观察大鼠肠道组织形态特点,并检测各组大鼠血清D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平以及用酶联免疫吸附测定肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(s Ig A)含量。结果 A组大鼠小肠组织无明显损伤;B组+Gz暴露后的小肠组织损伤最严重;C组小肠组织损伤程度不及B组。与A组相比,B组大鼠血清D-乳酸、DAO水平明显升高(P<0.01),s Ig A水平明显降低(P<0.01);C组大鼠血清D-乳酸、DAO水平高于A组(P<0.05),但s Ig A水平与A组相比差异无统计学意义。B组大鼠血清D-乳酸、DAO水平高于C组(P<0.05),s Ig A水平明显低于C组(P<0.01)。结论 +Gz暴露可增加大鼠肠道黏膜通透性,破坏大鼠肠道屏障。加速度暴露过程中补充Gln,对屏障损伤有较好的修复作用。

刚地弓形虫STAg鼻内免疫小鼠诱导小肠IgA分泌细胞数量及sIgA水平动态变化

目的动态观察刚地弓形虫（简称弓形虫）可溶性速殖子抗原（STAg）鼻内免疫小鼠对小肠IgA分泌细胞（IgASCs）数量和分泌型IgA（sIgA）水平的影响。方法 5～6周龄BALB/c小鼠96只,随机均分为免疫组和对照组。免疫组小鼠用STAg（20μg/只,悬于20μl PBS）滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等量PBS代替。末次免疫后1周,灌胃感染RH株弓形虫速殖子（1×10~4个/只,溶于0.5 ml PBS）,记录小鼠健康状况及体重。于感染后6、7、8、9、10和1 1 d随机处死每组小鼠各8只,免疫组化检测小鼠的十二指肠、空肠和回肠黏膜IgASCs数量,ELISA测定小肠冲洗液sIgA水平。结果感染后所有小鼠均发病,但免疫组症状较轻,体重增加幅度明显高于对照组（P〈0.05）,感染后第7天对照组小鼠死亡2只。两组小鼠小肠冲洗液sIgA水平均呈升高趋势,但免疫组高于对照组（P〈0.05）。十二指肠IgASCs数量,对照组的略有增加,而免疫组持续升高至9 d后维持较高水平为20.65±1.67,对照组为12.30±2.67,对照组和免疫组十二指肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=0.378（P〈0.05）和r=0.566（P〈0.05）。空肠IgASCs数量,对照组的呈下降趋势,免疫组的持续升高至9 d后略下降。对照组和免疫组空肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.557（P〈0.05）和r=0.218（P〉0.05）。对照组回肠IgASCs数量持续下降,免疫组的始终保持较高水平,对照组和免疫组回肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.685（P〈0.05）和r=-0.053（P〈0.05）。结论 STAg鼻内免疫能使经口感染弓形虫小鼠空肠和回肠IgASCs数量增加,小肠黏膜免疫屏障功能增强。

加味升降散对过敏性哮喘豚鼠黏膜sIgA免疫影响的实验研究

目的探讨加味升降散对过敏性哮喘豚鼠黏膜sIgA免疫功能的影响。方法健康豚鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、加味升降散组。以卵白蛋白致敏激发豚鼠制作过敏性哮喘模型,正常组、模型组以生理盐水灌胃,其余两组分别给予相应的药物干预。采用ELISA法检测BALF中sIgA含量。结果模型组豚鼠BALF中sIgA水平较正常组显著增高;与模型组比较,加味升降散组和地塞米松组BALF中sIgA水平显著下降。结论sIgA可通过介导嗜酸粒细胞激活和脱颗粒参与过敏性哮喘的病理过程。加味升降散对哮喘豚鼠肺内黏膜sIgA高免疫状态有下调作用,可能是其治疗过敏性哮喘的免疫机制之一。

磁疗配合超短波治疗小儿反复呼吸道感染的疗效

目的探讨磁疗配合超短波治疗小儿反复呼吸道感染的临床疗效和对小儿唾液sIgA水平的影响。方法将在我院进行治疗的反复呼吸道感染的患儿80例随机分为实验组40例与对照组40例,实验组进行磁贴配合超短波治疗,对照组仅使用磁疗进行治疗。观察比较治疗前后患者临床症状(乏力倦怠、面色苍白、多汗、遗尿或尿频等)的缓解情况并检测患者唾液sIgA水平,并对全部患儿随访一年。结果实验组临床症状缓解程度比对照组明显(p<0.05),实验组唾液sIgA水平比对照组高(p<0.05)。结论磁贴配合超短波治疗小儿反复呼吸道感染对患儿临床症状改善及提高唾液sIgA水平有明显效果,是治疗小儿反复呼吸道感染的有效治疗方法,值得临床推广应用。

分泌型IgA联合加味玉屏风散治疗急性小儿上呼吸道感染的疗效评价

目的探讨分泌型Ig A（sIgA）联合加味玉屏风散治疗急性小儿上呼吸道感染的疗效。方法选择浙江省杭州市杭区第一人民医院上呼吸道感染的住院患儿160例,随机分为治疗组和对照组各80例,2组患儿均给予常规的对症及补液治疗,对照组给予中药加味玉屏风散,2次/天,每次3 g,口服;治疗组在此基础上,予分泌型Ig A滴鼻,0.3-0.5 mg/（kg·d）,分6-8次。2组疗程均为7 d。观察2组治疗1个疗程后的总有效率,2组患儿的症状改善时间和2组不良反应的发生率。结果治疗组总有效率（96.25%）显著高于对照组（85.00%）（χ^2=5.96,P〈0.05）;治疗7 d后,治疗组的WBC和中性粒细胞百分率（neutrophil granulocyte ratio,NEUT%）较对照明显下降（P〈0.05）;治疗组中患儿发热、咳嗽咳痰、咽痛及鼻塞流涕症状缓解时间显著少于对照组（P均〈0.05）;2组的不良反应率均较低。结论分泌型Ig A联合加味玉屏风散治疗小儿上呼吸道感染疗效确切,不良反应少。

小肠RNA对受^(60)Co γ射线照射后小鼠肠粘膜屏障的保护作用

以BALB/c小鼠为研究对象,用60Coγ射线进行11.5Gy的腹部一次照射,照后1—3h采用局部肠腔扩张注入法给小鼠空肠肠腔内注入正常大鼠小肠核糖核酸(Ribonucleicacid,RNA),照后1、3、5d取全小肠,制备肠粘液,测定免疫球蛋白分泌型免疫球蛋白A(SecretedimmunoglobulinA,sIgA)含量;取空肠段,观察肠绒毛形态变化;取血,测定内毒素含量;取肠系膜淋巴结,测定细菌移位率。探讨小肠RNA对γ射线照射后小鼠肠粘膜屏障的保护作用。结果表明,小肠RNA可明显提高受照后小鼠肠粘液中免疫球蛋白sIgA的含量(p<0.01),减轻肠绒毛的萎缩及塌陷,改善肠粘膜形态结构,降低肠系膜淋巴结细菌移位率和血中内毒素含量。以上结果显示,小肠RNA对γ线照射后的小鼠肠粘膜屏障有明显的保护作用,能抑制肠道细菌移位和肠内内毒素的吸收。