重组抗人CD22嵌合抗体SM03的^(125)I标记及生物活性

为了探讨125I标记的重组抗人CD22嵌合抗体SM03的生物活性,采用Iodogen法进行单克隆抗体SM03的125I标记,Sephacryl S-300 HR色谱柱分离标记混合物,测定分离后样品的纯度与浓度。采用竞争结合法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定纯化后样品的活性。抗体经过放射性标记后,放化纯度>99%,回收率>47%1。25I-SM03的生物活性与未标记抗体差异没有显著性,P=0.907。用125I-SM03筛选CD22抗原表达量最多的细胞,在Raji、Daudi和Ramos细胞中,SM03与Ramos细胞的特异性结合量最多,每个细胞的结合量为1.3 pmol。以上结果表明,Indogen法可以用于单克隆抗体SM03的标记,标记后不影响SM03的生物活性。

抗CD22单抗血药浓度的ELISA法的建立

目的:进行重组人CD22单抗(SM03)临床药动学研究,建立血药浓度测定的酶联免疫分析(ELISA)方法。方法:构建并表达SM03抗独特型抗体(LRID03)和CD22抗原,分别建立夹心ELISA(S-ELISA)和竞争ELISA(C-ELISA)分析法,并对2种方法测定血药浓度的适用性进行比较和验证。结果:S-ELISA和C-ELISA都具有良好特异性、准确度和精密度。结论:S-ELISA方法的灵敏度更高并且干扰因素少,因而更适于临床药动学研究。