MiR-206、TGF-β1和Smad3在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织微小RNA-206(miR-206)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Sma和Mad相关蛋白3(Smad3)的表达情况及临床意义。方法选取2020年6月至2023年1月于河北中石油中心医院就诊的60例妊娠期高血压患者(妊娠期高血压组)、60例子痫前期患者(子痫前期组)、60例妊娠晚期健康孕妇(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-206、TGF-β1和Smad3的mRNA水平,采用免疫组化法检测胎盘组织中TGF-β1和Smad3蛋白表达;采用Pearson相关分析妊娠期高血压疾病患者胎盘组织miR-206、TGF-β1 mRNA和Smad3 mRNA水平与临床资料的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析产后胎盘组织miR-206、TGF-β1 mRNA和Smad3 mRNA水平对妊娠期高血压疾病孕妇病情的评估价值。结果对照组、妊娠期高血压组、子痫前期组的舒张压、收缩压、24h尿蛋白、TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1蛋白表达阳性率、Smad3蛋白表达阳性率均依次升高,清蛋白、新生儿体重、胎盘重量、miR-206均依次降低,差异有统计学意义(F/χ^(2)值介于39.400~834.610之间,P<0.05);妊娠期高血压疾病患者胎盘组织miR-206与收缩压、舒张压、24h尿蛋白负相关,与清蛋白、新生儿体重、胎盘重量正相关(r值介于-0.514~0.507之间,P<0.05);TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA与清蛋白、新生儿体重、胎盘重量负相关,与收缩压、舒张压、24 h尿蛋白正相关(r值介于-0.512~0.519之间,P<0.05);胎盘组织miR-206、TGF-β1 mRNA和Smad3 mRNA水平单独及联合评估妊娠期高血压疾病孕妇病情的曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.840、0.837、0.951。结论miR-206在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中低表达,TGF-β1和Smad3高表达,三者可能共同参与了妊娠期高血压疾病进展。

慢性胰腺炎模型大鼠转化生长因子β1/Smads通路被秋水仙碱的抑制

背景:胰腺星状细胞内转化生长因子β1/Smads信号通路活化可能是导致胰腺组织纤维化的主要分子学机制。如能阻断这一通路,就可能抑制慢性胰腺炎组织的纤维化进程。目的:探讨秋水仙碱对慢性胰腺炎模型大鼠转化生长因子β1/Smads通路的抑制作用。方法:健康雄性SD大鼠随机分为慢性胰腺炎组及秋水仙碱干预组,慢性胰腺炎造模成功后,秋水仙碱干预组大鼠每日腹腔内注射秋水仙碱150μg/kg,慢性胰腺炎组则每日腹腔内注射等体积的生理盐水。3个月后取胰腺组织,苏木精-伊红染色观察胰腺组织的病理学改变,免疫组化观察胰腺组织转化生长因子β1表达,Western blot法测定胰腺星形细胞内P-Smad2、P-Smad3、α-SMA蛋白表达水平。结果与结论:苏木精-伊红染色结果显示:与秋水仙碱干预组相比,慢性胰腺炎组胰腺组织内腺体组织减少,而纤维结缔组织、炎细胞明显增多并取代胰腺腺体组织。免疫组化结果显示:秋水仙碱干预组胰腺组织内转化生长因子β1阳性表达级别和阳性细胞指数显著低于慢性胰腺炎组(P<0.05)。Western blot结果显示:慢性胰腺炎组胰腺星形细胞内P-Smad2/β-actin、P-Smad3/β-actin、α-SMA/β-actin表达明显低于秋水仙碱干预组(P<0.05)。结果提示秋水仙碱可以抑制慢性胰腺炎大鼠转化生长因子β1/Smads信号通路及胰腺组织纤维化。因此,秋水仙碱可作为治疗慢性胰腺炎纤维化的一种新的候选方案。

补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织病理学以及α-SMA蛋白表达的影响

目的观察补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织病理学的影响。方法 SD大鼠随机分为空白对照组8只、模型组15只、秋水仙碱组15只、补肾柔肝方组15只。均以标准鼠食饲养,自由饮水,除空白对照组外,其余各组大鼠采用CCl4造模8周制备肝纤维化模型。从第9周开始,秋水仙碱组、补肾柔肝方组灌胃相应药物,空白对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,均连续灌胃8周。末次给药后2 h,取肝组织进行HE、天狼猩红染色,评价肝细胞变性与胶原纤维增生程度。分别采用RT-PCR法和蛋白印迹法检测肝组织α-SMA表达情况。结果补肾柔肝方组大鼠肝脏的纤维化程度明显低于模型组;与空白对照组相比,模型组大鼠的α-SMA蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,秋水仙碱组及补肾柔肝方组α-SMA蛋白表达水平有所降低(P均<0.05)。结论补肾柔肝方能够降低大鼠肝脏内α-SMA蛋白的表达水平,具有明确的抗肝纤维化作用。

胃肠道间质瘤CD117、CD34、SMA、S-100蛋白、Vim、结蛋白的表达及临床意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GISTs)的临床病理诊断,以及CD117、CD34、SMA、S-100蛋白、波形纤维蛋白(Vim)、结蛋白表达的临床意义。方法回顾分析了35例手术后经病理确诊的GISTs临床资料及辅助检查结果,免疫组化检测肿瘤组织CD117、CD34、SMA、S-100蛋白、Vim、结蛋白等抗原标志物的表达,分析对GISTs的诊断意义。结果35例GISTs发生于胃11例、小肠11例、腹腔5例。主要临床表现有腹胀、腹痛、消化道出血、腹部肿块。肿瘤组织中CD117、CD34的阳性表达率分别为94.3%和91.4%,显著高于SMA、S-100蛋白、Vim、结蛋白的表达(P<0.001),也显著高于在平滑肌瘤中的表达(P<0.0001);GISTs中结蛋白的阳性表达率2.9%,显著低于CD117和CD34(P<0.05);也显著低于在平滑肌瘤中的表达(P<0.001)。结论GISTs多发生于胃和小肠,胃肠镜、超声内镜和CT检查对间质瘤有较大诊断价值,而CD117阳性、CD34阳性及结蛋白结蛋白阴性对GISTs有确诊意义。

骨形态发生蛋白/Smad信号转导机制及其对离心力刺激的响应

骨形态发生蛋白(BMP)是一类转化生长因子-β超家族成员的多功能分泌型信号分子,参与调节多种细胞的增殖、分化和程序性死亡,在组织器官的形成、胚胎的发育和损伤组织的修复中起关键作用。Smad蛋白是BMP细胞内信号转导和调节分子,可以直接将BMP细胞外信号从细胞膜转导入细胞核,构成BMP/Smad信号转导通路,而BMP/Smad信号转导通路在调节牵张成骨新骨形成中发挥着重要作用。笔者下面就体外培养细胞离心力加载装置和BMP/Smad信号转导机制及其对离心力刺激的响应作一综述。

三甲散对HSC-T6细胞α-SMA、TIMP-1和ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响

[目的]检测三甲散含药血清对肝星状细胞株(HSC-T6)细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶抑制-1(TIMP-1)和蛋白激酶(ROCK-Ⅰ)的表达,从而研究三甲散对HSC-T6细胞增殖作用的影响。[方法]以三甲散含药血清干预HSC-T6细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术,检测三甲散含药血清对HSC-T6细胞中α-SMA、TIMP-1和ROCK-Ⅰ的蛋白表达。[结果]三甲散和Y-27632显著地降低了HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ和TIMP-1 m RNA和蛋白的表达。[结论]三甲散可降低HSC-T6细胞ROCK-Ⅰ蛋白、TIMP-1和α-SMA的表达,从而抑制HSC-T6细胞的增殖。

SMAD5⁃AS1干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响及机制

目的观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)信号传导蛋白Sma和Mad相关蛋白同源物5(SMAD5)反义核糖核酸1(SMAD5⁃AS1)干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响,并初步探讨可能的机制。方法取人食管癌细胞株Eca109培养传代,分别转染SMAD5⁃AS1 siRNA沉默质粒、阴性对照质粒,并记为siRNA⁃1组、siRNA阴性对照组,另取未转染细胞记为对照组,每组设置3个复孔。实时逆转录聚合酶链反应(RT⁃qPCR)检测各组SMAD5⁃AS1、表观遗传诱导LncRNA⁃1(EPIC1)信使核糖核酸(mRNA)表达;细胞计数试剂⁃8(CCK⁃8)法检测各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞周期分布;RT⁃qPCR检测各组细胞细胞周期D1(cyclinD1)、促凋亡基因(Bad)、抗凋亡基因(Bcl⁃2)mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组细胞cyclinD1、Bad、Bcl⁃2蛋白表达。结果各组细胞SMAD5⁃AS1、EPIC1 mRNA表达水平比较:对照组>siRNA阴性对照组>siRNA⁃1组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞增殖活性比较:siRNA⁃1组>siRNA阴性对照组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和siRNA阴性对照组比较,siRNA⁃1组cyclinD1和Bcl⁃2 mRNA与蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05),G1/S期细胞占比、BadmRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05),上述指标siRNA阴性对照组和对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论SMAD5⁃AS1干扰可抑制人食管癌细胞株Eca109增殖,将其阻滞于G1/S期,推测与下调EPIC1、cyclinD1及Bcl⁃2表达,上调Bad表达有关。

34βE12、P63、CK5/6、α-SMA在前列腺基底细胞中的表达及意义

目的探讨高分子量细胞角蛋白34βE12、肌上皮标记物p63、细胞角蛋白CK5/6、平滑肌肌动蛋白α-SMA在前列腺基底细胞中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测,观察34βE12、p63、CK5/6、α-SMA在前列腺增生(PH)、低级别上皮内瘤变(LGPIN)、高级别上皮内瘤变(HGPIN)、前列腺癌(Pca)中的表达。结果 30例PH组标本34βE12、p63、CK5/6大多阳性表达,10例LGPIN组多(++)表达,15例HGPIN组多(+)表达,Pca组大多阴性表达。Pca组与PH组、LGPIN组、HGPIN组比较差异有统计学意义(P<0.05)。α-SMA基底细胞少量表达,Pca组与PH组、LGPIN组、HGPIN组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论前列腺基底细胞表达34βE12、p65、CK5/6,p65优于34βE12,α-SMA多阴性表达。在前列腺标本中联合检测34βE12、p65、CK5/6有助于对前列腺癌及其他不同病变的鉴别诊断。

TGF-β、Smad信号通路蛋白及α-SMA在糖尿病肾病患者肾组织中的表达和意义

目的检测转化生长因子(TGF)-β、Smad信号通路蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在糖尿病肾病(DN)患者肾活检组织中的表达,探讨DN的发病机制。方法收集DN肾组织标本28例(DN组);非DM行肾切除的正常肾组织10例为对照组。应用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-β受体(R)Ⅰ、TGF-βRⅡ、Smad2/3、α-SMA在肾组织中的表达。结果 (1)TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad2/3在DN组和对照组中均有表达,前者高于后者,DN组早期光镜下肾组织未见明显异常时即有明显的高表达,而随着疾病的进展未见表达增高的现象。肾小球、肾小管出现纤维化后并不表达上述因子。(2)对照组的α-SMA仅表达于肾血管、肾小球和肾小管,而肾间质未见α-SMA表达,而DN组α-SMA在上述组织中均有表达。结论TGF-β及Smad信号转导通路参与了DN的发病,DN可能与免疫复合物性肾小球肾炎具有相似的发病机制。

小鼠皮肤切创愈合过程中FAP和α-SMA的表达

目的观察小鼠皮肤切创愈合过程中成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein,FAP)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的变化规律。方法应用免疫组织化学和West-ern印迹法检测小鼠皮肤切创后各个时间段FAP和α-SMA表达情况。结果免疫组化结果显示FAP与α-SMA在正常对照组及伤后1h组小鼠皮肤弱表达,伤后6h阳性细胞率开始升高,伤后5dFAP阳性细胞率达高峰,伤后3dα-SMA阳性细胞率达高峰,伤后14dFAP与α-SMA恢复至与对照组相同。Western印迹法检测显示FAP和α-SMA从1d起各个时间段均有表达,其中5d为FAP的表达高峰,3d为α-SMA的表达高峰。结论FAP可作为法医学皮肤切创形成时间的推断指标,α-SMA可作为损伤修复中后期的推断指标,FAP与α-SMA联合使用有望成为推断皮肤损伤时间的有效指标。

茶多酚对胫骨骨折大鼠愈合及BMP2/Smad1/Runx2通路的影响

目的探究茶多酚(tea polyphenols, TP)对胫骨骨折大鼠的愈合作用,并初步探究其作用机制。方法将大鼠分为假手术组(Sham),模型组(Model),TP低、中、高剂量组(TP-L、TP-M、TP-H),阳性组(骨肽片组,Ossotide组),每组12只大鼠,X射线观察大鼠胫骨骨折愈合情况,并扫描离体胫骨检测骨矿物质密度值(BMD);HE染色观察胫骨组织形态学变化;酶动力学法检测血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)水平;氮蓝四唑光还原法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平;蛋白免疫印迹法检测骨形态发生蛋白-2(BMP2)、磷酸化-Sma-Mad蛋白1(p-Smad1)、Sma-Mad蛋白1(Smad1)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达情况。结果与Control组相比,Model组胫骨影像学愈合评分降低,BMD降低,胫骨出现较多纤维组织及软骨组织,形态学愈合评分降低,血清ALP水平降低,MDA升高,SOD降低,BMP2、p-Smad1、Runx2蛋白表达降低,差异显著(P<0.05);与Model组相比,TP各组、Ossotide组胫骨影像学愈合评分升高,BMD升高;纤维组织逐渐被骨组织替代,形态学愈合评分升高;血清ALP水平升高,MDA降低,SOD升高,BMP2、p-Smad1、Runx2蛋白表达升高,具有剂量依赖性,差异显著(P<0.05)。结论 TP可促进胫骨骨折大鼠骨折愈合,其机制可能与降低组织氧化应激损伤,激活BMP2/Smad1/Runx2通路有关。

SMAD7在多发性骨髓瘤中的表达及对细胞增殖和耐药的影响

目的·分析Sma和Mad相关蛋白7 (Sma-and Mad-related protein 7,SMAD7)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达,以及其对MM细胞的增殖和耐药的影响。方法·获取基因表达综合(gene expression omnibus,GEO)数据库中的3个数据集,分析SMAD7在健康捐献者和MM患者中的差异表达。通过收集8例健康捐献者和20例MM患者的骨髓标本,采用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)检测骨髓CD138+细胞中SMAD7 mRNA的相对表达,并分析其与患者临床资料的关系。在MM细胞KMS11中过表达SMAD7后,通过CCK8实验、细胞周期实验观察SMAD7对MM细胞增殖的影响。采用不同浓度的硼替佐米处理过表达SMAD7的KMS11细胞后,观察SMAD7对MM细胞的耐药影响及细胞的凋亡情况。结果·数据集中SMAD7表达数据的分析显示,与健康捐献者相比,SMAD7在MM患者中表达较高(均P<0.05)。qPCR检测结果显示,SMAD7 mRNA相对表达水平在MM患者中有上调(P=0.002),但未显示出与临床资料间存在关联。与对照细胞相比,过表达SMAD7后,KMS11的细胞活力均较高(均P<0.05);且细胞周期分布亦发生了变化,S期细胞的比例有所下降(P=0.016)、G2/M期细胞的比例有所上升(P=0.005);而经硼替佐米处理后,过表达SMAD7细胞的药物敏感性及凋亡水平均较低。结论·SMAD7在MM中表达上调,过表达SMAD7可促进MM细胞的增殖和耐药能力。

利用CRISPR/Cas9技术抑制Gp96的表达对小鼠酒精性肝纤维化过程中α-SMA和TGF-β1表达的影响

目的研究小鼠酒精性肝纤维化进程中,利用CRISPR/Cas9技术抑制Gp96的表达对小鼠肝脏中α-SMA和TGF-β1表达的影响。方法健康雄性C57BL/6J小鼠220只,随机分为4组。正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70),尾静脉注射质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组(n=70),腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC+酒精诱导肝纤维化组(n=70)。于酒精诱导第8周眼球取血处死各组小鼠,测定血清谷丙转氨酶(ALT);天狼猩红染色检测各组胶原纤维变化;免疫印迹(Western blotting)检测α-SMA和TGF-β1表达变化。结果与正常对照组相比,其余三组ALT显著上升(P<0.01),胶原纤维显著增加(P<0.01),α-SMA和TGF-β1表达显著升高(P<0.01),肝纤维化加重;与生理盐水+酒精诱导肝纤维化组相比,尾静脉注射质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组和腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC+酒精诱导肝维化组的ALT上升更为明显(P<0.01),胶原纤维增加更显著(P<0.01),α-SMA和TGF-β1表达提升更显著(P<0.01),提示肝纤维化加剧更显著。结论小鼠酒精性肝纤维化进程中,Gp96可能通过下调α-SMA和TGF-β1的表达来减轻肝纤维化程度,而NF-κB信号通路通过上调Gp96的表达进而抑制α-SMA和TGF-β1的表达,起到减轻肝纤维化的作用。

左卡尼汀通过TGF-β_(1)/Smad通路对尿毒症腹膜透析大鼠钙磷代谢的影响

目的探讨左卡尼汀通过转化生长因子-β_(1)/Sma和Mad相关蛋白(TGF-β_(1)/Smad)信号通路对尿毒症腹膜透析大鼠钙磷代谢的影响。方法将尿毒症腹膜透析大鼠分为模型组和左卡尼汀组,另给予假手术的大鼠作为对照组,每组10只。模型组和对照组分别灌胃生理盐水,左卡尼汀组灌胃左卡尼汀40 mg/kg,1次/d,持续6周。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血尿素氮、肌酐、甲状旁腺激素及钙、磷水平。采用Western blotting检测肾组织TGF-β_(1)、Smad及磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白相对表达量。结果模型复制前3组大鼠体重比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型复制6周后,与对照组比较,模型组和左卡尼汀组大鼠血肌酐、尿素氮、甲状旁腺激素及磷水平均升高(P<0.05),血钙水平降低(P<0.05),与模型组比较,左卡尼汀组大鼠血肌酐、尿素氮、甲状旁腺激素及磷水平均降低(P<0.05),血钙水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组和左卡尼汀组大鼠TGF-β_(1)和p-Smad3蛋白相对表达量均上调(P<0.05),与模型组比较,左卡尼汀组大鼠TGF-β_(1)和p-Smad3蛋白表达水平均下调(P<0.05)。结论左卡尼汀可通过抑制尿毒症腹膜透析的TGF-β_(1)/Smad通路活化来改善肾脏功能,提高血甲状旁腺激素、钙、磷水平,改善钙磷代谢平衡。

基于转化生长因子-β1观察三七总皂苷对大鼠跟腱异位骨化的组织学影响

目的:从组织学观察三七总皂苷(PNS)对大鼠跟腱异位骨化(HO)的影响,并基于转化生长因子-1(TGF-1)/Sma和Mad相关蛋白(Smad)同源物2/3信号通路探讨其潜在作用机制。方法:将126只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、西药组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组18只。HO造模术后分别给予不同浓度PNS或对照西药或生理盐水灌胃2周。于术后2周、5周及10周分别行小动物X线及CT平扫评估HO发生情况。采用一般组织学染色,包括苏木精-伊红染色、Masson三色染色及番红O固绿软骨染色,观测HO病灶内组织学改变。经免疫组织化学法比较各组病灶局部TGF-β1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)及p-Smad3表达的差异。结果:术后10周,X线检测可见各手术大鼠成骨率差异无统计学意义(P>0.05)。术后2周,手术大鼠跟腱细胞显著增加(P<0.05),跟腱纤维排列紊乱;5周可见大量增殖肥大软骨细胞;10周可见大量成熟异位骨组织形成。中剂量组术后10周相对骨量显著低于模型组(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,假手术组TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3表达术后与正常对照组比较均显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与模型组比较,中剂量组TGF-β1的表达在术后2周显著降低(P<0.05),表达峰值延后。结论:TGF-β1的表达在大鼠跟腱HO造模术后具有显著增加。一定浓度的PNS可降低异位骨组织的相对骨量,这可能与PNS延后TGF-β1的表达峰值并下调其表达量有关。

CD56和Nf在子宫平滑肌瘤中的表达

目的研究CD56和Nf在子宫平滑肌瘤中的表达及其临床意义。方法收集西安交通大学第二附属医院病理科261例手术切除的子宫平滑肌瘤样本,采用Ventana全自动免疫组化法检测雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)、结蛋白(Desmin)、神经细胞黏附分子1(neural cell adhesion molecule,NCA1 or CD56)和神经丝(neurofilament,Nf)在261例子宫平滑肌瘤细胞中的表达,并分析上述分子表达的临床意义。同时,以瘤旁非肿瘤性平滑肌作为内对照,以食道平滑肌瘤9例作为外对照;PBS作为阴性对照。结果ER、PR呈胞核型阳性表达,SMA、Desmin、CD56、Nf呈胞质型阳性表达。所有子宫平滑肌瘤均稳定表达ER、PR、SMA、Desmin。CD56在子宫颈平滑肌瘤细胞中的阴性、弱阳性、中等强度阳性和强阳性表达率分别为14.56%(38/261),26.05%(68/261),34.48%(90/261)和24.90%(65/261)。Nf在子宫颈平滑肌瘤细胞中的阴性、弱阳性、中等强度阳性和强阳性表达率分别为44.83%(117/261),30.27%(79/261),18.01%(47/261)和6.90%(18/261)。按照CD56和Nf表达的阳性强度分组,CD56与Nf在子宫平滑肌瘤中的表达无相关性(P<0.05)。同时,SMA、Desmin在食道平滑肌瘤中呈胞质型阳性表达,ER、PR、CD56和Nf在食道平滑肌瘤中呈阴性表达。结论CD56和Nf的阳性表达可能是子宫平滑肌瘤特异性的免疫表型特征。

乳腺良恶性病变中CD10表达及意义

目的 探讨CD10免疫标记乳腺肌上皮细胞的可行性。方法 收集50例乳腺良恶性病变的石蜡包埋标本(腺瘤、纤 维腺瘤、叶状肿瘤、纤维囊性病、导管内乳头状瘤、乳头腺瘤、导管内癌、小叶内癌、浸润性导管癌、浸润性小叶癌),采用免疫组 化(S P法)检测CD10在上述病变中的表达。结果 在乳腺良性病变中,CD10阳性的肌上皮细胞连续地环绕在普通型增生 的小导管的周围。但在囊性扩张或不典型上皮增生的导管周围,CD10阳性细胞不连续,甚至不见阳性细胞。导管原位癌的癌 细胞巢外周的阳性细胞由完整到不完整,甚至完全缺失。在浸润性癌中癌巢周围不见阳性细胞,在早期浸润性癌中可见残存 的阳性细胞。除少许癌细胞和肌纤维母细胞表达CD10外,其余癌细胞、肌纤维母细胞、血管平滑肌细胞和上皮细胞均不表达 CD10。结论 CD10标记肌上皮细胞具有较高的敏感性和特异性,可以作为肌上皮细胞的有效标记物。

缺氧对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

[目的]研究缺氧对阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化的影响。[方法]用酶消化法获取SD大鼠的原代CCSM,并用细胞免疫荧光法进行鉴定。将原代CCSM置于缺氧小室中(37℃,5%CO2,1%O2,94%N2)培养,按缺氧时间分为0h组、24h组、48h组、72h组,用western-blot法检测四组的α-SMA、OPN蛋白表达量。[结果]低氧可以诱导CCSMα-SMA蛋白表达下降,且在72h内随着缺氧时间延长差异显著性增加。低氧24h组细胞OPN蛋白表达增加(P<0.05);低氧48h组细胞OPN蛋白表达显著增加(P<0.01);48h后随着时间延长差异可能会减小(P>0.05)。[结论]缺氧可以诱导CCSM由收缩型向合成型转化。

microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑

目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。

长半衰期重组人超氧化物歧化酶的研制及性质

一种双亲有机化合物聚苯乙烯马来酸丁酯（ＳＭＡ）经酰胺键与重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕ／ＺｎＳＯＤ）共价交联，制得修饰酶．当４２％游离氨基被修饰时，保留酶活力为８８％．酶蛋白主链结构在修饰前后变化不大．与天然酶相比，修饰酶的生物半衰期延长了２２倍，抗蛋白水解酶能力亦有所增强．